僧帽弁逆流は心不全を引き起こす一般的な弁疾患である。このラットMRモデルは、心不全の根本的なメカニズムの理解をさらに深めるのに役立ちます。このモデルは、この弁病変を有する患者において観察される止結力を模倣した鼓動心臓においてMRを誘導し、このモデルを臨床的に関連させる。
マイクロサージャストとハンドリングの経験は、このプロトコルを複製するのに役立ち、心エコー画像と画像解釈に精通することは、針の配置を成功させるための重要な側面です。これは画像ガイドによる手法であるため、方法の視覚的なデモンストレーションは、手順を理解する上で役立ちます。麻酔された350〜400グラムの成人スプレイグ・ドーリーラットの標準的なプロトコルに従って左開口術を行った後、6-0 PROLENE縫合糸およびマイクロニードルホルダーを使用して、左心室の頂点に財布縫合糸を配置する。
頂部を安定させるために頂端縫合糸をそっとテザーし、生理食い物で洗い流された23ゲージの針を挿入し、遠位端のストップコックを財布の縫合糸の中心と左心室腔に挿入します。針を安定して導くために片手を使用して、針を視覚化するための最適なエコービューを達成するために同時に経食道エコープローブを操作するためにもう一方の手を使用します。リアルタイム超音波ガイダンスを使用して、前僧帽弁リーフレットの心室側に針を進めます。
針の位置が確認されたら、弁のリーフレットを通して1つの細かい動きで針を進める。リーフレットを通して、僧帽弁から離れた左心室に針を引き込み、助手にカラードップラーイメージングをオンにして、必要に応じてエコープローブを調整してMRを確認し、より良いビューを得る。MRが確認されたら、左心室腔から針を完全に引き込み、財布の縫合糸をそっと結びます。
その後、無菌ガーゼを使用して、頂点と胸腔内の血液を吸収します。5~10分間の安定した心機能の後、中断した4-0 Vicryl縫合糸を使用してイソフルランを2%次に減らしながら肋骨を近似し、胸管を第6肋間空間に挿入し、チューブを無菌ドレープに固定して、チューブを胸腔への不注意な進行を避け、肋骨に近似仕上げます。連続縫合糸を使用してイオブルランを1.5%、イオブルランを1%のイオブルランで皮膚層を閉じ、10ミリリットルのルアーロックバルブを胸管にシリンジを接続し、胸腔から10〜12ミリリットルの空気を排出してからチューブを取り外します。
チューブが取り除かれたら、カルプロフェンの最終的な皮下用量を投与する。イオフイオフの後、ラットが麻酔から離れ、バイタルサインを監視しながら、機械的換気を続けます。自然呼吸の発症時に、呼吸を維持するラットの能力と良好な末梢腔酸素飽和をテストするために換気をオフにします。
ラットが換気なしで末梢毛管酸素飽和レベルを維持できるようになると、気管内チューブにアンカー縫合糸を切断し、動物を抜管する。ラットが外来のとき、最小限の寝具できれいなケージに動物を移し、ハンドヘルド末梢毛管酸素飽和モニターでバイタルサインを監視し続けます。目を覚ます3時間以内に、ブプレノルフィンを投与する。
手術の2週間後、麻酔をかけられたラットを右の褥瘡の位置に置き、8メガヘルツ8-フランスの心臓内超音波プローブを挿入し、少量のゲルを動物の食道に入れる。2室のビューで色ドップラーイメージングを使用して、左心室と左心房を視覚化し、示されたとおりにMRジェット領域の画分を計算できるように左心房とMRジェットの面積を測定する。逆流オリフィスの面積を近似するには、針の外径を使用して、式を使用して23ゲージ針の面積を計算します。
逆流ジェットのオリフィスでドップラーゲートを用いた連続波ドップラーイメージングを取得し、波形をトレースして逆流ジェットの速度時間積分を計算します。MR ボリュームを見積もるために、この式を使用します。次にエコープローブを時計回りに回して肺静脈のパルス波ドップラー画像を取得し、比率を計算する式を使用して収縮期波および拡張期波速度を測定します。
これらの画像では、僧帽弁に挿入される針の方向が観察できる。ここで、処置後2週で剥離した代表的なラットの僧帽弁リーフレットに残された穴が示されている。手術後2週間で、MRを持つラットの心臓は球状で重度に拡張され、生き生きとしたMRジェット機は平均面積約21平方ミリメートル、平均速度時間は約40センチメートルで明らかである。
正規化されたMR画分は、典型的には約42%であり、米国心エコー学会のガイドラインに従って厳しいと考えられている。MRの重症度は、収縮期/拡張期比をベースラインで約0.9から2週間で約マイナス0.7に減少させる肺流れの逆転を誘発するのに十分である。経食道心エコー検査によるリアルタイムイメージングと、鼓動心臓への針の導入による僧帽弁葉を穿刺する術は、教えられる実行可能な外科的処置である。
私たちのモデルは心室心筋症と組み合わせて心臓リモデリングを研究し、心臓リモデリングに対するMRの早期発症と遅発の影響の調査を容易にする。
