Disección de estrías vasculares de ratón adulto para secuenciación de un solo núcleo o inmunotinción

La estría vascular funciona para generar el potencial endococlear y regular la homeostasis iónica en la cóclea. El programa de desarrollo y restauración auditiva busca comprender los mecanismos subyacentes que conectan la homeostasis de iones disfuncionales con los trastornos auditivos y de estabilidad, que son enfermedades en las que se produce fluctuación o pérdida auditiva repentina. El trabajo en mi laboratorio ha establecido el paisaje transcripcional de la estría vascular y ha contribuido a nuestra comprensión de su importancia en la audición.

Hemos utilizado estos datos para establecer paralelismos con trastornos auditivos y de estabilidad poco conocidos, incluida la enfermedad de Meniere. Este protocolo permite la disección y el aislamiento de la estría vascular de montaje completo para estudios moleculares adicionales, incluida la inmunohistoquímica. Dado que los tipos de células de estría vascular están intrincadamente entrelazadas entre sí, el uso del aislamiento nuclear y la secuenciación de ARN de un solo núcleo ha facilitado nuestra comprensión de la distinta maquinaria transcripcional involucrada.