Pour commencer, à l’aide d’un scalpel, faites une incision précise le long des deux coins de la bouche d’un rat euthanasié pour exposer le tissu musculaire. Utilisez une paire de ciseaux à tissu pour couper les articulations de l’os zygomatique et de la mandibule des deux côtés du crâne. Retirez ensuite la mandibule.
Utilisez des ciseaux à tissu pour couper la connexion osseuse entre la cavité nasale et le maxillaire. Ensuite, utilisez un hémostatique pour séparer la peau du maxillaire afin d’exposer la cavité nasale. Coupez la connexion entre la cavité nasale et les os orbitaires des deux côtés au niveau du foramen infra-orbitaire et retirez la cavité nasale.
Placez la cavité nasale extraite dans une solution de paraformaldéhyde à 4% pour la fixation. Pour décalcifier le tissu, lavez le tissu fixé avec de l’eau distillée. Placez les tissus dans une solution de décalcification d’un volume de 20 à 30 fois celui des tissus à température ambiante.
Une fois la détartrage terminée, placez le tissu dans une boîte de déshydratation. Transférez la boîte de déshydratation dans un déshydrateur et déshydratez les tissus en augmentant les concentrations d’alcool à différents moments d’incubation. Ensuite, placez le tissu dans de l’éthanol anhydre pendant 30 minutes pendant deux cycles.
Ensuite, transférez le tissu sur du xylène pendant cinq à 10 minutes et répétez, puis plongez le tissu dans de la cire pendant une heure. Placez le bloc de cire dans les cassettes d’enrobage. Retirez les blocs de cire une fois qu’ils se sont solidifiés et coupez le bloc de cire.
Insérez le bloc de cire paré dans un microtome de paraffine et coupez-le en tranches de trois micromètres d’épaisseur. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine des rats témoins a montré des cils bien arrangés. La muqueuse nasale de la cloison nasale a été endommagée et détachée dans le groupe de la maladie avec une infiltration notable de neutrophiles.
