Génération de rats hypoparathyroïdiens par parathyroïdectomie assistée par nanoparticules de carbone

L’objectif global de ce protocole est de générer un modèle d’hypoparathyroïdie acquise chez le rat qui soit facile à établir, de caractère stable et inoffensif pour les glandes thyroïdes. Le principal avantage de ce modèle est l’élimination précise des glandes parathyroïdes à l’aide de nanoparticules de carbone. Nous espérons que le modèle pourra aider à résoudre quelques questions dans le domaine de l’hypoparathyroïdie.

Par exemple, l’utilisation préopératoire de calcium et de vitamine D pour réduire le risque d’hypocalcémie post-thyroïdectomie. Cette méthode peut donner un aperçu de la façon dont le renouvellement osseux est affecté par les analogues de la PTH et comment les analogues de la PTH affectent le corps à long terme. Ceux qui effectuent cette technique pour la première fois peuvent avoir du mal à micro-manipuler sous le stéréomicroscope.

Une certaine pratique sous stéréomicroscope peut être utile. Pour commencer, placez le rat anesthésié en décubitus dorsal et rasez la fourrure de la région du cou ventral. Après avoir pratiqué une incision comme décrit dans le manuscrit, localisez les lobes de la glande thyroïde.

À l’aide d’une seringue de 10 microlitres équipée d’une aiguille conique de calibre 30, injecter un microlitre de la suspension de nanoparticules de carbone dans la partie mésiale de la membrane de la glande thyroïde. Après cinq minutes, irriguer la région avec une solution saline pour nettoyer toute suspension supplémentaire. Assurez-vous que les glandes thyroïdes sont devenues noires et observez la glande parathyroïde non tachée.

Coupez les glandes parathyroïdes non tachées à l’aide d’une paire de pinces microchirurgicales et de ciseaux, puis fermez l’incision avec une suture horizontale interrompue du matelas. Après la chirurgie, placez les rats sur une couverture électrique thermostatique à 37 degrés Celsius pour maintenir leur température corporelle. Après sept jours, prélevez 10 microlitres de sang en utilisant la veine de la queue.

Mesurer le calcium sérique, le phosphore inorganique sérique et l’hormone parathyroïdienne sérique à l’aide de trousses commerciales. Les rats parathyroïdectomisés ont présenté une hypocalcémie et une hyperphosphatémie stables au cours de la période d’observation de quatre semaines. L’hormone parathyroïdienne sérique n’a pas été détectée chez les rats parathyroïdectomie sept jours après l’opération.

L’urée sérique et la créatinine étaient comparables entre les groupes placebo et parathyroïdectomie sept jours après l’opération. Une réduction des ions calcium urinaires et des taux de phosphate inorganique a été observée deux semaines après l’opération. Aucune différence significative de poids corporel n’a été observée entre les groupes parathyroïdectomie et simulacre sur 28 jours.

Le C-télopeptide sérique a diminué de manière significative chez les rats parathyroïdectomie. Il n’y avait pas de différences significatives dans les taux sériques d’ostéocalcine. Cependant, l’injection de suspension de nanoparticules est la chose la plus importante et une injection réussie est essentielle pour l’identification et l’élimination actuelle des glandes parathyroïdes.

D’autres méthodes incluent la chirurgie guidée par fluorescence, l’injection de toxine diphtérique de souris transgéniques PTHcre-iDTR et la parathyroïdectomie stérile qui pourrait aider à répondre aux questions dans le domaine de l’hyperthyroïdie.