This work is supported in part by American Heart Association Scientist Development Grant and NARSAD Young Investigator Award to Yingwei Mao.

REMARQUE: Tous les protocoles impliquant des animaux ont été respectées en accord avec les lignes directrices de soins aux animaux de la Pennsylvania State University, IACUC # 44057 1. lentivirus production NOTE: Le jour avant la transfection, LentiX-293 devrait être à 80% de confluence. <ol><li> Rincer les cellules avec du DMEM juste avant la transfection et incuber dans 10 ml de DMEM / 10% de FBS avec de la pénicilline (100 UI / ml) et streptomycine (100 ug / ml) pendant 5 min à température ambiante. </li><li> Diluer l&#39;ADN et de polyéthylèneimine (PEI) (1 mg / ml) dans 1: 3 (1 ug d&#39;ADN: 3 ul de PEI) dans 1 ml de DMEM et vortex pendant 1 min. Le volume ajouté est de l&#39;ADN dépend de la concentration de l&#39;ADN. Incuber à température ambiante pendant 10 min. <ol><li> Par exemple, utiliser 20 ug d&#39;ADN plasmidique, composé de 10 ug du vecteur plasmidique, 5 ug de psPax2 14 plasmide, 5 ug de virus de la stomatite vésiculaire (VSV) avec 60 pi de PEI par boîte. </li></ol></li><li&gt; Mélanger l&#39;ADN et de solution de PEI à nouveau au vortex pendant 1 min. Incuber à température ambiante pendant 10 min. </li><li> Ajouter 1 / 10ème du volume de milieu de culture DMEM total de (c.-à-1 ml pour 10 ml de milieu de culture dans une boîte de 100 mm). Ajouter 1 ml de l&#39;ADN-PEI mélange goutte à goutte dans le plat et agiter le plat autour jusqu&#39;à ce que le milieu de culture est bien mélangé avec l&#39;ADN. </li><li> Incuber pendant 6 heures à température ambiante et retirer le surnageant. Ajouter 5 ml de milieu de culture. </li><li> 48 h après la transfection, recueillir le surnageant viral et de spin à 627 x g pendant 5 min à 4 ° C dans un tube de 50 ml. Filtrer 30 ml de surnageant viral à travers un filtre à seringue de 0,45 um dans un tube d&#39;ultracentrifugeuse. </li><li> Ajouter de l&#39;eau stérile pour équilibrer les tubes, et couvrir tubes avec petit morceau de parafilm. tubes de tourner à 11 249 g pendant 120 min à 4 ° C. Retirer le liquide avec l&#39;aide d&#39;un bout de l&#39;aspirateur. </li><li> Ajouter 100 pi de PBS froid le tube. Secouer doucement le tube à 4 ° CO / N. </li><li> Pour remettre en suspension le virus, pipette til PBS ajouté dans l&#39;étape 1.8 sur les granulés 10 fois, en faisant attention à ne pas toucher le culot avec la pointe. Le culot ne sera pas remis en suspension jusqu&#39;à ce qu&#39;elle soit complète. </li><li> Aliquoter le virus à 10-20 pi par tube, flash-gel dans de l&#39;azote liquide et conserver à -80 ° C. </li></ol> 2. Injection stéréotaxique 2.1) Préparation des Instruments <ol><li> Passer une paire de ciseaux, une pince à extrémités émoussées, un porte-aiguille, scalpel, des cotons-tiges, et un tissu dans un emballage scellé avec un indicateur de stérilisation, et autoclave avant l&#39;intervention chirurgicale. En outre, obtenir 10% d&#39;iode de povidone, l&#39;alcool éthylique à 70%, sutures absorbables, un coussin chauffant, des larmes artificielles, un verre stérilisateur à billes, perceuse, une mèche, 2 seringues jetables, une seringue d&#39;injection, rasoir électrique, analgésique (kétoprofène), anesthésique (Avertin), des gants et un appareil stéréotaxique avec pompe d&#39;injection. </li><li> Préparer une solution de 1,25% avertin frais ce jour-là, filtre dans une hotte stérile en utilisant un 0,2 &amp;# 181; m filtre seringue stérile, et la placer dans un flacon de sérum stérile. Mélanger 2,5 g d&#39;alcool 2,2,2-tribromoéthyle dans 5 ml d&#39;alcool tert-amylique, puis dissoudre dans 200 ml d&#39;eau. Gardez le pH inférieur à 5. 15 </li></ol> 2.2) Préparation de la souris <ol><li> Administrer avertin basé sur le poids de la souris (375 mg / kg). 15 Injecter la souris avec le avertin via un (IP) injection intrapéritonéale, puis remettez-le dans sa cage jusqu&#39;à pleinement anesthésiés. </li><li> Donnez un analgésique par injection IP (ketaprofen, 5 mg / kg), et le lieu des larmes artificielles sur les yeux de la souris pour éviter le dessèchement. </li><li> Assurez-vous que la souris est complètement endormie en pinçant leur pied. Si la souris répond à la pincée de pied, puis donner plus anesthésique (à des doses de 50 pi). Raser la tête de la souris à l&#39;aide d&#39;un rasoir électrique. Raser la zone à opérer (typiquement de juste derrière les oreilles, à la partie supérieure du museau) et la région environnante. </li><li> Placez le i de la sourisNto l&#39;appareil stéréotaxique. Verrouiller les dents de devant sur la pince antérieure, et abaisser la pince et le serrer de telle sorte que la mâchoire est entièrement sécurisé. </li><li> Insérez les barres d&#39;oreilles dans le canal de l&#39;oreille pour se stabiliser complètement la tête. Veillez à ne pas insérer les barres d&#39;oreilles trop loin, ce qui pourrait endommager l&#39;oreille interne. Une fois terminé, le corps de la souris devrait être en mesure d&#39;être légèrement déplacé sans perturber la position de la tête. </li><li> Placez un coussin chauffant sous la souris afin de réguler la température du corps de la souris tout au long de la procédure. </li><li> Nettoyez soigneusement la zone chirurgicale. En utilisant un coton-tige, frottez 10% de povidone iode dans un mouvement circulaire, à partir du milieu du site chirurgical et se déplaçant vers l&#39;extérieur. Ensuite, utilisez un coton-tige pour frotter l&#39;alcool éthylique à 70% sur le site chirurgical de la même façon. Répéter deux fois. </li></ol> 2.3) La première incision <ol><li> Une fois que la souris est préparée, ouvrir le sac de matériel stérile. Changer de gants avant touching les instruments. Sortez le tapis stérile et placer les instruments sur la toile. Si tout instrument touche une surface non stérile, utilisez la vitre stérilisateur à billes pendant 15 secondes pour le stériliser. </li><li> Prenez le scalpel dans les forceps dominantes de la main et extrémités franches dans la main non dominante. Utilisez la pince à extrémités émoussées à adhérence doucement la peau de la souris, et faire une incision au bistouri. Commencez l&#39;incision d&#39;environ 1,5 cm au-dessus des oreilles (vers le nez) et étendre à environ 0,5 cm au-dessous des oreilles. Elargir l&#39;incision verticale au milieu de la tête de la souris pour exposer bregma (Figure 1). </li><li> Une fois bregma est visualisé, prendre un bout de coton stérile pour éliminer en douceur toute trace de sang recouvrant la surface du crâne. Utilisez deux conseils de coton pour pousser la peau vers le côté de la tête. </li></ol> 2.4) Installation du matériel <ol><li> Après tout sang est retiré de la surface du crâne, et est clairement visualisé bregma, préparer la seringue (concentration de 10 8 TU / ml, volume de 1 pi). Dans la hotte, à remplir la seringue avec le virus à injecter. Assurez-vous que pas de bulles sont à l&#39;intérieur. Placez la seringue dans l&#39;appareil stéréotaxique, veillant à ce qu&#39;il soit entièrement garanti. </li><li> Abaisser lentement la seringue jusqu&#39;à ce qu&#39;il se trouve juste au-dessus de la surface du crâne, de sorte que la pointe de l&#39;aiguille de la seringue stérile est fixé à l&#39;intersection de la ligne et bregma interauriculaire. Réglez ce point zéro, et déterminer les coordonnées de ce point. </li><li> En fonction de la zone du cerveau d&#39;intérêt, les coordonnées stéréotaxiques varier. Déterminer ces coordonnées en utilisant un atlas du cerveau 4. Une fois les coordonnées sont déterminées, déplacer l&#39;aiguille de la seringue pour correspondre à ces coordonnées. Cibler les gyrus denté utilisant les coordonnées: M / L = +/- 1 mm, A / P = -1,82 mm. Abaissez l&#39;aiguille à droite au-dessus du crâne de visualiser où le trou doit être percé. </li><li> Soulever légèrement la seringue, prenez la perceuse et placer le bi de foraget juste au-dessus du site de forage cible à environ un angle de 45 ° sur le crâne. Commencer le forage, et de garder le forage jusqu&#39;à ce que le crâne cède. Lorsque le crâne cède la place, une baisse de la résistance peut être détectée. Veillez à ne pas percer dans le cerveau, de manière à prévenir les dommages corticale. </li><li> Prenez un bout de coton stérile et essuyer le sang du trou. </li><li> Abaissez la seringue de sorte que la pointe se trouve à droite sur la surface du cerveau (pas le crâne). Réglez le D / V de coordonnées (profondeur) à 0. Lower la seringue à la profondeur désirée, sur la base des coordonnées de l&#39;atlas du cerveau. Pour atteindre le gyrus denté, réglez D / V à -1,79 mm. </li><li> Lancer l&#39;injection à un débit de 0,2 ul / min. Lire à faire en sorte que la seringue ne glisse pas inférieure à la profondeur désirée. Si cela se produit, soulevez doucement la seringue à la profondeur désirée nouveau. </li><li> Après l&#39;injection est terminée, attendre environ 2 min pour assurer que tout virus résiduel a été absorbé. Soulevez lentement la seringue et d&#39;utiliser un coton-tige pour enlever toute liquid à partir du site d&#39;injection. </li><li> Répétez l&#39;opération pour l&#39;autre hémisphère. </li></ol> 2.5) suture <ol><li> Retirer le fil de suture et une aiguille stériles de son emballage et l&#39;adhérence de l&#39;aiguille en utilisant les supports d&#39;aiguille. Face à la pointe pointue de l&#39;aiguille loin de la porte-aiguille. Tenez les pince à extrémités émoussées dans la main non-dominante, et l&#39;utiliser pour saisir la peau de la souris. Commencez avec la main dominante. </li><li> Poussez doucement le fil de suture à travers la peau et utiliser les pince à extrémités émoussées pour saisir la peau de l&#39;autre côté de l&#39;incision. Tirez sur le support de suture à travers jusqu&#39;à environ 0,75 pouce reste. </li><li> Lâcher de l&#39;aiguille, et d&#39;utiliser les pince à extrémités émoussées pour envelopper le fil de suture autour du porte-aiguille une fois, puis, prenez le reste suture 0,75 pouces avec le support d&#39;aiguille, et tirez le fil de suture à travers, de sorte que le porte-aiguille et l&#39;aiguille finir sur le côté de la tête opposée à celle sur laquelle ils sont à l&#39;origine. Cela devrait former un noeud. </li><li> Répétez cette étapetrois fois, en alternant le côté de la tête du porte-aiguille se termine sur à chaque fois. </li><li> Couper le fil de suture et répétez les étapes 2.5.1-2.5.3 jusqu&#39;à l&#39;incision est fermée. </li></ol> 2.6) de soins post-opératoires <ol><li> Retirez délicatement les barres d&#39;oreilles de la souris, et retirer sa mâchoire de la pince antérieure. </li><li> Garder la souris sur le coussin chauffant jusqu&#39;à ce qu&#39;il se réveille et se déplace sur son propre. Surveiller la souris quotidienne, et de garder et œil sur les signes de douleur, comme ne pas se nettoyer, manger ou boire. Donnez analgésique supplémentaire lorsque cela est jugé nécessaire. </li></ol> 3. Ouvrez Field Test 3.1) Set Up <ol><li> Obtenir un carré vide, l&#39;arène en plastique avec des dimensions de 50 cm x 50 cm, avec 50 cm de hauts murs (mais peuvent être légèrement plus grand). Nettoyer la scène avec de l&#39;alcool éthylique à 70% avant le début de l&#39;expérience. Assurez-vous que l&#39;alcool éthylique a complètement sec avant de placer une souris dans l&#39;arène. </li><li> Placez l&#39;arène sur lede-chaussée, et essayer d&#39;assurer l&#39;éclairage est réglé pour minimiser les ombres et les reflets. </li><li> Si vous utilisez un logiciel de suivi, positionner la caméra directement au-dessus du champ ouvert, environ 1,5 pieds au-dessus du champ ouvert (assez loin pour englober l&#39;ensemble complet arène, mais assez proche pour avoir une vision claire de la souris). </li><li> Mettre en place une zone dans le centre de la boîte (environ une superficie de 30 cm x 30 cm). 16 Pour régler une zone, cliquez sur l&#39;onglet zone 1 dans le panneau latéral. <ol><li> Sélectionnez un contour de forme dans le panneau supérieur, et de définir le périmètre de la zone centrale. Sélectionnez la zone ajouter, et cliquez sur l&#39;intérieur de la zone centrale. En utilisant les invites de programme, le nom de la zone (ce qui sera dénommé «centre» pour cette procédure). Si le test de comportement sera marqué par la main, assurez-vous que le fond du champ est divisé en 10 cm x 10 cm carrés, marqué en utilisant du ruban. </li></ol></li><li> Mettre en place le logiciel de sorte que les paramètres sont corrects, et la souris est facilement visible sur l&#39;écran. Accomplir cela en ajustant les paramètres de détection sur la machine pour être compatible avec l&#39;arène de test (éclairage) et la couleur de la souris. NOTE: Lorsque les paramètres sont corrects, le système doit suivre uniquement la souris, et non les ombres ou les urines / matières fécales. Les paramètres logiciels spécifiques dépendent de l&#39;éclairage de la scène, et la couleur de la souris. </li></ol> 3.2) acclimatation et d&#39;essai <ol><li> Déplacez la souris expérimentales dans le comportement chambre 1 h avant le test afin de les acclimater à leur environnement. Laissez les souris dans leur cage pour l&#39;acclimatation. </li><li> Allumez l&#39;appareil photo à la bande de la tâche comportementale et placez la souris vers l&#39;avant centre de l&#39;arène pour que la souris est face au mur. </li><li> Réglez la minuterie pour 5 min, et pas loin de l&#39;arène. Si possible, quitter la salle afin de ne pas influencer accidentellement la souris. </li><li> Une fois 5 min sont en place, retirer la souris et placez-les dans leur cage. </li><li> Utilisez de l&#39;alcool éthylique à 70% pour nettoyer à fond sur le terrain avant de passer à la prochaine souris. Assurez-vous que l&#39;alcool éthylique a entièrement séché. </li></ol> 3.3) Scoring <ol><li> Considérez la souris comme étant au centre du terrain lorsque les quatre pattes sont à l&#39;intérieur du milieu de 30 cm x 30 cm. </li><li> Quantifier la quantité de fois que la souris passe au centre. Alternativement, de déterminer cette fois en utilisant un logiciel de suivi (comme Noldus ethovison). <ol><li> Pour ce faire, allez dans l&#39;onglet d&#39;analyse, et cliquez sur «mouvement» dans les profils d&#39;analyse. Supprimer les catégories actuellement sélectionnées, puis sélectionnez &quot;dans la zone&quot; sous l&#39;onglet emplacement. Sélectionnez la zone centrale. Ensuite, sélectionnez &quot;sortie d&#39;analyse&quot; (sous l&#39;onglet de résultats) pour afficher les résultats. Un tableau énumérant le temps passé immobile pour chaque essai devrait apparaître. </li></ol></li><li> Sinon, le score de l&#39;OFT à la main. Le champ ouvert devrait avoir 25 à 10 cm x 10 cm carrés décrites sur le fond de l&#39;OPEchamp de n (comme indiqué dans l&#39;étape 3.1.3). Quantifier la quantité de fois que la souris passe au centre, en plus du nombre d&#39;entrées dans le centre de l&#39;arène. 16 NOTE: Le centre de 30 cm x 30 cm zone est considérée comme le centre du champ ouvert. Une souris est considéré comme vivant dans la région centrale si les quatre pieds sont à l&#39;intérieur de la zone 30 cm x 30. </li></ol> 4. test de natation forcée REMARQUE: Prévoir un minimum de cinq jours entre tâches comportementales. 4.1) Set Up <ol><li> Obtenir un 2 L seau claire, et remplir avec 22 ° C de l&#39;eau. Placez le seau sur une table, et essayer d&#39;assurer l&#39;éclairage est réglé pour minimiser les ombres et les reflets. </li><li> Si l&#39;on utilise un logiciel de suivi, positionner la caméra juste au-dessus du godet. </li><li> Mettre en place un logiciel pour que la souris est facilement visible à l&#39;écran. </li></ol> 4.2) acclimatation et d&#39;essai <ol><li> Déplacez souris expérimentales dans le ro comportementaleom 1 h avant le test pour acclimater les environs. Laissez les souris dans leur cage pour l&#39;acclimatation. </li><li> Allumez l&#39;appareil photo à la bande de la tâche comportementale. Doucement, placez la souris dans le milieu du seau d&#39;eau. Veillez à ne pas laisser tomber la souris dans. Abaissez lentement la souris, de sorte que ses pieds avant touchent l&#39;eau en premier. Prenez soin d&#39;éviter de submerger leur tête. </li><li> Réglez la minuterie pour 6 min, et pas loin de la zone de comportement. </li><li> Une fois 6 min sont en place, retirer la souris dans le seau, et essuyez l&#39;excès d&#39;eau avant de placer la souris de retour dans leur cage. </li></ol> 4.3) Scoring <ol><li> Si vous utilisez un logiciel de suivi, mis pour cent immobilité à 11%, tel que suggéré par Noldus (cela devrait être le réglage par défaut), pour quantifier le temps flottant vs piscine. </li><li> Pour quantifier en utilisant le système de suivi, allez dans l&#39;onglet d&#39;analyse, puis cliquez sur le mouvement sous des profils d&#39;analyse. Supprimer les catégories actuellement définies, puis sélectionnez l&#39;état de mobilité, surle panneau latéral gauche (sous le comportement individuel). Ensemble immobilité à 11%. </li><li> Sélectionnez la piste de visualisation, sous l&#39;onglet Résultats. Sélectionnez sortie d&#39;analyse (sous l&#39;onglet de résultats) pour afficher les résultats. Un tableau énumérant le temps passé immobile pour chaque essai devrait apparaître. </li><li> Si le ballon de la main, mesurer le temps de la souris passe la natation ou l&#39;escalade, et la quantité de fois que la souris passe immobile. En outre, de mesurer la latence à la première immobile temps. Voir Figure 2 dans la section Résultats. </li></ol>

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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+hippocampal+neurogenesis+buffers+stress+responses+and+depressive+behaviors.">Adult hippocampal neurogenesis buffers stress responses and depressive behaviors.</a> Nature. 476 (7361), 458-461 (2011).</li><li>Sik-Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+neuronal+vascular+endothelial+growth+factor+expression+by+cAMP+in+the+dentate+gyrus+of+the+hippocampus+is+required+for+antidepressant-like+behaviors.">Induction of neuronal vascular endothelial growth factor expression by cAMP in the dentate gyrus of the hippocampus is required for antidepressant-like behaviors.</a> Journal of Neuroscience. 29 (26), 8493-8505 (2009).</li><li>Miller, D. G., Adam, M. A., Miller, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+by+retrovirus+vectors+occurs+only+in+cells+that+are+actively+replicating+at+the+time+of+infection.">Gene transfer by retrovirus vectors occurs only in cells that are actively replicating at the time of infection.</a> Molecular and Cellular Biology. 10 (8), 4239-4242 (1990).</li><li>Rubinson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lentivirus-based+system+to+functionally+silence+genes+in+primary+mammalian+cells,+stem+cells+and+transgenic+mice+by+RNA+interference.">A lentivirus-based system to functionally silence genes in primary mammalian cells, stem cells and transgenic mice by RNA interference.</a> Nature Genetics. 33, 401-406 (2003).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Injections stéréotaxiques succès reposent sur trois facteurs: en gardant la souris vivante, le réglage du point zéro correct pour coordonnées (pointe de l&#39;aiguille sur l&#39;intersection de bregma et la ligne interauriculaire), et le réglage de la bonne profondeur au point zéro (pointe de l&#39;aiguille juste toucher l&#39;extérieur du tissu cérébral). La viabilité des souris est important. la survie de la chirurgie peut être facilitée en faisant en sorte que la souris est correctement anesthésié et ...

La souris a été largement utilisé en neurobiologie, car il est facile à manipuler génétiquement. Techniques Gene knock-out permettent aux chercheurs d&#39;étudier comment chaque facteur génétique façonne les comportements de souris. En outre, le système cre-loxP fournit un outil précieux pour tissulaire et la cellule type- KO de gène spécifique chez la souris, ce qui permet aux chercheurs d&#39;étudier la fonction des gènes dans différents tissus. 1 Toutefois, dans la pratique, les profils d&#39;expression des promoteurs de la CRE sont difficiles à contrôler , et si loin de nombreux chauffeurs de cre établies ont pas atteint l&#39;expression spécifique à la région. 2,3 En variante, une injection stéréotaxique est une méthode qui cible des régions spécifiques du cerveau de la souris adulte. Par l&#39;injection de virus génétiquement modifiés exprimant des shRNA ou ADNc, de la modulation de l&#39;expression génique spécifique à la région peut être obtenue. Bien que la taille du cerveau de chaque souris varie, l&#39;emplacement des régions spécifiques du cerveau peut être déterminé en utilisant coor stéréotaxiquenates réglée de points de repère sur le crâne du cerveau de la souris. Les monuments les plus couramment utilisés sont bregma, lambda, et la ligne interauriculaire. Utilisation de coordonnées obtenues à partir d&#39;un atlas du cerveau, 4 l&#39;emplacement exact de chaque région du cerveau peut être identifié par le antéro-postérieur (A / P), médiale-latérale (M / L), et dorso-ventral (D / V) des axes à partir de bregma / interaural intersection de la ligne. Typiquement les virus se injecté dans le cerveau de souris sont étiquetés avec soit la protéine fluorescente rouge ou vert (DP ou GFP), de sorte que les injections peuvent être confirmés par la microscopie à fluorescence. Évaluations comportementales de souris sont particulièrement nécessaires pour la recherche fondamentale de troubles psychiatriques. Les symptômes de troubles psychiatriques chez les patients impliquent généralement des comportements anormaux. Certains de ces comportements humains sont évolutivement conservées et peuvent être directement imité et observé chez la souris. Par exemple, la dépression peut être modélisée chez la souris par la mesure de désespoir comportemental. Les gens souffrant de dépression OFTen se sentent comme si de rien ils ne seront jamais aider, un symptôme qui peut éventuellement conduire au suicide. Chez les rongeurs, ce qui peut être modélisée en utilisant le test de natation forcée (FST), qui mesure la quantité de temps par rapport à une souris de natation flottant dans une piscine d&#39;eau (considéré comme l&#39;abandon). Ce paradigme est validée par le sauvetage du phénotype avec des anti-dépresseurs. 7,8,9 souris qui ont reçu des anti-dépresseurs vont passer beaucoup moins de temps immobile par rapport à des témoins non traités. Un autre test comportemental, le test Open Field (OFT) est conçu pour évaluer la locomotion chez la souris, et peut en outre être utilisé pour analyser le phénotype anxieux chez la souris. 5,6 Ce test est basé sur la prémisse que les souris se sentent plus en sécurité quand ils sont proches au mur dans un roman plein champ. Souris de type sauvage finiront explorer le nouvel environnement, car ils sont des animaux curieux. Cependant, passer moins de temps dans le centre du champ indique l&#39;anxiété chez la souris, que la souris ne sera pas en mesure de surmonter l&#39;initial la peur provoquée par un nouvel environnement. L&#39;angoisse de la souris, telle que quantifiée par la quantité de temps passé dans le centre d&#39;un champ ouvert, peut être comparé à l&#39;anxiété clinique chez l&#39;homme, qui est présent dans de nombreux troubles psychiatriques. La combinaison des injections stéréotaxiques de paradigmes comportementaux est une nouvelle façon de modifier l&#39;expression d&#39;un gène spécifique dans une zone ciblée du cerveau. L&#39;effet de l&#39;expression du gène modulé sur les comportements de la souris peut alors être déterminée. Contrairement à élimination directe de l&#39;ensemble du cerveau, cette méthode est particulièrement utile, car elle ne vise que les zones spécifiques du cerveau. En outre, des injections stéréotaxiques sont généralement effectuées chez l&#39;adulte de souris de type sauvage, par conséquent, l&#39;expression du gène endogène a été maintenue tout au long des stades de développement. Cette méthode permet d&#39;éviter l&#39;effet de confondre si le gène est nécessaire pour la survie pendant le stade embryonnaire ou post-natale de développement. Une limitation majeure est que les souris expérimentales doivent aller through une chirurgie invasive, dont les crânes de souris doivent être ouvert. En outre, le degré de modulation de gène est déterminée par l&#39;efficacité et le titre du virus. Le virus doit être injecté dans la région correcte en utilisant les coordonnées stéréotaxiques, qui exige des instruments spéciaux. Vérification du site d&#39;injection correct ne peut être achevé post-mortem. Cette méthode a été précédemment utilisé pour tester l&#39;implication d&#39;un gène spécifique dans diverses maladies neurologiques. Par exemple, virale ARNi médiée par ciblage du gène Th (qui permet la dopamine à synthétiser) a été injecté dans la compacta substance noire, et l&#39;analyse du comportement locomoteur a été effectuée. 10 Une autre étude a utilisé injection stéréotaxique d&#39;un silençage DISC1 lentivirus pour évaluer le comportement de la souris en ce qui concerne de la schizophrénie. Knockdown de DISC1 entraîné une augmentation de la locomotion en réponse à la nouveauté (parallèles symptômes positifs de la schizophrénie), et une plus grande immobilité dans leFST. 11 De même, une étude complémentaire a révélé que 5-HT 1B surexpression conduit à un comportement exploratoire augmenté dans l&#39;OFT, compatible avec un phénotype anti-anxiété en utilisant cette méthode. 12 injections stéréotaxiques peuvent livrer virus de la CRE pour induire la recombinaison chez les souris cre-loxP . Cette méthode a été utilisée pour supprimer de manière sélective le récepteur Y2 dans l&#39;amygdale et le noyau du lit de la strie terminale. Lors de l&#39;analyse du comportement, ces souris ont été trouvés à un phénotype anti-dépressif lorsque le gène a été supprimée dans l&#39;amygdale centrale, mais aucun phénotype lorsque le gène a été supprimée dans l&#39;amygdale basolatérale ou le noyau du lit de la strie terminale. 13 Ainsi, cette technique fournit un outil unique d&#39;étudier l&#39;effet génétique sur les comportements des animaux.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="608">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:107px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Stereotactic Apparatus item 51725</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">51725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Quintessential stereotaxic pump&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Injection Styringe, 65 RN</td>
			<td style="width:107px;">Hamilton</td>
			<td style="width:119px;">7633-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:107px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D5796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEI&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Polysciences Inc.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">23966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Blunt end forceps</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Needle holder&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Drill</td>
			<td style="width:107px;">Ram Products Inc</td>
			<td style="width:119px;">Microtorque control box, Tech2000 handpiece</td>
			<td>with pedal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass bead sterilizer</td>
			<td style="width:107px;">Inotech&#160;</td>
			<td style="width:119px;">IS-400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbable sutures&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Unify</td>
			<td style="width:119px;">M-K518r19</td>
			<td>Absorbable, reverse cutting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:107px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89031-270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heating pad</td>
			<td style="width:107px;">Gaymar</td>
			<td style="width:119px;">T-pump TP-500 PN11184-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial tears</td>
			<td style="width:107px;">Rugby</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disposable syringe</td>
			<td style="width:107px;">BD Syringe</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cloth</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Gloves&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Ansell</td>
			<td style="width:119px;">Senseitouch #7823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Avertin or other anesthetic</td>
			<td style="width:107px;">see recipe citation</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketoprofen or other analgesic</td>
			<td style="width:107px;">see veternarian&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking software</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Ethovision XT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking Camera</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Media Recorder</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applying stereotactic injection technique to study genetic effects on animal behaviors

Injection stéréotaxique est une technique utile pour fournir des lentivirus de titre élevé dans les zones ciblées du cerveau chez la souris. Les lentivirus peuvent soit surexpression ou l&#39;expression des gènes knockdown dans une région relativement concentré, sans dommages importants aux tissus du cerveau. Après la récupération, la souris injectée peut être testée sur différentes tâches comportementales telles que le test Open Field (OFT) et le test de natation forcée (FST). L&#39;OFT est conçu pour évaluer la locomotion et le phénotype anxieux chez la souris par la mesure de la quantité de temps que d&#39;une souris passe au centre d&#39;un roman plein champ. Une souris plus anxieux va passer beaucoup moins de temps dans le centre du champ roman par rapport aux témoins. La FST évalue le phénotype anti-dépressif en quantifiant la quantité de temps que les souris passent immobile lorsqu&#39;il est placé dans un seau d&#39;eau. Une souris avec un phénotype anti-dépressive va passer beaucoup moins de temps immobile par rapport aux animaux témoins. L&#39;objectif de ce protocole est d&#39;utiliser le stereotactic injection d&#39;un lentivirus en conjonction avec des tests comportementaux pour évaluer comment les facteurs génétiques moduler les comportements animaux.

<html> Injection stéréotaxique précise repose largement sur la définition des coordonnées correctes. La pointe de l&#39;aiguille utilisée pour injecter le virus devrait être fixé directement sur ​​l&#39;intersection de bregma et la ligne interauriculaire (Figure 1). Il est utile d&#39;utiliser une loupe binoculaire pour déterminer si oui ou non l&#39;aiguille est correctement placé. Lorsque l&#39;on regarde au microscope, l&#39;aiguille doit être positionnée de sorte que si le virus a ét...

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Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Injection stéréotaxique de lentivirus exprimant les ADNc ou shRNA peuvent moduler l&#39;expression génique dans des zones spécifiques du cerveau de souris. Ici, nous présentons un protocole de combiner injections stéréotaxiques avec des tâches comportementales, comme le test Open Field (OFT) et le test de natation forcée (FST).

Application Technique d&#39;injection stéréotaxique pour étudier les effets génétiques sur les comportements des animaux

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

14.0K vues.  The Pennsylvania State University.  Injection stéréotaxique de lentivirus exprimant les ADNc ou shRNA peuvent moduler l'expression génique dans des zones spécifiques du cerveau de souris. Ici, nous présentons un protocole de combiner injections stéréotaxiques avec des tâches comportementales, comme le test Open Field (OFT) et le test de natation forcée (FST). 

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Stereotactic Injection of MicroRNA-expressing Lentiviruses to the Mouse Hippocampus CA1 Region and Assessment of the Behavioral Outcome

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an entire gene expression pathway by inducing destruction and/or inhibiting translation of these targets. Several miRNAs play key roles in maintaining neuronal structure and function and in higher-level brain functions, and methods are sought for manipulating their levels for exploring these functions. Here, we present a direct in vivo method for examining the cognitive consequences of enforced miRNAs excess in mice by stereotactic injection of miRNA-encoding virus particles. Specifically, the current protocol involves injection into the hippocampal CA1 region, which contributes to mammalian memory consolidation, learning, and stress responses, and offers a convenient injection site. The coordinates are measured according to the mouse bregma and virus perfusion is digitally controlled and kept very slow. After injection, the surgery wound is sealed and the animals recover. Lentiviruses encoding silencers of the corresponding mRNA targets serve to implicate the specific miRNA/target interaction responsible for the observed effect, with na&iuml;ve mice, mice injected with saline and mice injected with "empty" lentivirus vectors as controls. One month post-injection, the animals are examined in the Morris Water Maze (MWM) for assessing their navigation learning and memory abilities. The MWM is a round tank filled with colored water with a small platform submerged 1 cm below the water surface. Steady visual cues around the tank allow for spatial navigation (sound and the earth's magnetic field may also assist the animals in navigating). Video camera monitoring enables measuring the route of swim and the time to find and amount the platform. The mouse is first taught that mounting the hidden platform offers an escape from the enforced swimming; it is then tested for using this escape and finally, the platform is removed and probe tests examine if the mouse remembers its previous location. Repeated tests over several consecutive days highlight improved performance of tested mice at shorter latencies to find and mount the platform, and as more direct routes to reach the platform or its location. Failure to show such improvement represents impaired learning and memory and/or anxiety, which may then be tested specifically (e.g. in the elevated plus maze). This approach enables validation of specific miRNAs and target transcripts in the studied cognitive and/or stress-related processes.

MicroRNAs have significant roles in brain structure and function. Here we describe a method to enforce hippocampal miRNA over-expression using stereotactic injection of an engineered miRNA-expressing lentivirus. This approach can serve as a relatively rapid way to assess the in vivo effects of over-expressed miRNAs in specific brain regions.

Injection stéréotaxique de micro-ARN exprimant lentivirus à la souris hippocampe CA1 Région et l&#39;évaluation du résultat comportemental

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an ...

Recherche

Sciences du comportement

A Within-subjects Experimental Protocol to Assess the Effects of Social Input on Infant EEG

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants socially interact. Electroencephalography (EEG) power is an advantageous technique to assess infant functional neural activation. However, many studies record infant EEG only during one baseline condition. This protocol describes a paradigm that is designed to comprehensively assess infant EEG activity in both social and nonsocial contexts as well as tease apart how different types of social inputs differentially relate to infant EEG. The within-subjects paradigm includes four controlled conditions. In the nonsocial condition, infants view objects on computer screens. The joint attention condition involves an experimenter directing the infant's attention to pictures. The joint attention condition includes three types of social input: language, face-to-face interaction, and the presence of joint attention. Differences in infant EEG between the nonsocial and joint attention conditions could be due to any of these three types of input. Therefore, two additional conditions (one with language input while the experimenter is hidden behind a screen and one with face-to-face interaction) were included to assess the driving contextual factors in patterns of infant neural activation. Representative results demonstrate that infant EEG power varied by condition, both overall and differentially by brain region, supporting the functional nature of infant EEG power. This technique is advantageous in that it includes conditions that are clearly social or nonsocial and allows for examination of how specific types of social input relate to EEG power. This paradigm can be used to assess how individual differences in age, affect, socioeconomic status, and parent-infant interaction quality relate to the development of the social brain. Based on the demonstrated functional nature of infant EEG power, future studies should consider the role of EEG recording context and design conditions that are clearly social or nonsocial.

This novel protocol is designed to assess the neural bases of social interaction in infants. The paradigm is designed to tease apart how various social inputs such as language, joint attention, and face-to-face interaction relate to infant neural activation. Infant EEG power is recorded during both social and nonsocial conditions.

A l&#39;intérieur-sujets protocole expérimental pour évaluer les effets de l&#39;entrée social sur l&#39;EEG du nourrisson

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Test d’anxiété animale chez les Rats : effets des corniches bras ouvert et fermé bras mural transparence élevée Plus de Test de labyrinthe

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

Évaluation de Transmission sociale des comportements de préférences alimentaires

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

Chatouillement, une Technique permettant d’induire l’Affect positif lors de la manipulation des Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Using a Classroom-Based Deese Roediger McDermott Paradigm to Assess the Effects of Imagery on False Memories

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the accuracy of memories. The purpose of the method presented here was to induce false memories using lists of either semantically or phonologically related words and to assess the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. To do this, we used a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm. We adapted word lists from previous DRM studies to suit imagery procedures and created an automated presentation to present the word lists in classroom settings. We then recruited undergraduate classes and instructed some of the classes to create mental images of the list words as they were being presented, while instructing the other classes to simply remember the words. The automated presentation presented word lists to participants, one word at a time, alternating between phonologically and semantically related lists. Participants used paper-pencil recall packets to immediately recall list items, complete a distractor activity, and take a subsequent final recognition test. Often, participants immediately recalled and later recognized words that were related to the list items but were not actually presented; these are known as critical lures and indicate a false memory. The protocol detailed here describes a four-step procedure - list presentation, immediate recall, distractor phase, and final recognition - that can assess the effects of list type and imagery instruction within the DRM paradigm on memory. The automated nature of the list presentation provides the ability to systematically vary variables of interest, and the paper and pencil method of data collection affords an easily accessible method for collecting data in classroom settings. The protocol also offers options to modify the procedure to a more traditional DRM paradigm without imagery and/or list type manipulations. The use of this protocol can provide results relevant to both classroom learning and cognitive science principles.

The method presented here induced false memories using lists of related words and also assessed the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. This protocol details a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm.

À l’aide d’un paradigme de McDermott Roediger Deese en salle de classe afin d’évaluer les effets de l’imagerie sur les faux souvenirs

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

Assessing the Coherence of Parents&#039; Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

Évaluer la cohérence des récits courts des parents concernant leur enfant à l'aide de la procédure d'échantillonnage de la parole de cinq minutes

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...

Applying an eMASS Customization Program as a Research Tool to Evaluate Consumer Benefits

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization through marketing technology. The purpose of this study is to examine how to conduct consumer research using an online survey and analysis of data. This study examines consumers&#39;&#160;perceived benefits while customizing a product as well as emotional product attachment, attitudes toward a customization program, and loyalty intentions in the context of online retailing. In addition, this study investigates how consumer responses are different based on individual characteristics such as fashion innovativeness. An online survey company in South Korea recruited 290 female apparel shoppers who purchased apparel online. To enhance external validity, this study used an existing retail website with a well-established mass customization program. After completing the customization program, participants complete the online questionnaire. Structural equation modeling (SEM) and latent mean analyses (LMAs) are then performed for analyses. This study stresses the importance of testing measurement invariance for mean comparisons. Before the SEM and LMA, this study follows the hierarchy of invariance tests (configural invariance test, metric invariance test, and scalar invariance test), which are not considered by traditional approaches such as ANOVA. These statistical analyses provide applicability of the invariance test procedures and LMA to consumer behaviors. The conclusions of mean differences have integrity and validity because they are guided by a sophisticated statistical procedure to ensure measurement invariance.

Presented here is a protocol to examine consumer responses toward mass customization in the context of online retailing. The protocol details the online survey procedure and how to analyze data using structural equation modeling and group differences using latent mean analyses.

L'application d'un programme de personnalisation eMASS comme outil de recherche pour évaluer les avantages pour les consommateurs

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization ...

An Experimental Paradigm for Measuring the Effects of Ageing on Sentence Processing

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the exact regions where the difficulties arise have not been fully identified. In this study, a maze task was implemented to investigate how older adults and younger adults differentially processed two types of sentences with different levels of syntactic complexity, namely subject relative clauses and object relative clauses. Participants were asked to choose between two alternatives at each segment of the sentences. The task required participants to engage in a strictly incremental mode of processing. The reading times for each segment were recorded, allowing the quantification of the difficulty of sentence reading. The task allowed us to identify the exact locations of the processing difficulty and thus facilitate a more accurate assessment of the age-related decline in sentence processing. The results indicate that the effect of ageing was found mainly at the head nouns, but not at other regions of the sentences, a finding which suggests that the maze task is an effective method to identify the exact location of the ageing effect on sentence processing. The implications of this experimental paradigm for investigating the effect of ageing on sentence processing are discussed.

Here, we present a protocol to examine the age-related decline in sentence processing using a maze task that allowed us to localize the processing difficulty at each word of the sentences during reading.

Un paradigme expérimental pour mesurer les effets du vieillissement sur le traitement des peines

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

L’utilisation de tests de peur traditionnels pour évaluer différents circuits émotionnels chez les bovins

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...