Les mesures échographiques à haute résolution ont été largement utilisées pour mesurer les dimensions aortiques chez la souris. Ce protocole fournit un guide pratique sur l’application de cette modalité. Ce protocole facilite l’acquisition de mesures bidimensionnelles reproductibles et précises du diamètre des aortas thoraciques et abdominaux chez la souris.
Le Dr Hasashi Sawada, boursier postdoctoral, et Jessica Morrleghen, chercheuse scientifique, tous deux de l’Université du Kentucky, démontreront la procédure. Avant de commencer l’intervention, utilisez un coton-tige pour appliquer de la crème dilatoire sur la zone d’imagerie de la souris anesthésiée. Après une minute, retirer délicatement toute la crème et les cheveux et rincer la peau exposée à l’eau chaude.
Après avoir essuyé la peau sèche pour enlever complètement la crème, placez un point de gel à ultrasons sur chacune des quatre fils de cuivre sur la plate-forme. Tapez chaque patte sur chaque plomb pour obtenir des lectures d’électrocardiogramme. Et vérifiez que la fréquence cardiaque se situe entre 450 et 450 battements par minute.
Appliquez du gel ultrasonique préchauffé sur le site d’imagerie et fixez la sonde au support. Faites ensuite pivoter la plate-forme pour un balayage optimal et abaissez la sonde jusqu’à ce qu’elle soit en contact avec le gel ultrasonique. Pour imager l’aorte thoracique, inclinez la plate-forme vers le bas vers le côté gauche de la souris et placez la sonde sur le bord droit du sternum de la souris.
Orienter le marqueur de référence sur la sonde caudally. Passez à la couleur doppler sur l’aorte thoracique pour confirmer le flux sanguin. Et ajustez l’angle de la scène et de la sonde pour visualiser l’aorte clairement.
En utilisant les boutons pour la profondeur et la largeur de l’image, recadrer l’image ultrasonique pour augmenter la vitesse du cadre et changer la profondeur focale sur le côté dorsal de l’aorte ascendante, en utilisant le bouton pour la profondeur focale. Vérifiez les paramètres de l’échographie comme indiqué dans la table et utilisez le bouton de scène axe X et Y pour déplacer doucement la sonde, pour capturer l’image aortique longitudinale avec le plus grand diamètre possible. Pour l’image de l’aorte abdominale, placez la sonde transversalement juste en dessous du sternum et du processus xyphoïde avec le marqueur de référence sur la sonde faisant face au côté droit de la souris.
L’aorte abdominale doit être située à côté du cava vena inférieur, et ou veine portail. Visualisez l’aorte abdominale avec le doper de couleur pour confirmer le flux pulsatile et recadrer l’image d’ultrason pour augmenter le taux d’image. Changez la profondeur focale à la paroi postérieure de l’aorte abdominale et déplacez la sonde caudally pour visualiser les points de branche des artères mesenteric coeliaques et supérieures.
Ensuite, utilisez l’artère rénale droite comme point de repère et de capturer une boucle sinusoïde de la région d’intérêt, montrant la dilatation maximale dans l’aorte abdominale. Une fois toutes les images capturées, retirez le gel ultrasonique, rincez la zone d’imagerie à l’eau chaude et essuyez doucement la souris. Retournez la souris dans sa cage sur le coussin chauffant et nettoyez la machine à ultrasons, la sonde et la plate-forme avec un chiffon souple et des lingettes désinfectantes.
Téléchargez ensuite tous les fichiers collectés pendant l’analyse et éteignez la machine à ultrasons. Dans cette image représentative d’ultrason d’un aorte thoracique proximale non anévreuse, l’aorte ascendante peut être observée située à côté de l’artère pulmonaire, et forme un tube courbé avec trois branches dans la région d’arc. L’artère innominate, l’artère carotide commune gauche, et l’artère subclavian gauche.
Dans cette image représentative d’ultrason de l’aorte abdominale non anévreuse, l’aorte abdominale est détectée dorsalement au cava inférieur de vena. Ici, des images représentatives des anévrismes aortiques thoraciques et abdominaux sont montrées. Pour mesurer le sinus aortique et les diamètres aortiques ascendants, la ligne verte est utilisée pour normaliser le sinus aortique et le diamètre aortique ascendant, respectivement.
Les lignes peuvent ensuite être tracées perpendiculairement à la ligne verte entre les deux bords intérieurs du lumen au sinus aortique et le diamètre aortique ascendant maximal. Pour la mesure de l’aorte abdominale, tracez une ligne à travers le plus grand diamètre luminal, du bord intérieur au bord intérieur du lumen de navire, et tracez le bord intérieur du lumen aortique pour la zone luminale. Les diamètres luminaux des aortas thoraciques et abdominaux sont différents entre le systole et le diastole.
Le cycle cardiaque doit également être envisagé pour des mesures précises. Dans cette étude pilote représentative, il n’y avait aucune différence majeure dans les diamètres mesurés de l’aorte ascendante entre l’ultrason et les images ex vivo. Cette technique d’échographie permet l’acquisition de résultats reproductibles et précis car aucune variabilité inter ou intra-observateur n’a été observée dans cette expérience entre les mesures aortiques effectuées par deux observateurs indépendants et les sessions de mesure.
L’ajustement de la sonde et des réglages de scène sont des étapes importantes pour une imagerie aortique fiable et reproductible. Les étapes d’analyse des données sont également importantes pour une mesure aortique précise.
