L’impact cortical contrôlé est facile à normaliser entre les sujets et les expériences et permet l’application de l’ensemble du spectre des lésions cérébrales traumatiques à des régions précisément définies du cerveau. Démontrer cette procédure est La Mecque Islam, un technicien de recherche dans mon laboratoire. Cette technique reste la forme la plus cohérente et reproductible d’induire des lésions cérébrales traumatiques chez les rongeurs.
Avant de commencer la procédure, fixez le dispositif d’impact au cadre d’exploitation stéréotaxique. Se le dispositif d’actionnement avec les paramètres biomécaniques désirés pour la vitesse expérimentale appropriée et le temps de puits. Enfez de nouveaux équipements de protection individuelle et des gants stériles et confirmez un manque de réponse au pincement des orteils chez la souris expérimentale anesthésiée.
Utilisez des tondeuses pour raser la fourrure pour le site chirurgical et appliquez de l’onguent sur les yeux de l’animal. Ensuite, placez la souris dans le bloc méditateur et préparer la peau rasée avec trois gommages chirurgicaux à base d’iode séquentiel et d’alcool. Pour induire une lésion cérébrale traumatique corticale contrôlée, utilisez d’abord un scalpel pour faire une incision d’un centimètre le long de la ligne médiane du cuir chevelu pour exposer le crâne.
Retirer le cuir chevelu du site opératoire et identifier les sutures sagittales et coronaires sur le crâne exposé. Pour effectuer une craniectomy, équiper un microdrill d’un foret trephine de cinq millimètres pour activer la perceuse à vitesse maximale et appliquer le bit perpendiculairement au crâne de deux millimètres à gauche de la suture sagittale et deux millimètres rostral à la suture coronale avec une légère pression même. Un léger don se fera sentir lorsque la perceuse pénètre dans le crâne.
Utilisez des forceps et une petite aiguille hypodermique de jauge pour enlever le rabat d’os, exposant entièrement le mater sous-jacent de dura et faites pivoter la pointe d’impacteur dans le champ opératoire. Sécurisez les os temporels bilatéraux entre les barres d’oreille miniatures du cadre stéréotaxique et verrouillez les incisives dans la pince d’incisive pour créer une prise stable de trois points sur la tête de la souris. Abaissez la pointe jusqu’à ce qu’elle entre en contact avec le dura mater exposé.
Le capteur de contact de l’instrument fera une tonalité audible pour alerter que le contact a été fait. Rétractez la pointe d’impact du point zéro et abaissez la position de l’impacteur sur le cadre stéréotaxique pour définir la profondeur d’impact souhaitée. Activez ensuite l’impacteur sur le dispositif d’actionnement avant de faire pivoter l’appareil hors du champ pour permettre à l’animal d’être retiré du cadre.
Immédiatement après la blessure, appliquez une pression directe d’un applicateur à pointe de coton stérile sur le crâne et la surface corticale blessée pour contrôler tout saignement et utilisez un applicateur frais pour sécher le crâne. Fermez le cuir chevelu au-dessus de la craniectomy selon les techniques standard et administrez l’analgésie postopératoire. Placez ensuite l’animal dans la position latérale de récupération du décume dans une cage préchauffée propre avec surveillance jusqu’à ce qu’il soit complètement couché et mesurez le poids corporel tous les trois jours tout au long de l’expérience.
La livraison de la blessure comme résultats démontrés dans une hémorragie intraparenchymale et sous-arachnoïdienne sous-dural. L’évaluation histologique des sections traumatiques de tissu de cerveau de dommages de cerveau après dommages graves indique une perte corticale et hippocampal ipsilateral significative aussi bien que l’oedème contralatéral et la distorsion. La formation image de MR des cerveaux gravement blessés démontre également la perte progressive de tissu et le remplacement par le fluide cerebra-spinal.
L’impact cortical contrôlé induit une blessure fiable et cohérente qui est capable de produire un large éventail de lésions cérébrales cliniquement applicables. Notre méthode contrôlée d’impact cortical génère un modèle murin de lésions cérébrales traumatiques graves pour l’analyse comportementale et d’imagerie et produit des tissus pour l’analyse moléculaire et cellulaire.
