制御された皮質の影響は、被験者および実験間で標準化が容易であり、脳の正確に定義された領域に外傷性脳損傷の全スペクトルの適用を可能にする。この手順を実証するのは、私の研究室の研究技術者であるメッカ・イスラムです。この技術は、げっ歯類の外傷性脳損傷を誘発する最も一貫した再現可能な形態のままである。
手順を開始する前に、影響を受けるデバイスをステレオタックス動作フレームに取り付けます。適切な実験速度と十分な時間に対して、所望の生体力学的パラメータを持つ作動装置をSeします。新しい個人用保護具と滅菌手袋を着用し、麻酔実験マウスのつまみつまみに対する応答の欠如を確認します。
バリカンを使用して、外科用部位の毛皮を剃り、動物の目に軟膏を塗布します。次に、マウスを手術室に入れ、3つのシーケンシャルヨウ素ベースとアルコール外科スクラブで剃った皮膚を準備します。制御された皮質外傷性脳損傷を誘発するには、まずメスを使用して頭皮の正中線に沿って1センチメートルの切開を行い、頭蓋骨を露出させる。
手術部位から頭皮を引き込み、露出した頭蓋骨の矢状および冠状縫合糸を特定する。クラニエクトミーを行うために、5ミリメートルのトレフィンドリルビットをマイクロドリルに装備してドリルを最高速度で活性化し、矢状縫合糸の左側に頭蓋骨に垂直なビットを2ミリメートル、2ミリメートルのロストラルを穏やかな圧力でコロナリング縫合糸に適用します。ドリルが頭蓋骨を貫通すると、わずかなギブが感じられます。
鉗子と小さなゲージ皮下注射針を使用して骨フラップを取り除き、下層の硬膜を完全に露出させ、インサーチップを手術場に回転させます。ステレオタックスフレームのミニチュアイヤーバーの間の両側側の側頭骨を固定し、切歯クランプ内の切歯をロックして、マウスヘッドに安定した3点ホールドを作成します。露出した硬膜に接触するまで先端を下げます。
機器の接触センサーは、接触が行われたことを警告するために聞こえる音を出します。ゼロ点から影響を受ける先端を引き込み、ステレオタックスフレームのインパクター位置を下げて、希望する衝撃深さを設定します。次に、デバイスをフィールドから戻す前に作動装置のインサーをアクティブにして、動物をフレームから取り外します。
怪我の直後に、無菌綿のチップ付きアプリケーターから頭蓋骨および損傷した皮質表面に直接圧力をかけ、出血を制御し、新鮮なアプリケーターを使用して頭蓋骨を乾燥させます。標準的な技術に従って、クラニエクトミーの上に頭皮を閉じて、術後の鎮痛を管理します。その後、完全な債務まで監視とクリーン事前温めケージに横型褥瘡回復位置に動物を配置し、実験の過程を通じて3日ごとに体重を測定します。
証明されたように傷害の送達は硬膜下の内包性およびくも膜下出血をもたらす。重度の傷害後の外傷性脳損傷脳組織切片の組織学的評価は、有意なイプシテララル皮質および海馬喪失ならびに対側浮腫および歪みを明らかにする。重度の損傷を受けた脳のMRイメージングはまた、脳脊髄液による進行性組織喪失および置換を示す。
制御された皮質の影響は、臨床的に適用可能な脳損傷の広い範囲を生成することができる信頼性の高い、一貫した傷害を誘発する。当社の制御された皮質衝撃法は、行動および画像解析のための重度の外傷性脳損傷のマウスモデルを生成し、分子および細胞分析のための組織を生成する。
