La régurgitation mitrale est une maladie valvulaire courante qui conduit à l’insuffisance cardiaque. Ce modèle rat MR peut aider à mieux comprendre les mécanismes sous-jacents de l’insuffisance cardiaque. Ce modèle peut être employé pour induire MR dans un coeur battant imitant les hémodynamiques observés dans les patients présentant cette lésion de valve et rendant ce modèle médicalement pertinent.
La microchirurgie et l’expérience de manipulation aideront à reproduire ce protocole et la familiarité avec l’imagerie échocardiographique et l’interprétation de l’image sont des aspects clés pour le placement réussi de l’aiguille. Comme il s’agit d’une technique guidée par l’image, la démonstration visuelle des méthodes peut aider à comprendre la procédure. Après avoir effectué une thoracotomie gauche selon les protocoles standard dans un rat sprague-dawley adulte anesthésié de 350 à 400 grammes, utilisez une suture PROLENE 6-0 et un support de micronèse pour placer une suture de cordon sur l’apex du ventricule gauche.
Attachez doucement la suture apicale pour stabiliser l’apex et insérer une aiguille de calibre 23 rincée avec de la solution saline et avec un robinet d’arrêt à l’extrémité distale au centre de la suture de cordon de la bourse et dans la cavité ventriculaire gauche. À l’aide d’une main pour guider habilement l’aiguille, utilisez l’autre main pour manipuler simultanément la sonde d’écho transesophagique pour obtenir une vue d’écho optimale pour visualiser l’aiguille. À l’aide d’un guidage échographique en temps réel, avancez l’aiguille vers le côté ventriculaire du folioles mitral antérieur.
Une fois que la position de l’aiguille est confirmée, avancez l’aiguille en un seul mouvement fin à travers le dépliant de valve. Une fois à travers le foliole, rétractez l’aiguille dans la chambre ventriculaire gauche loin de la valve mitrale et faites allumer l’imagerie doppler de couleur pour confirmer que MR ajustait la sonde d’écho au besoin pour obtenir une meilleure vue. Une fois que le MR est confirmé, retirez complètement l’aiguille de la cavité ventriculaire gauche et attachez doucement la suture de cordon.
Ensuite, utilisez une gaze stérile pour absorber tout sang sur l’apex et dans la cavité thoracique. Après cinq à 10 minutes de fonction cardiaque stable, utilisez une suture vicryl interrompue de 4 à 0 pour rapprocher les côtes tout en réduisant l’isoflurane à 2 %Suivant, insérez un tube thoracique dans le sixième espace intercostal et fixez le tube aux rideaux stériles pour éviter l’avancement involontaire du tube dans la cavité thoracique, puis finissez d’approcher les côtes. Utilisez une suture continue pour fermer la couche musculaire avec l’isoflurane à 1,5% et la couche cutanée avec l’isoflurane à 1%Connectez une valve de verrouillage Luer de 10 millilitres vers le tube thoracique et égouttez 10 à 12 millilitres d’air de la cavité thoracique avant d’enlever le tube.
Une fois le tube enlevé, administrer une dose sous-cutanée finale de carprofène. Après avoir éteint l’isoflurane, continuer la ventilation mécanique tandis que le rat se se dessaisit de l’anesthésie de surveillance des signes vitaux. Au début de la respiration spontanée, éteignez la ventilation pour tester la capacité du rat à maintenir une telle respiration et une bonne saturation en oxygène de la cavité périphérique.
Une fois que le rat est capable de maintenir les niveaux périphériques de saturation en oxygène capillaire sans ventilation, couper les sutures d’ancrage au tube entétrachéal et extuber l’animal. Lorsque le rat est ambulatoire, transférez l’animal dans une cage propre avec une literie minimale et continuez à surveiller les signes vitaux à l’aide d’un moniteur périphérique portatif de saturation en oxygène capillaire. Dans les trois heures qui ont suivant le réveil, administrer de la buprénorphine.
Deux semaines après la chirurgie, placez le rat anesthésié dans la bonne position de decubitus et insérez une sonde intracardiaque de huit mégahertz 8-Français d’ultrason avec une petite quantité de gel appliquée à la pointe dans l’oesophage de l’animal. À l’aide de l’imagerie doppler couleur dans la vue à deux chambre, visualiser le ventricule gauche et l’oreillette gauche et mesurer la zone de l’atrium gauche et du jet MR pour permettre le calcul de la fraction de la zone du jet MR comme indiqué. Pour se rapprocher de la zone de l’orifice régurgitant, utilisez le diamètre externe de l’aiguille pour calculer la zone de l’aiguille de calibre 23 à l’aide de la formule.
Obtenez l’imagerie continue d’onde Doppler avec la porte doppler à l’orifice du jet régurgitant et tracez la forme d’onde pour calculer le temps de vitesse intégral du jet régurgitant. Utilisez la formule pour estimer le volume mr. Faites ensuite pivoter la sonde d’écho latéralement dans le sens des aiguilles d’une montre pour obtenir l’imagerie doppler d’onde d’impulsion de la veine pulmonaire et mesurer les vitesses systoliques et diastoliques d’onde utilisant l’équation pour calculer le rapport.
Dans ces images, la direction de l’aiguille comme elle est insérée dans la valve mitrale peut être observée. Ici, le trou laissé dans le folioles de valve mitrale dans un rat représentatif explanté à deux semaines après la procédure est montré. À deux semaines après la chirurgie, les cœurs des rats avec MR sont sphériques et sévèrement dilatés et un jet MR vif est apparent avec une surface moyenne d’environ 21 millimètres carrés et un temps de vitesse moyen intégral d’environ 40 centimètres.
La fraction de MR normalisée est généralement d’environ 42%, ce qui est considéré comme grave selon les lignes directrices de l’American Society of Echocardiography. La sévérité du MR est suffisante pour induire l’inversion pulmonaire de flux avec une diminution du rapport systolique/diastolique d’environ 0,9 à la ligne de base à approximativement moins 0,7 à deux semaines. L’imagerie en temps réel avec échocardiographie transesophagique et l’introduction d’une aiguille dans le cœur battant pour percer le dépliant mitral est une procédure chirurgicale réalisable qui peut être enseignée.
Notre modèle peut être combiné avec des cardiomyopathies ventriculaires pour étudier le remodelage cardiaque et facilite l’étude de l’impact du début tôt par rapport au début tardif de MR sur le remodelage cardiaque.
