La sensibilité baroréflexe décrit la relation entre les changements dans la pression artérielle et les changements réflexes dans la fréquence cardiaque. Lorsque la pression artérielle augmente, la fréquence cardiaque diminue et vice versa. L’électrocardiogramme télémétrique combiné et les mesures de pression artérielle chez des souris conscientes permettent de déterminer la sensibilité baroréflexe.
Le principal avantage de cette technique par rapport aux anciennes méthodes de détermination de la sensibilité baroréflexe est qu’elle mesure le réflexe spontané. Les souris sont éveillées et n’ont pas besoin d’être retenues. Aucune procédure invasive telle que l’injection de médicaments vasoactifs pour induire des changements de pression artérielle n’est nécessaire.
Le baroréflexe peut être utilisé pour la stratification du risque des patients atteints de maladies cardiaques telles que l’hypertension artérielle, l’infarctus du myocarde et l’insuffisance cardiaque. Les changements pathologiques de la sensibilité baroréflexe sont associés à un risque accru de mortalité cardiaque. C’est donc un marqueur pronostique important des maladies cardiovasculaires.
Les détails microchirurgicaux tels que la perforation et la canulation de l’artère carotide sont les étapes les plus difficiles du protocole. Il faut veiller à ce qu’il y ait suffisamment de tension sur les sutures pour arrêter temporairement le flux sanguin et soulever légèrement l’artère pour la canulation. Commencez par utiliser une tondeuse pour raser la zone chirurgicale d’une souris anesthésiée du dessous du menton vers les muscles pectoraux transversaux.
Après avoir positionné la souris en décubitus dorsal, appliquez une pommade pour les yeux de l’animal pendant l’anesthésie. Appliquez de la crème dépilatoire sur la zone chirurgicale préalablement rasée. Après trois à quatre minutes, retirez les cheveux et la crème dépilatoire à l’aide d’un coton et d’eau tiède, en vous assurant que la peau est propre et exempte de tout poil ou crème résiduel afin que la plaie ne soit pas contaminée pendant l’opération.
Faites une incision médiane droite d’un à 1,5 centimètre à travers la peau du cou en commençant immédiatement sous le menton. Créez un espace sous-cutané des deux côtés de l’incision en séparant la peau du tissu conjonctif sous-jacent avec des ciseaux de dissection émoussés, en prenant soin de ne pas pincer la peau trop fortement avec les pinces, ce qui peut provoquer une nécrose et altérer la cicatrisation des plaies après la chirurgie. Séparez les glandes parotide et sous-maxillaire à l’aide d’applicateurs à pointe de coton pour exposer la musculature recouvrant la trachée.
Rétractez la glande salivaire gauche à l’aide d’une pince à dissection incurvée pour identifier l’artère carotide gauche située latéralement à la trachée. Disséquez soigneusement l’artère carotide du tissu adjacent à l’aide d’une pince incurvée, en faisant très attention à ne pas blesser le nerf vagal qui court le long du vaisseau. Continuez la dissection contondante pour exposer l’artère carotide gauche à environ 10 millimètres de longueur et la séparer complètement du fascia vasculaire et du nerf vague.
Passez une suture de soie non résorbable de cinq par zéro sous la partie isolée de l’artère carotide tout en soulevant légèrement le vaisseau sanguin avec des pinces incurvées pour réduire la friction entre les sutures et l’artère carotide. Placez la suture crânienne juste à proximité de la bifurcation de l’artère carotide. Ensuite, formez un nœud et attachez-le pour ligaturer définitivement le vaisseau.
Fixez les deux extrémités de la suture d’occlusion crânienne à la table d’opération avec du ruban chirurgical. Passez une deuxième suture d’occlusion sous l’artère carotide et placez-la caudale à environ cinq millimètres de distance de la suture crânienne, en nouant un nœud lâche. Fixez les deux extrémités de suture avec du ruban chirurgical.
Placez une troisième suture entre la suture d’occlusion crânienne et caudale pour maintenir le cathéter en place tout en canulant l’artère et faire un nœud lâche. Tirez doucement sur la suture d’occlusion caudale et fixez-la avec tension pour arrêter temporairement le flux sanguin et soulever légèrement l’artère. Pénétrez soigneusement l’artère proximale à la suture d’occlusion crânienne avec l’aiguille pliée.
Tout en élevant légèrement l’artère carotide avec l’aiguille pliée, saisissez le cathéter avec une pince à canulation vasculaire, introduisez-le dans la petite ponction et laissez-le glisser lentement dans le vaisseau. Simultanément, retirez doucement l’aiguille pliée. Lorsque le cathéter atteint la suture d’occlusion caudale, serrez légèrement la suture sécurisée pour maintenir le cathéter en place.
Desserrez la suture d’occlusion caudale afin que le cathéter puisse être déplacé davantage jusqu’à ce que son extrémité soit positionnée dans l’arc aortique. Une fois positionné correctement, fixez le cathéter avec les trois sutures et coupez les extrémités aussi courtes que possible sans trop serrer les nœuds. Former un tunnel sous-cutané à partir du cou dirigé vers le flanc gauche de l’animal et former une petite poche à l’aide de petits ciseaux émoussés à dissectionner.
Irriguer le tunnel avec une seringue d’un millilitre remplie d’une solution chaude stérile de chlorure de sodium à 0,9% et introduire environ 300 microlitres de la solution dans la poche. Soulevez soigneusement la peau avec des pinces émoussées et introduisez le corps du dispositif émetteur dans la poche, en prenant soin de ne pas retirer le cathéter de pression artérielle de l’artère carotide. Formez un mince tunnel vers le muscle pectoral droit avec des ciseaux à dissection émoussée et placez la sonde négative dans le tunnel à l’aide d’une pince émoussée.
Fixez l’extrémité terminale de la sonde avec un point au muscle pectoral en utilisant un matériau de suture absorbable six par zéro. Former une boucle dans la sonde positive, positionner son extrémité dans la région de la côte caudale gauche et sécuriser sa position à l’aide d’une suture absorbable six par zéro. Fermez la peau avec des nœuds simples en utilisant un matériau de suture non résorbable de cinq par zéro.
De plus, appliquez une petite quantité d’adhésif tissulaire sur chaque nœud pour empêcher l’animal de mordre la suture et prévenir la déhiscence. Appliquez 10% d’hydrogel d’iode povidone sur la plaie pour prévenir l’infection de la plaie pendant la phase de récupération. Pour un soulagement préventif de la douleur, injectez du carprofène dans du chlorure de sodium à 0,9% par voie sous-cutanée pendant que la souris est encore sous anesthésie.
Placez la moitié de la cage sur une plate-forme chauffante réglée à 36 degrés Celsius pendant 12 heures après la chirurgie et transférez la souris dans la zone chaude afin que l’animal ait la possibilité de rester dans la zone chaude ou de se déplacer vers la partie la plus froide de la cage lorsqu’il est éveillé. Après l’acquisition des données, inspectez les traces de pression artérielle et d’ECG et dépister une séquence de trois heures de faible activité. Pour effectuer une analyse de sensibilité baroréflexe ou BRS, ouvrez le panneau d’analyse BRS.
Inspectez manuellement chaque séquence affichée dans le panneau et excluez les battements ectopiques, les pauses sinusales, les événements arythmiques ou les données bruyantes pour les exclure de l’analyse. Ce protocole peut être utilisé pour une analyse BRS précise et un large éventail de paramètres ECG ou dérivés de la PA tels que les intervalles ECG, la variabilité de la PA et les détections d’arythmie. Une souris en bonne santé qui a suffisamment récupéré de la chirurgie montre une augmentation physiologique de l’activité, de la fréquence cardiaque et de la PA pendant la phase sombre.
La méthode de séquence a été utilisée pour déterminer BRS où la pression artérielle systolique et les intervalles RR ont été examinés sur une base battement à battement au cours de courtes séquences de trois battements ou plus avec une augmentation ou une baisse spontanée de la pression artérielle systolique. Pour évaluer la corrélation entre RR et la pression artérielle systolique, les deux paramètres ont été tracés l’un par rapport à l’autre et la pente de la droite de régression linéaire a été calculée pour chaque séquence. Le nombre total de séquences pour 1 000 battements et le gain moyen de BRS spontanés reflétés par les pentes des droites de régression linéaire calculées à partir du RR par relation de pression artérielle systolique sont des paramètres d’intérêt dans l’analyse.
Pendant les phases d’activité plus élevée, la qualité du signal peut diminuer et induire du bruit. La fixation de deux valeurs basses pour le coefficient de corrélation minimal entraîne également de fausses détections de séquences qui ne reflètent pas l’activité baroréflexe, mais résultent de billes arythmiques. Pour l’interprétation des données de sensibilité des barorécepteurs, il est important de considérer les niveaux fonctionnels impliqués dans le réflexe barorécepteur.
Au niveau neuronal, les composantes afférentes, centrales ou efférentes du réflexe peuvent être altérées. Au niveau cardiovasculaire, une réactivité réduite ou accrue du nœud sinusal peut entraîner des changements dans la sensibilité des barorécepteurs. Avec ces données, on peut non seulement déterminer la sensibilité baroréflexe et la fonction du ganglion sino-auriculaire cardiaque, mais aussi un large éventail de paramètres dérivés de l’ECG et de la pression artérielle.
Ceux-ci incluent, par exemple, la pression artérielle systolique et diastolique, les intervalles ECG, la variabilité de la fréquence cardiaque ou les rythmes des cigales.
