La transplantation valvulaire cardiaque est proposée comme un nouveau type de greffe ayant le potentiel de délivrer des valves cardiaques durables, capables de croissance somatique sans avoir besoin d’anticoagulation. Cette technique est pratique et plus simple que les méthodes précédentes pour étudier l’immunobiologie de la transplantation valvulaire cardiaque. Après avoir anesthésié le rat, utilisez les ciseaux disséquants pour inciser la peau du xiphoïde à l’encoche sternale.
Et effectuez une sternectomie en coupant les côtes de chaque côté, latéralement au sternum jusqu’à ce qu’un accès optimal au cœur soit atteint. Injecter de l’héparine dans l’oreillette gauche. Après le sacrifice, excisez le thymus pour améliorer la visualisation des grands vaisseaux.
Ensuite, retirez le cœur sur le bloc avec l’aorte ascendante jusqu’au niveau de l’artère innominée. Après avoir placé le cœur du donneur dans une boîte de Petri stérile immédiatement après la cardiectomie, dans un tampon de stockage froid et glacé, utilisez la pince et les ciseaux à ressort Vannas pour disséquer le cœur jusqu’à ce qu’il ne reste que la racine aortique avec une coiffe ventriculaire d’un millimètre proximale à la valve aortique. Pour ouvrir la valve aortique, faites une coupe longitudinale pour ouvrir le sinus de Valsalva entre les sinus gauche et non cronnaire pour visualiser les trois folioles.
Pour exciser chaque feuillet de valve aortique individuellement, utilisez la pince émoussée pour saisir le bord de la feuille et utilisez les ciseaux à ressort Vannas pour exciser la feuille en coupant d’une commissure jusqu’à l’anneau puis vers la commissure suivante. Conservez les feuillets excisés dans une solution tampon de stockage glacé jusqu’à ce qu’ils soient prêts à être implantés chez le rat receveur, mais implantez tous les folioles dans les quatre heures suivant l’entreposage frigorifique. Une fois que le rat receveur est complètement anesthésié, maintenez la température corporelle à 36 à 38 degrés Celsius tout au long de la chirurgie avec le coussin chauffant.
Ensuite, placez le rat dans une position couchée latérale droite pour accéder au rein gauche. Administrer la buprénorphine au rat receveur par voie sous-cutanée avant la chirurgie. Et utilisez les ciseaux pour inciser la peau sur le flanc longitudinalement pendant un pouce.
De même, inciser la paroi abdominale sous-jacente. À l’aide du pouce et de l’index, appliquez une légère pression dorsale et ventrale tout en utilisant la pince incurvée. Soulevez le pôle caudal du rein à travers l’incision abdominale et cutanée.
Extérioriser l’extrémité crânienne du rein de la même manière. Alternativement, le rein peut être extériorisé en saisissant la graisse périrénale et en tirant vers le haut avec une légère tension. Une fois extériorisé, gardez le rein humide avec une solution saline chaude tamponnée sur le rein.
Afin de créer une poche sous-capsulaire, commencez par appliquer une légère pression sur la capsule rénale à l’aide d’un ensemble de pinces contondantes afin que la capsule rénale puisse être clairement distinguée du parenchyme sous-jacent. Simultanément, à l’aide d’un autre ensemble de pinces contondantes, saisissez soigneusement la capsule et tirez doucement vers le haut pour créer un trou dans la capsule. Avec une pince contondante, prolongez l’incision jusqu’à ce qu’un espace d’environ deux millimètres ait été créé pour accueillir la feuillet de la valve aortique.
Développez une poche sous-capsulaire peu profonde légèrement plus grande que le feuillet valvulaire tout en soulevant le bord de l’incision avec un ensemble de pinces et en avançant une sonde contondante sous la capsule rénale. Initier la transplantation de la valve aortique récupérée en soulevant la capsule fibreuse de bord faisant avancer la foliole aortique dans la poche sous-capsulaire avec une pince émoussée. L’incision et la capsule rénale peuvent être laissées ouvertes.
Repoussez doucement le rein dans sa position anatomique en utilisant la contre-traction appliquée sur les bords de l’incision. Fermez l’incision abdominale avec une suture chirurgicale stérile et fermez la peau avec des agrafes. Après l’opération, placez le rat dans une cage propre sur un coussin chauffant avec accès à la nourriture et à l’eau.
Si nécessaire, administrer de la buprénorphine au rat receveur toutes les six à douze heures pour soulager la douleur. Surveillez l’animal quotidiennement pour évaluer la cicatrisation de routine des plaies et les signes de douleur ou de détresse. Et retirez les agrafes après sept à dix jours de la chirurgie.
Une image représentative montre la position de la notice valvulaire aortique sous la capsule rénale pour la mise en œuvre. Et après trois, sept et vingt-huit jours chez le rat receveur, la localisation et la récupération du tissu transplanté sont devenues faciles. Les feuillets valvulaires aortiques ont conservé leur architecture native après une transplantation hétérotopique chez des animaux syngéniques.
Démontrer l’utilité de ce modèle comme base de référence pour comparer la réponse immunitaire dans les greffes allergènes. L’histologie avec coloration à l’hématoxyline et à l’éosine a révélé que les feuillets valvulaires dans les greffes syngéniques après sept jours étaient structurellement intacts sans aucun signe de gonflement œdémateux. L’intégrité structurelle de la notice valvulaire après la transplantation a été confirmée par Immunohistochemistry pour l’actine du muscle lisse et CD31.
Les feuillets de la valve aortique sont très délicats. Il est important de les manipuler très soigneusement sans endommager les vannes. La transplantation valvulaire cardiaque sous-capsulaire rénale simplifie la transplantation valvulaire cardiaque hétérotopique.
Cela permettra aux chercheurs ayant des capacités microchirurgicales limitées d’explorer l’immunobiologie de la transplantation valvulaire cardiaque.
