O transplante de válvula cardíaca é proposto como um novo tipo de transplante com potencial para fornecer válvulas cardíacas duráveis, capazes de crescimento somático sem necessidade de anticoagulação. Esta técnica é prática e mais simples do que os métodos anteriores para estudar a imunobiologia do transplante de válvula cardíaca. Depois de anestesiar o rato, use a tesoura dissecando para incisar a pele do xifoide ao entalhe severo.
E realize uma estecretomia cortando as costelas de cada lado, lateral ao esterno até que o acesso ideal ao coração seja alcançado. Injete Heparina no átrio esquerdo. Pós-sacrifício, extirpa o timo para melhorar a visualização dos grandes vasos.
Em seguida, remova o coração no bloco com a aorta ascendente até o nível da artéria innominada. Depois de colocar o coração doador em uma placa de Petri estéril imediatamente após a cardiectomia, em um tampão de armazenamento frio e frio, use os fórceps e a tesoura de mola vannas para dissecar o coração até que apenas a raiz aórtica permaneça com um manguito ventricular de um milímetro proximal à válvula aórtica. Para abrir a válvula aórtica, faça um corte longitudinal para abrir o seio de Valsalva entre os seios esquerdo e não corronário para visualizar os três folhetos.
Para extirir cada folheto de válvula aórtica individualmente, use os fórceps contundentes para agarrar a borda do folheto e use a Tesoura de Primavera de Vannas para extirir o folheto cortando de uma comissura até o anulo e depois para a próxima comissura. Armazene os folhetos excisados na solução de tampão de armazenamento gelado até que estejam prontos para serem implantados no rato receptor, mas implante todos os folhetos dentro de quatro horas de armazenamento frio. Uma vez que o rato receptor esteja completamente anestesiado, mantenha a temperatura corporal entre 36 e 38 graus celsius durante toda a cirurgia com a almofada de aquecimento.
Em seguida, coloque o rato em uma posição lateral direita para acessar o rim esquerdo. Administre Buprenorfina para o rato receptor subcutâneamente antes da cirurgia. E use a tesoura para incisar a pele sobre o flanco longitudinalmente por uma polegada.
Da mesma forma, inciso a parede abdominal subjacente. Usando o polegar e o dedo indicador, aplique uma pressão leve dorsal e ventrally durante o uso das fórceps curvas. Levante o polo caudal do rim através da incisão abdominal e da pele.
Externalize a extremidade craniana do rim da mesma forma. Alternativamente, o rim pode ser externalizado agarrando a gordura perirenal e puxando para cima com a tensão da luz. Uma vez externalizado, mantenha o rim úmido com soro fisiológico quente no rim.
A fim de criar um bolso subcapsular, comece aplicando pressão leve à cápsula renal usando um conjunto de fórceps contundentes para que a cápsula renal possa ser claramente distinguida do parenchyma subjacente. Simultaneamente usando outro conjunto de fórceps contundentes, segure cuidadosamente a cápsula e puxe suavemente para cima para criar um orifício na cápsula. Com fórceps contundentes, estenda a incisão até que um espaço de cerca de dois milímetros tenha sido criado para acomodar o folheto da válvula aórtica.
Desenvolva um bolso subcapsular raso que é ligeiramente maior que o folheto da válvula enquanto levanta a borda da incisão com um conjunto de fórceps e avança uma sonda sem corte sob a cápsula renal. Inicie o transplante da válvula aórtica recuperada levantando a cápsula fibrosa da borda avançando o folheto aórtico no bolso subcapsular com fórceps contundentes. A incisão e a cápsula renal podem ser deixadas abertas.
Empurre o rim suavemente de volta para sua posição anatômica usando contratração aplicada nas bordas de incisão. Feche a incisão abdominal com uma sutura cirúrgica estéril e feche a pele com grampos. Após a operação, coloque o rato em uma gaiola limpa em uma almofada de aquecimento com acesso a comida e água.
Se necessário, administre Buprenorfina ao rato receptor a cada seis ou doze horas para aliviar a dor. Monitore o animal diariamente para avaliar a cicatrização de feridas de rotina e sinais de dor ou angústia. E remova os grampos depois de sete a dez dias da cirurgia.
Uma imagem representativa mostra a posição do folheto da válvula aórtica sob a cápsula renal para implementação. E depois de três, sete e vinte e oito dias dentro do rato receptor, localizar e recuperar o tecido transplantado tornou-se fácil. Os folhetos de válvulas aórticas mantiveram sua arquitetura nativa após o transplante heterotópico em animais síndicos.
Demonstrando a utilidade deste modelo como linha de base para comparar a resposta imune em transplantes alergênicos. A Histologia com hematoxilina e eosina de coloração revelou que folhetos de válvulas em transplantes síngênicos após sete dias estavam estruturalmente intactos sem sinais de inchaço edematoso. A integridade estrutural do folheto da válvula após o transplante foi confirmada ainda pela Imunohistoquímica para atoíneo muscular liso e CD31.
Os folhetos da válvula aórtica são muito delicados. É importante manuseá-los com muito cuidado sem danificar as válvulas. Subcapsular renal, transplante de válvula cardíaca simplifica o transplante heterotópico da válvula cardíaca.
Isso permitirá que pesquisadores com capacidade microcirúrgica limitada explorem a imunobiologia do transplante de válvulas cardíacas.
