Le modèle de perforation endovasculaire combiné à l’IRM postopératoire permet de vérifier le saignement et d’exclure d’autres pathologies intercrâniennes. L’un des avantages de cette approche est la possibilité de quantifier le volume de saignement pour une analyse plus approfondie des sous-groupes. Commencez par raser les poils du cou de la souris.
Appliquez une pommade ophtalmique pendant la procédure. Désinfectez la peau avec de l’éthanol à 70% suivi de bétadine ou de chlorhexidine et appliquez 1% de lidocaïne. Placez la souris en position couchée avec la tête et le torse orientés vers le haut.
Stabilisez la souris dorsalement en utilisant du ruban adhésif sur les quatre extrémités. Étirez la peau du cou et élevez-la. Déplier la peau du cou du menton au bord supérieur de l’os du sein et séparer les glandes salivaires du tissu conjonctif adjacent.
Exposez la gaine de l’artère carotide commune en séparant les muscles le long d’un côté de la trachée. Exposez le champ chirurgical avec un rétracteur ou un tampon de gaze stérile et détachez l’artère carotide et laissez un 8-0 libre suture de soie sans ligaturation, en veillant à ne pas endommager le nerf vagal. Disséquez l’extrémité distale de l’ECA et ligaturez les vaisseaux deux fois en position distale.
Au milieu du segment de filament ligaturé deux fois, disjoignez l’ECA et créez un moignon de vaisseau. Laissez une suture de soie autour de l’ICA sans la fermer. Préarrangez une ligature pour le filament autour du moignon ECA.
Ne le fermez pas avant d’avoir réussi l’insertion du filament. Fermez temporairement l’ICA et le CCA à l’aide d’une suture ou d’un micro-clip. À l’aide de ciseaux microvasculaires, faites une incision dans l’ECA et insérez un filament 5-0 alternativement 4-O Prolene, et avancez-le dans CCA.
Fermez la ligature sur l’ECA tout en détachant le micro clip sur l’ICA et le CCA. Retirez doucement le filament et ajustez le moignon ECA dans la direction crânienne tout en invaginant le filament à travers la bifurcation dans l’ICA. Placez la pointe du filament médialement à un angle d’environ 30 degrés par rapport à la ligne médiane trachéale dans le plan horizontal et poussez-la à l’intérieur de l’ICA.
Lors de la bifurcation ACA-MCA, une résistance est observée. Déplacez le filament vers l’avant jusqu’à trois millimètres et perforez le bon ACA. Retirez rapidement le filament sur le moignon eca, ce qui permet au sang de circuler dans l’espace sous-arachnoïdien.
Placez le filament dans cette position pendant 10 secondes. Retirez le filament. Le CCA peut être temporairement fermé au préalable pour éviter une perte de sang excessive, puis retirer le filament.
Ligaturez l’ECA à l’aide de sutures préarrangées et rouvrez le CCA si vous l’avez déjà fermé. La présence de tremblements musculaires, la myose ipsilatérale, le halètement respiratoire, l’altération du rythme cardiaque et l’incontinence urinaire peuvent être des preuves de réussite de la chirurgie. Assurez-vous qu’il n’y a pas de fuite de saignement et désinfectez la peau.
Suturez la plaie. Placez la souris dans une boîte thermique et attendez que l’animal ait une conscience suffisante pour avoir une position couchée sternale. Pour soulager la douleur, administrer 1,2 milligramme par millilitre de paracétamol.
À l’aide d’un scanner de rongeurs sur un résonateur de tête de souris, effectuez une IRM après 24 heures de chirurgie, placez la souris sur une couverture d’eau chauffée circulante à 37 degrés Celsius. Tout d’abord, effectuez une analyse de référence rapide en acquérant trois packages de tranches orthogonales. Utilisez ensuite une séquence d’écho de spin turbo 2D pondérée T2 haute résolution pour l’imagerie.
Transférez les données au format d’image DICOM et utilisez le logiciel Imagej pour le classement SAH et la volumétrie des caillots sanguins. Pour assurer le bon site de saignement et exclure d’autres pathologies intracrâniennes, des IRM ont été effectuées 24 heures après l’opération. Le grade hémorragique de l’HSA a été quantifié sur la base d’IRM pondérées en T2.
Parmi les souris examinées, 14% des animaux ont été classés comme saignement de grade zéro sans preuve radiologique d’HSA ou d’hémorragie. La majorité des animaux présentaient des degrés de saignement compris entre un et trois, et 10 % présentaient un grade de saignement quatrième qui était défini comme étant de l’HSA le long de l’AVC et/ou de l’ICH. Le volume total de saignement de chaque grade d’HSA, basé sur l’épaisseur de l’HSA, a été quantifié, ce qui aide à déterminer la zone de saignement.
Le volume de saignement calculé en fonction de l’épaisseur axiale de l’HSA a montré des différences significatives dans leurs sous-groupes correspondants de grade un à trois. Tout au long de la chirurgie, une dissection complète du tissu de connexion environnant est cruciale pour un positionnement correct des sutures. Assurez-vous que la longueur du moignon ECA est suffisante pour disposer d’un espace de travail confortable pour la ligature, l’incision et l’insertion du filament.
Ne poussez jamais le filament vers l’avant lorsque vous ressentez une résistance avant la bifurcation MCA-ACA pour éviter la perforation prématurée des vaisseaux.
