Модель эндоваскулярной перфорации в сочетании с послеоперационной МРТ позволяет верифицировать кровотечение и исключить другие интеркраниальные патологии. Одним из преимуществ такого подхода является возможность количественной оценки объема кровотечения для дальнейшего анализа подгрупп. Начните с бритья волос на шее мыши.
Наносите офтальмологическую мазь во время процедуры. Продезинфицируйте кожу 70% этанолом, а затем бетадином или хлоргексидином и нанесите 1% лидокаина. Поместите мышь в лежачее положение головой и туловищем, обращенными вверх.
Стабилизируйте мышь дорсально с помощью ленты на четырех конечностях. Растяните кожу шеи и поднимите ее. Разверните кожу шеи от подбородка до верхнего края грудной кости и отделите слюнные железы от прилегающей соединительной ткани.
Обнажите общую оболочку сонной артерии, разделив мышцы вдоль одной стороны трахеи. Обнажите хирургическое поле с помощью втягивающего или стерильного марлевого тампона и отсоедините сонную артерию и оставьте свободным 8-0 шелковый шов без его перевязки, гарантируя, что не повредит блуждающий нерв. Рассекните дистальный конец ЭКА и дважды обложите сосуды в дистальном положении.
В средней точке дважды перевязанного сегмента нити накаливания отделяются от ЭКА и создают культю сосуда. Оставьте шелковый шов вокруг ICA, не закрывая его. Предварительно организуйте одну перевязку для нити вокруг пня ЭКА.
Не закрывайте его до успешного введения нити накаливания. Временно закройте ICA и CCA с помощью шва или микрозажима. Используя микрососудистые ножницы, сделайте разрез в ЭКА и вставьте 5-0 альтернативно 4-O Проленовую нить и продвиньте ее в CCA.
Закройте лигатуру на ECA, отсоединив микрозажим на ICA и CCA. Осторожно оттяните нить накаливания и отрегулируйте культю ECA в черепном направлении, одновременно инвагинируя нить через бифуркацию в ICA. Поместите наконечник нити медиально под углом приблизительно 30 градусов к средней линии трахеи в горизонтальной плоскости и протолкните его внутрь ICA.
При бифуркации ACA-MCA наблюдается резистентность. Переместите нить накаливания вперед до трех миллиметров и перфорируйте правый ACA. Быстро выводите нить на культю ЭКА, позволяя кровотоку в субарахноидальном пространстве.
Поместите нить накаливания в это положение на 10 секунд. Извлеките нить накаливания. CCA может быть временно закрыт заранее, чтобы избежать чрезмерной кровопотери, а затем изъять нить.
Сажайте ECA с помощью заранее подготовленных швов и повторно открывайте CCA, если вы закрыли его раньше. Наличие мышечного тремора, ипсилатерального миоза, задыхания, измененного сердечного ритма и недержания мочи может быть подтверждающим свидетельством успешной операции. Убедитесь, что нет кровотечения и дезинфицируйте кожу.
Зашвивают рану. Поместите мышь в термобокс и подождите, пока у животного не будет достаточного сознания, чтобы иметь стернальное лежание. Чтобы облегчить боль, вводят 1,2 миллиграмма на миллилитр парацетамола.
Используя сканер грызунов на резонаторе головы мыши, выполните МРТ после 24 часов операции, поместите мышь на нагретое одеяло из циркулирующей воды при 37 градусах Цельсия. Сначала выполните быстрое справочное сканирование, получив три пакета ортогональных срезов. Затем используйте взвешенную 2D-последовательность спинового эха с высоким разрешением T2 для визуализации.
Перенесите данные в формат изображения DICOM и используйте программное обеспечение Imagej для классификации SAH и объемной обработки сгустков крови. Чтобы обеспечить правильное место кровотечения и исключить другие внутричерепные патологии, МРТ-сканирование проводилось через 24 часа после операции. Степень кровотечения SAH была количественно оценена на основе взвешенного Т2 МРТ-сканирования.
Среди обследованных мышей 14% животных были классифицированы как кровотечение нулевой степени без радиологических доказательств САГ или кровоизлияния. Большинство животных показали степень кровотечения от одного до трех, а 10% показали кровотечение четвертой степени, которая была определена SAH вдоль инсульта и / или ICH. Общий объем кровотечения каждой степени SAH, основанный на толщине SAH, был количественно определен, что помогает определить область кровотечения.
Рассчитанный объем кровотечения на основе осевой толщины SAH показал значительные различия в соответствующих им подгруппах класса от одного до трех. На протяжении всей операции тщательное рассечение окружающих соединительных тканей имеет решающее значение для правильного позиционирования швов. Убедитесь, что длина пня ECA достаточна, чтобы у вас было удобное рабочее пространство для перевязки, разреза и введения нити накала.
Никогда не выдвигайте нить вперед, когда вы чувствуете сопротивление перед бифуркацией MCA-ACA, чтобы предотвратить преждевременную перфорацию сосуда.
