La dénervation sympathique rénale est un traitement potentiel de l’hypertension, qui a été prouvé par de nombreux essais cliniques. Cette technique dénerve les nerfs rénaux à écoulement libre sans endommager les artères rénales. De plus, c’est un modèle simple, critique, reproductible et standardisé.
La démonstration de la procédure sera assurée par Ming Wang, un assistant de laboratoire de mon laboratoire. Commencez par désinfecter la table d’opération avec de l’éthanol à 70%, puis réglez la température du coussin chauffant à 37 degrés Celsius. Avant la chirurgie, stérilisez tous les instruments chirurgicaux, y compris les ciseaux microchirurgicaux, les pinces droites fines, les pinces fines incurvées, les pinces hémostatiques, les gazes stériles et le papier de pesée à 121 degrés Celsius pendant 30 minutes.
Après avoir anesthésié une souris C57BKL/6 mâle âgée de 14 semaines, retirez les poils sur le dos avec un rasoir, puis appliquez une pommade vétérinaire sur les yeux pour éviter la sécheresse. Placez la souris sur une table d’opération en position dorsale. Glisser et essuyer la zone rasée avec de la povidone iodée, suivie de trois lingettes avec de l’éthanol à 70%.
À l’aide d’une lame de scalpel stérile, faites une incision d’un centimètre perpendiculaire à la queue derrière l’oreille au-dessus de l’omoplate de la patte avant. Ensuite, utilisez un hémostatique stérile pour créer un tunnel sous-cutané sous la peau et créer une poche pour la pompe. Insérez doucement une pompe osmotique remplie d’angiotensine II dans la poche, en assurant suffisamment d’espace libre pour suturer la plaie sans étirer la peau.
Suturer le muscle avec des sutures en Vicryl 6-0 interrompues et fermer la peau avec des sutures en nylon 4-0 interrompues. Ensuite, écouvillonnez et essuyez le site de la plaie avec de la povidone iodée. Placez tous les instruments chirurgicaux dans un stérilisateur pendant 10 secondes et replacez les gants stériles entre les chirurgies.
Surveillez la souris jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie. Surveillez de près et observez la cicatrisation des plaies au moins deux fois par jour pendant la première semaine et une fois par jour par la suite, y compris la rougeur, l’enflure et l’infection. Effectuer la dissection immédiatement si la souris meurt pendant la perfusion d’angiotensine II.
Mesurer la pression artérielle au départ et chaque semaine après la perfusion d’angiotensine II avec la méthode de pléthysmographie du brassard de queue chez des souris conscientes. Une semaine après la perfusion d’angiotensine II, sélectionnez les souris présentant une pression artérielle élevée et notez leur poids. Choisissez des animaux d’un poids minimum de 24 grammes pour la chirurgie de dénervation rénale.
Ensuite, retirez les poils sur l’abdomen d’une souris anesthésiée avec un rasoir, puis placez la souris sur la table d’opération. Maintenez l’abdomen en place et fixez les membres avec du ruban adhésif. Désinfecter la peau abdominale avec de la povidone iodée, suivie de trois lingettes avec 70% d’éthanol.
Après avoir pratiqué une incision abdominale médiane ventrale de deux centimètres, tirez l’intestin vers l’arrière avec de la gaze imbibée d’une solution saline de 37 degrés Celsius pour exposer l’artère rénale gauche. Soigneusement, mais franchement, disséquez la graisse loin de l’artère rénale à l’aide d’une pince à épiler incurvée. À l’aide de ciseaux tranchants stériles, coupez le papier de pesée en un rectangle de la même taille que l’artère rénale.
Coupez plusieurs morceaux de papier de pesée à la fois pour garder la même forme. Trempez le papier de pesage dans une solution d’éthanol à 10 % de phénol pendant au moins 30 secondes. Couvrez la surface de l’artère rénale gauche et enveloppez le vaisseau avec le papier de pesée pendant deux minutes.
Utilisez de la gaze pour protéger les tissus environnants afin d’éviter que le papier de pesée ne touche les reins et l’intestin. Répétez la même procédure pour l’artère rénale droite. Après la chirurgie, repositionnez les muscles dans leur position initiale et fermez le péritoine avec des sutures en Vicryl 6-0 dans un schéma de suture interrompu, puis fermez la peau avec des sutures en nylon 4-0 interrompues.
Surveillez toutes les souris jusqu’à ce qu’elles soient complètement rétablies. Une augmentation significative de la pression artérielle systolique a été observée une semaine après la perfusion d’angiotensine II. Le groupe de dénervation sympathique rénale, ou RDN, angiotensine II a montré une réduction significative de la pression artérielle systolique par rapport au groupe angiotensine II simulée 21 jours après la procédure RDN.
Aucune différence significative n’a été observée entre les groupes placebo et RDN deux semaines après la procédure RDN. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine du nerf sympathique rénal et de l’artère rénale est illustrée ici. Aucun épaississement de la couche intima de l’artère rénale n’a été observé dans les quatre groupes.
Par rapport au groupe des noyaux fictifs, fragmentés et pyknotiques, la digestion et le gonflement du tissu endoneurial ont été observés dans les deux groupes RDN. L’immunohistochimie des faisceaux nerveux a révélé que l’expression de la tyrosine hydroxylase était significativement diminuée dans le groupe RDN et RDN angiotensine II par rapport aux deux groupes simulés. La teneur en noradrénaline corticale rénale dans les reins dénervés dans le groupe normotendus et hypertendu a été significativement réduite par rapport au rein innervé.
La coloration de Masson n’a montré aucune augmentation remarquable de l’intima media de l’aorte abdominale parmi les groupes. Des images représentatives du myocarde dans différents groupes sont présentées ici. L’hypertrophie cardiaque induite par la perfusion d’angiotensine II a été améliorée par le traitement RDN par la diminution de la fibrose interstitielle et de la taille des cardiomyocytes.
Pendant la procédure, ne touchez pas le phénol aux tissus environnants, sauf à l’artère rénale, car il peut provoquer une obstruction intestinale, une infection abdominale et une sténose de l’artère rénale. Cette méthode peut établir un modèle RDN standardisé pour aider à étudier les mécanismes qui contrôlent l’hypertension. Les applications futures de cette technique peuvent contribuer à élargir les voies qui sous-tendent le processus d’hypertension et d’hypertrophie cardiaque.
