Isolement et culture de macrophages synoviaux primaires et de fibroblastes à partir de tissus arthritiques murins

Des essais cellulaires sont nécessaires pour clarifier les fonctions moléculaires. Dans les études sur l’arthrite, la méthode pour isoler les cellules primaires est bien établie dans les fibroblastes synoviaux, mais pas dans les macrophages synoviaux. Par conséquent, nous avons développé un protocole pour isoler et étendre les macrophages synoviaux et les fibroblastes synoviaux à partir de modèles d’arthrite.

Les fibroblastes synoviaux primaires du tissu arthritique murin ont contribué à l’élucidation des mécanismes moléculaires dans la pathogenèse de l’arthrite. D’autre part, les macrophages dérivés de la moelle osseuse, les macrophages dérivés de monocytes sanguins et les lignées cellulaires de macrophages ont souvent été utilisés comme ressources en macrophages pour les études sur l’arthrite. Étant donné que les macrophages peuvent acquérir des fonctions associées à leur microenvironnement, les sources générales de macrophages peuvent manquer de réponses spécifiques aux tissus arthritiques.

De plus, il est difficile d’obtenir suffisamment de cellules synoviales par tri, car la synoviale murine est un très petit tissu, même dans les modèles d’arthrite. Dans la méthode précédente pour isoler les fibroblastes synoviaux, les macrophages synoviaux ont été éliminés. En outre, une méthode pour isoler et développer les macrophages résidents de certains organes a été rapportée.

Par conséquent, les protocoles existants ont été modifiés en combinaison pour isoler et développer à la fois les macrophages synoviaux et les fibroblastes synoviaux à partir du tissu arthritique murin. Cette méthode peut isoler à la fois les macrophages et les fibroblastes de la synoviale inflammatoire avec une grande pureté, et elle est simple et reproductible. Cette méthode permet l’expansion des macrophages synoviaux en co-culture avec des fibroblastes synoviaux.

En outre, la méthode offre un avantage, en ce sens que les fibroblastes synoviaux peuvent être utilisés avec moins de passages. Le protocole établi serait un avantage pour l’élucidation des mécanismes pathologiques de la polyarthrite rhumatoïde.