Extraction d’ADN acellulaire d’échantillons d’humeur vitréenne et aqueuse pour le diagnostic et la surveillance du lymphome vitréo-rétinien

Dans le cadre de cette recherche, nous tentons d’utiliser les tests moléculaires de l’humeur vitrée prélevée dans l’œil par vitrectomie pour diagnostiquer le lymphome vitréo-rétinien ou VRL, une maladie agressive dont les symptômes chevauchent ceux des affections oculaires inflammatoires courantes. La cytopathologie, la cytométrie en flux et les tests moléculaires sont des méthodes couramment utilisées pour diagnostiquer la VRL. Les sensibilités publiées des méthodes non moléculaires sont de 44 à 90 % pour la cytopathologie et de 50 à 60 % pour la cytométrie en flux, la cytopathologie, la cytométrie en flux et les tests moléculaires avec de l’ADN cellulaire nécessitent des cellules néoplasiques intactes.

Cela pose un problème dans les échantillons d’humeur vitrée car le volume et la cellularité de ces échantillons sont faibles et les cellules peuvent être dégradées par l’apoptose ainsi que par la collecte, le traitement et le stockage des échantillons. Nous avons découvert que l’ADN acellulaire extrait d’échantillons de liquide vitré fournit une autre source d’ADN provenant des tests moléculaires qui ne nécessite pas de cellules intactes, et qui montre également des signes de VRL et peut être utilisé pour diagnostiquer ce lymphome. L’extraction d’ADN sans cellule permet d’effectuer des tests moléculaires sans cellules néoplasiques intactes.

Cela permet de maximiser l’utilité des échantillons vitrés, car les cellules intactes peuvent être réservées à la cytopathologie et à la cytométrie en flux tout en utilisant le liquide surnageant restant qui serait autrement rejeté pour les tests moléculaires.