הערכה שיטתית של רווחה בעכברים להליכי באמצעות הרדמה כללית

Summary

פיתחנו פרוטוקול כדי להעריך רווחה בעכברים במהלך הליכי באמצעות הרדמה כללית. סדרה של פרמטרים התנהגותית המציינת רמות של רווחה וכן glucocorticoid מטבוליטים נותחו. הפרוטוקול יכול לשמש כסיוע כללי כדי להעריך את מידת חומרת בצורה מדעית, מהחי.

Abstract

תוך שמירה 3R עקרון (החלפת, צמצום, עידון) שפותחה על ידי ראסל ברץ, המחקר המדעי יש להשתמש חלופות לניסויים בבעלי חיים במידת האפשר. כאשר אין כל חלופה לניסויים בבעלי-חיים, המספר הכולל של חיות מעבדה המשמש צריך להיות מינימום צריכה להשיג נתונים יקרי ערך. יתר על כן, צריך להיות מיושם באמצעים המתאימים עידון כדי למזער את הכאב, הסבל, מצוקה ליווי בהליך ניסיוני. קטגוריות המשמשות לסיווג מידת כאב, סבל ומצוקה הם ללא שחזור, קלה, מתונה או חמורה (להנחיית האיחוד האירופי 2010/63). כדי לקבוע אילו קטגוריות, להחיל במקרים בודדים, חשוב להשתמש בכלים מבחינה מדעית.

פרוטוקול היטב-being-ההערכה המובאת כאן מיועד הליכים שבמהלכה משמש הרדמה כללית. הפרוטוקול מתמקד הביתה כלוב התנהגויות פעילות, סולם גרימיס העכבר ו יוקרה כגון ומחילות הקן בונים התנהגות כמו אינדיקטורים של רווחה. היא משתמשת גם הפרדיגמה גישוש חינם להתנהגות הקשורות חרדת תכונה. מטבוליטים corticosterone צואה כמו אינדיקטורים כהתקפת נמדדים על התקופה שלאחר הרדמה 24 שעות ביממה.

הפרוטוקול מספק מידע מדעי מוצק על מצבם של עכברים בעקבות הרדמה כללית. בשל פשטותו, הפרוטוקול יכול בקלות להיות מותאם, משולב במחקר המתוכנן. אמנם הוא אינו מספק סולם לסיווג מצוקה בקטגוריות בהתאם להנחיית האיחוד האירופי 2010/63, זה יכול לעזור לחוקרים להעריך את מידת החומרה של הליך שימוש בנתונים מבחינה מדעית. הוא מספק דרך לשפר את ההערכה של רווחה בצורה מדעית, מהחי.

Introduction

האיחוד האירופי דירקטיבה 2010/63¹ קובע כי העיקרון 3R (החלפת, הפחתה, עידון) שפותחה על ידי ראסל ו ברץ² הוא להיות מיושם בכל פעם ניסויים בבעלי חיים הכרחי. מטרתה העיקרית של ההנחיה של האיחוד האירופי כדי לשלב את כל ניסויים בבעלי חיים, אבל ההנחיה מודה, לעת עתה, ניסויים בבעלי חיים יש עדיין צורך לערוך מחקר שיכול להגן על בריאות האדם ושל בעלי החיים. לפיכך, אם ניסוי בבעלי חיים לא יכול להיות מוחלף על ידי כל שיטה חלופית, רק את המספר המינימלי של חיות מעבדה היא לשמש כדי להשיג תוצאות אמינות. בנוסף, הסכום של כאב, סבל ומצוקה המלווה בצרות צריך להיות ממוזער באמצעות אמצעים עידון המתאים. האיחוד האירופי דירקטיבה 2010/63 קובע כי חומרת הליך חייב להיות פרוספקטיבי מסווגים ללא שחזור, קלה, מתונה או חמורה¹. כמו סיווג חומרת הוחלט על בסיס מקרה מקרה חשוב יש כלי מבחינה מדעית כדי להעריך את חומרת הליך נתון.

גליונות ניקוד כפי שהוצע על ידי מורטון ו גריפית³ הן כלי חיוני באיתור כל לחריגות מצב נורמלי, כולל השפעות שליליות על רווחה⁴. גליונות ניקוד משמשות לקביעת retrospectively כאב, סבל, ואת המצוקה הנגרמת על ידי ניסוי ולהתמקד השינויים גלויים במצב הפיזי לחיה הבודדת (למשל, משקל הגוף, פרווה, בהליכה). למרות, נספח השמיני של להנחיית האיחוד האירופי 2010/63 מספק דוגמאות של כל קטגוריית חומרה, החוקרים עדיין חוסר כלים להעריך את מידת החומרה של הליך נתון באמצעות מדעית מבוססת נתונים.

בהעדר אינדיקטורים מציג שלילית רווחתם היא לא הדרך היחידה כדי לקבוע את המצב של החיה; הנוכחות של אינדיקטורים הצבעה על רווחה חיובי הוא גם חשוב^5,-^6,-^7,-⁸. לדוגמה, חיות להציג יוקרה התנהגויות כמו ומחילות, מקננים בניין התנהגות רק כאשר מתקיימים כל צרכיהם החיוניים. אם רווחה מופחת, התנהגויות יוקרה הם הראשונים לרדת^5,7. פרוטוקולים כדי לשמש בהערכת well-being צריך לכלול אינדיקטורים המצביעים פיזית, פיזיולוגית ביוכימית, מצבים פסיכולוגיים של בעלי חיים על מנת להעריך את רווחתם באופן מפורט ומקיף⁹.

בתוך ההקשר של עידון, פרוטוקול פותחה כדי לעמוד בדרישות אלה, כדי להעריך את ההשפעות של הליך מעורבים הרדמה כללית על שלומם של עכברים¹⁰. באותו הזמן, המטרה היא למזער את כל הלחץ נוספים כדי לאפשר את שילוב קל של הפרוטוקול ניסוי נתון. הפרוטוקול מתייחס ומחילות התנהגות הביתה כלוב התנהגות כגון פעילות, צריכת המזון, קינון, התנהגות הקשורות חרדת תכונה. בנוסף, הוא כולל קנה מידה גרימיס העכבר (תאסוף אותם), וניתוח פולשני של מטבוליטים corticosterone בצואה. הפרוטוקול נועד להקל את ההערכה של רווחה בצורה מדעית מהחי כדי לספק מידע על רווחה התומך את הסיווג של מידת חומרתה. בנוסף גליונות ניקוד, זה יכול לספק מידע שימושי עבור הסיווג חומרתה של פרוצדורה. הפרוטוקול קל לבצע, לא דורשת ציוד מקיף, אותו ניתן לשלב ניסוי מתמשך מבלי להשפיע על התוצאות של מחקר. יש לציין כי המחקר בעל חיים: דיווח ב- Vivo ניסויים (יגיעו) מנחה¹¹ הוא להיות נצפתה ב כל מחקרים שכללו ניסויים בבעלי חיים, עם המטרה של שיפור עיצוב, ניתוח ודיווח.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

המחקר בוצע על פי הנחיות השכיבו על ידי חוק רווחת בעלי חיים גרמנית, אושרה על-ידי הרשות מדינת ברלין ("Landesamt לדנציג Gesundheit und Soziales", מספר רישיון: G0053/15).

הערה: המטרה העיקרית של פרוטוקול זה היה לחקור את השפעת ההרדמה חוזרות ונשנות על מטבוליטים glucocorticoid. חישוב גודל המדגם בוצע כדי לקבוע את המספר של בעלי חיים כדי לשמש: n ≥ 2 × (s/ממוצע₁- ממוצע₂)² × (z_α + z_β)². ממוצע₁- ממוצע₂ הוא ההפרש בין ממוצעי אוכלוסיה בחברת החשמל אשר דוגמת גודל החישובים נעשים (α = 5%, β = 80%); z_α = 1.96 ו- z_β = 0.84 הן quantiles של ההתפלגות הנורמלית הסטנדרטית. איור 1 מדגימה קו הזמן של פרוטוקול זה. אם פרמטר של הפרוטוקול מראה הבדל עם רמת שליטה, בעל החיים צריך לפקח מקרוב, יש למדוד את הפרמטר שוב לאחר תקופה מתאימה. לדוגמה, אם תכונה התנהגות הקשורות חרדה מוגברת, התנהגות זו צריך להיבדק שוב כעבור שבוע, כדי לעזור לקבוע את התקופה עד החלמה מלאה. עת נקודות ותקופות חנומ פרוטוקול זה ניתן להתאים לשימוש עם הליכים אחרים. בעת שינוי נקודות זמן, יש לשמור habituation תקופות כמפורט בפרוטוקול. על מנת להפחית גורמים אשר עשויים להשפיע על ההתנהגות של העכברים, בדיקות הדורשות מניפולציה יותר וצריך להתנהל לאחר בדיקות. נא לא להפריע את ההתנהגות הרגילה של עכברים. איור 2 מסכמת כל הבדיקות של הפרוטוקול באמצעות גיליון סיכום הניקוד. איור 3 מספק סולמות מפושטת של הציון של רווחה, אשר נותן סקירה של כיצד לפרש את תוצאות הבדיקה.

1. הרגלה עכברים טיפול על ידי הנסיין

1. לאפשר עכברים habituate למתקן בעלי חיים לפחות 2 שבועות לאחר שהם הושגו מן המתקן או ספק אחר.
2. בית עכברים בקבוצות ולתחזק אותם בתנאים סטנדרטיים (בטמפרטורת החדר 22 ± 2 ° C; לחות יחסית 55 10% ±) על מחזור אור: האפל של 12:12 h.
3. לספק כל הקבוצות nestlets המנהרה וכותנה כמו העשרה רגיל, ו לספק מזון ומים ad libitum.
4. Habituate עכברים כל המנהרה ו/או גביע טיפול לפחות שבוע לפני בדיקות¹².
   הערה: אוסף עכברים בזנב יכול לגרום מתח או חרדה, אשר בתורו משפיע על רווחה, יש גם השפעה על התוצאות של זה פרוטוקול¹².

2. הכנת החדר בדיקה התנהגותית, מנגנוני

הערה: מספקים חדר נפרד לבדיקה, במיקום אידיאלי ליד חדר שבהם נשמרים החיות. תחבורה העכברים בכלובים שלהם הביתה מינימום מקום לפחות 60 בדיקה לפני ההליך מתנהל. במידת האפשר, לנהל את כל הבדיקות של פרוטוקול זה באותו חדר בדיקות שבו מתבצע ההליך.

1. הכינו את הכלוב תצפית לבחון את התנהגות ומחילות⁸ , לקחת את התמונות לשימוש המקלעים¹³ (איור 4).
   1. להשתמש בתיבת זכוכית עם שטח של 220 מ מ × 290 מ מ, בגובה של 390 מ מ.
   2. מכסים את הרצפה של תיבה זו עם 0.5 ס מ של מצעים חומר.
   3. פיזור קומץ של מצעים בשימוש חומר מן הכלוב הביתה על גבי החומר מצעים חדשים להפחתת המצוקה הנגרמת על ידי הסביבה החדשה.
   4. לספק מזון, מאותו סוג זה מסופק בדרך כלל כמו דיאטה, ואת המים.
      הערה: אם אפשרי, להשתמש בקבוקי מים, כי עכברים עשויים למלא קעריות מים עם מצעים חומר.
2. להכין כלוב (סוג III: 420 מ"מ × 260 מ"מ × 150 מ מ) לתקופה השגחה 24 שעות ביממה, אשר עכברים שוכנים בנפרד (איור 5).
   הערה: על מנת לצמצם את המשך למגורים נפרדים, לאסוף נתונים עבור קן בניית התנהגות, פעילות הביתה כלוב, צריכת המזון של מטבוליטים corticosterone צואה (FCM) בתקופה זו.
   1. מקום חדש מצעים חומר הכלוב (כ 0.5 ס מ עמוקה) ואת פיזור קומץ של מצעים בשימוש חומר ללא צואה מן הכלוב בבית על החומר החדש, על מנת להפחית מצוקה.
   2. לספק nestlet כותנה מרובע מתוקננת של משקל מוגדר, העשרה סביבתית היחיד (ראו טבלה של חומרים)¹⁴.
      הערה: nestlets מסחרי שאולי נבדלים במשקל. לכן, אנו ששינה את נטל nestlet מתוארת על ידי דיקון, להשתמש 2.0 g במקום 2.7 גרם¹⁴.
   3. הר חיישן אינפרה אדום על גג הכלוב, בעת שימוש בחיישני אינפרא אדום למדידת פעילות כלוב הביתה (ראה טבלה של חומרים).
   4. לספק מזון, מאותו סוג זה מסופק בדרך כלל כמו דיאטה, ומים ad libitum.

3. העכבר גרימיס סולם

הערה: צילומים עבור תאסוף אותם נלקחים בכלא של התבוננות בשלוש נקודות זמן: (i) יומיים לפני ההליך רמות המקלעים הבסיס הרשומה, (ii) 30 דקות לאחר ההליך ו- (iii) 150 דקות לאחר ההליך. כאשר רווחה לקוי, להגביר את הציונים תאסוף אותם. אם הציונים המקלעים מוגברת עדיין שנצפו לאחר מינימום 150, לקחת תמונות נוספות בשלב מאוחר יותר.

1. השתמש מצלמה באיכות high-definition לצילום.
2. בעדינות להעביר את העכבר לתוך הכלוב תצפית ולאפשר את העכבר כדי habituate את הסביבה החדשה במשך לפחות 30 דקות.
3. לקחת ללא הרף על 30-40 צילומים על כל הזמן הצבע בתוך 1-2 דקות.
4. למיין את כל התמונות על-ידי בחירת התצלומים פרונטלית או צדדיים חדה ומחיקת תמונות מטושטשות או תצלומים המציגים העכבר פרצופים מזוויות אחרות מאשר תצוגה חזיתית או צדדיים.
5. באופן אקראי, בחר תמונה אחת מנקודה כל הזמן, (דהיינו יומיים לפני הליך 30 דקות לאחר ההליך, 150 דקות לאחר ההליך) עבור כל עכבר.
6. לחתוך את התמונות כדי להציג רק את הראש של העכבר כך תנוחת הגופה אינה גלויה¹³.
7. צור קובץ גיליון אלקטרוני עם גיליון אחד עבור כל התמונה ולהוסיף טבלה כולל חמש יחידות פעולה פנים תאסוף אותם לכל אחד מהגליונות.
   הערה: הקובץ מכיל תמונות בסיסית, כמו גם הליך פוסט תמונות.
8. אקראי מסדר הסדינים.
9. להציג את הקובץ על גבי מסך מחשב שלוש ישויות עצמאיות, שהוכשרו בעבר כדי להשתמש תאסוף אותם שפותחה על ידי לנגפורד. et al. ויש להם ציון היחידות פעולה פנים באמצעות 3-נקודת-סרגל (0 = לא להציג, 1 = בינוני להציג, 2 = ברור קיים).
   הערה: הבקיע מבוסס על בעקבות פרמטרים¹³: מסלולית הידוק ("הצטמצמות של האזור-מסלולית, עם העפעף סגורים היטב או לסחוט את העין"); הבליטה את האף ("מעוגלים הרחבה של העור גלוי על גשר האף"); בליטה בלחי ("קמורה המראה של שריר הלחי"); תפקיד האוזן ("אוזניים הוציא לגזרים, חזרה מן העמדה הבסיסית שלהם או הכוללים רכסים אנכי טופס זה בשל טיפים של האוזניים נמשך אחורה"); שינוי משערה ("תנועת שפם מקו שלהם למקם גם אחורה, כנגד הפנים או קדימה, כאילו עומדים על קצה; . שפם עשוי גם להתאחד").
10. לנתח ציונים, כדלקמן (מקורי לנגפורד. et al. ¹³).
    1. ממוצע כל פעולה פנים היחידות עבור כל התמונה כדי ליצור את הציון MGS.
       הערה: אם אחד של יחידות פעולה פנים יכול להיות מנוקדות, ממוצע היחידות פעולה פנים הנותרים.
    2. הפחת הממוצע עבור התמונות בסיסית מן הממוצע לקבלת ההליך פוסט תמונות לקבל ניקוד ההבדל המקלעים עבור כל עכבר.
    3. הבדיקה לגבי הבדלים את התוצאות ההבדל המקלעים האנשים (nonparametric לבדיקת דגימות קשורים).
       הערה: אם יש הבדל משמעותי (p < 0.05), לקבוע הציונים של כל התמונות או רק עשרות כמה תצלומים שונים בין האנשים. אם האחרון נכון, חזור על הניקוד של תמונות אלו. אחרת, האנשים צריך לחזור על ההכשרה המקלעים והם שוב ואז זוכים הצילומים.
    4. ממוצע הציונים ההבדל המקלעים להשיג scorers שונה עבור כל עכבר, אם התוצאות של כל אדם לא שונות באופן משמעותי.
    5. השתמש מבחן סטטיסטי nonparametric כדי להשוות בין הציונים ההבדל המקלעים בממוצע בין קבוצות המחקר.

4. מתחפרים התנהגות^8,15,16

1. להכין את בורוז על-ידי הצבת 140 ± 2 g באוכל שלהן בדרך כלל שסופק כמו דיאטה רגילה אטום מים בקבוק פלסטיק (250 מ ל, 150 מ מ אורך, בקוטר 55 מ מ, 45 מ מ בקוטר של צוואר בקבוק)⁸.
   הערה: עכברים מעדיפים צינורות רחב, בורוז בקוטר של 68 מ מ יכול לשמש כפי שתואר על ידי דיקון¹⁶.
2. מקום למחילה מלאה באוכל שלהן בכלוב בבית 5 ימים לפני ההליך עבור הסתגלות.
   הערה: יחידת לחילוק מזון רגיל בתוך הכלוב צריך לא תתרוקן אך גם תישאר מלא באוכל שלהן, עכברים משמשים את זה.
3. לבצע את הבדיקה פעמיים, יומיים לפני ההליך (בסיסית); לבצע את האחרון 30 דקות פוסט ההליך גם כן.
   1. תן את העכבר habituate במשך לפחות 30 דקות לכלוב התבוננות היכן צולמו תמונות עבור תאסוף אותם.
   2. המקום שהיה בבקבוק פלסטיק מלאים באוכל שלהן מקבילה לקיר האחורי של הכלוב תצפית.
   3. שוקלים באוכל שלהן (g) שנותרו למחילה לאחר 2 h.
4. לחשב את המשקל של כדורי מזון יוסר למחילה על ידי עכברים יחסי המשקל ההתחלתי (%).

5. 24 שעות ביממה תקופה התבוננות

הערה: עכברים שוכנות בנפרד, כמתואר ב- 2.2. (איור 5), במשך תקופה של 24 שעות ביממה, על מנת למדוד את המזון צריכת, פעילות הביתה כלוב, מקננים בניין התנהגות, ורמות FCM. התצפית 24 שעות ביממה מתקיים פעמיים: (i) 2 ימים לפני ההליך עבור רמות הבסיס, (ii) ביום של ההליך.

1. צריכת המזון
   1. שוקלים העכברים במרווחי זמן קבועים (למשל 2 ימים לפני הרדמה, מיד לפני הרדמה, יומיים לאחר הרדמה ושבועית לאחר הרדמה), על מנת להעריך שינויים במשקל הגוף (חלק הגיליון ניקוד).
      הערה: משקל הגוף נדרש כדי לחשב את צריכת המזון לגרם של משקל הגוף. ניתן גם למדוד צריכת מים במהלך התקופה השגחה 24 שעות ביממה. אם צריכת מזון מופחת, רווחה עשוי להיות לקוי.
   2. לקבוע את המשקל ההתחלתי של דיאטה מזון רגיל (גרם) הניתנים יחידת המזון של הכלוב (כ 100 גרם).
   3. לקבוע את המשקל של מזון רגיל בסוף התקופה השגחה 24 שעות ביממה.
   4. סריקה בצד הכלוב מתחת יחידת המזון בקפידה עבור מזון זליגת ולהוסיף כל כדורי עוד אוכל למצוא את המשקל של כדורי מזון שנותרו יחידת המזון.
   5. חישוב צריכת המזון לכל יחידת משקל הגוף.
2. פעילות כלוב הביתה
   הערה: ההוראות הבאות מתייחסות לשימוש חיישן אינפרא-אדום (ראה טבלה של חומרים), אבל גם יכול להיות מוערך הביתה כלוב פעילות עם תוכניות חלופיות. חריגה של הכלוב הביתה פעילות של רמות שליטה (למשל hypoactivity, היפראקטיביות) עשוי להיות סימן של רווחה לקוי.
   1. הפעלת התוכנית.
   2. לבחור מרווח דגימה של 1 דקות והשעה של רכישה של 24 שעות, כלומר דחפים נרשמים כל דקה במשך 24 שעות ביממה.
      הערה: אם הנסיין נכנס לחדר מספר פעמים לאחר ההקלטה, להשתמש רק נתונים מכל התקופות, כאשר עכברים היו לא מופרע (דהיינו במהלך תקופת כהה).
   3. לסכם 10 דקות במרווחים של דחפים.
   4. לחשב את השטח מתחת העקומה זמן (דחפים × דקות).
3. התנהגות לבניין הקן
   הערה: קינים מורכבים ולא גבוהה יכול לשמש כמחוון של רווחה.
   1. המקום של nestlet כותנה מרובע (ראה טבלה של חומרים) עם משקל מוגדר (למשל 2.0 g) באמצע הכלוב.
   2. ציון הקן בסולם 5-נקודה (ראו להלן) על פי דיקון¹⁴ למחרת בבוקר, בערך שעתיים אחרי נדלקת. שוקלים את כל חתיכות untorn nestlet כי הם לפחות 5% ממשקל nestlet הראשונית. ציון קינים כדלקמן¹⁴
      1. להקצות ניקוד של "1" אם 90% nestlet שלמות.
      2. להקצות ציון של "2" אם זה 50-90% ללא פגע.
      3. להקצות ניקוד "3" אם 50-90% nestlet משופשף.
      4. להקצות ניקוד "4" אם למעלה מ-90% משופשף אבל הקן הוא שטוח, פחות מ 50% של היקף שלו הוא גבוה יותר מאשר גובה גוף העכבר כאשר מקופלת.
      5. להקצות ניקוד "5" אם יותר מ 90% nestlet משופשף, קן גבוה, יותר מ 50% של היקף שלו הוא גבוה יותר מאשר הגוף בגובה של עכבר מכורבלת.
4. מטבוליטים Corticosterone צואה
   הערה: עליות של FCM מעל רמת שליטה לשקף רמות הלחץ חריפה על התקופה postanesthetic 24 שעות ביממה.
   1. לאסוף את כל כדורי צואה יבשה מן הכלוב באמצעות מלקחיים בסוף התקופה השגחה 24 שעות ביממה, לחסל את כדורי רטוב מזוהם עם השתן.
   2. תמצית FCM לפי Palme. et al. ¹⁷, כפי שמוצג להלן.
      1. דגימות צואה יבשה בטמפרטורה של 60-70 מעלות צלזיוס.
      2. Homogenize דגימות צואה באמצעות מרגמה.
      3. לרעוד aliquot של 0.05 g עם 1 מ"ל של 80% מתנול שפופרת צנטרפוגה במשך 30 דקות על מערבולת מרובה.
      4. צנטריפוגה דגימות ב 2500 x g למשך 15 דקות.
      5. פיפטה 0.5 מ של תגובת שיקוע לתוך צינור צנטריפוגה אחר.
      6. לאחסן דגימות צואה (ותמציות) לכל הפחות-18 ° c
      7. לנתח את כרטיס FCM באמצעות האנזים 5α-pregnane-3b,11b,21-triol-20-one מתכלה (EIA)^18,19 או אחר EIA מאומתים באופן מלא.
   3. לחשב את אחוז השינוי של ריכוזים FCM ביחס הריכוזים FCM בסיסית.

6. חינם הפרדיגמה גישוש

1. ניקח את הכלוב הביתה מחוץ לארון התקשורת והנח אותו על משטח השולחן בסוף התקופה השגחה 24 שעות ביממה.
2. מניחים מלמעלה כלוב gridded (ללא מזון או בקבוקי מים) בכלוב בזווית של 45 מעלות לצד יותר של הכלוב.
   הערה: לא מחריבים את הקן, אשר משמש כמקום מסתור אחר העכבר, אך המקום העליון כלוב באלכסון מעל הקן.
3. צג או וידאו-רשומה העכברים במשך 10 דקות ממרחק של-1.5 מ'.
   1. התחל את הטיימר.
   2. הערה כל הזמן כאשר העכבר מטפס על החלק העליון של הכלוב (עם ארבע רגליים למעלה כלוב) או משאיר את הכלוב העליון (עם הכפות אחת או יותר על רצפת הכלוב).
      הערה: בחלק מהעכברים עשויים לטפס לפסגה כלוב ולהשאיר אותה כדי להלך לאורך הקצה של הכלוב. עכברים האחורי גם על החלק העליון של הכלוב. רואים מקרים אלה העכברים היו עדיין על החלק העליון של הכלוב.
4. הערכת פרמטרים בעקבות ברט. et al. ²⁰.
   1. לנתח את השהיה כדי חקר הראשון (בשניות).
   2. נתח מספר החקירות.
   3. לנתח את משך הזמן (בשניות) של חקר.
      הערה: השהיה גבוהה חקר הראשון, מספר נמוך של החקירות של משך סך נמוך של חקר ניתן לציין רמות גבוהות יותר של חרדה תכונה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

פרוטוקול זה פותח במקור כדי להעריך את שלומם של עכברים C57BL/6JRj בעקבות חוויה אחת של איזופלוריין הרדמה (מושב הרדמה 45-מין אחד, n = 13 נקבות) או הרדמה איזופלוריין חוזרות ונשנות (שישה 45-מין הרדמה פגישות עם 3-4 ימים בין ההפעלות הרדמה, n = 13 נקבות) לעומת לרווחתם של בקרת עכברים (n = 6 נקבות)

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

הפרוטוקול פותח במקור כדי להעריך את שלומם של C57BL/6JRj עכברים שקיבלו הרדמה יחיד או הרדמה איזופלוריין חוזרות ונשנות. התוצאות לאשר את הבדיקות של התנהגויות יוקרה, כמו גם אמצעים אחרים (למשל התבנית גישוש חינם, תאסוף אותם, צריכת המזון ומחילות) היו רגישים שיטות להערכת well-being. הרדמה איזופלוריין חו?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isofluran	CP-Pharma Handelsgesellschaft mbH	1214
InfraMot - Sensore Units	TSE Systems	302015-SENS
InfraMot - Control Units	TSE Systems	302015-C/16
InfraMot - Software	TSE Systems	302015-S
Nestlet N	Ancare - Plexx	NES3600
Camera EOS 350D	Canon