הקמה ואישור של מודל עכבר עומס יתר על נפח החדר הימני לאחר הלידה

Summary

פרוטוקול זה מציג את ההקמה והאישור של מודל עומס יתר של נפח החדר הימני (VO) לאחר הלידה בעכברים עם פיסטולה עורקית בטנית (AVF), אשר ניתן ליישם כדי לחקור כיצד VO תורם להתפתחות הלב לאחר הלידה.

Abstract

עומס יתר בנפח החדר הימני (RV) שכיח בקרב ילדים עם מחלת לב מולדת. לאור שלבים התפתחותיים ברורים, שריר הלב של RV עשוי להגיב באופן שונה ל- VO אצל ילדים בהשוואה למבוגרים. המחקר הנוכחי נועד לבסס מודל RV VO לאחר הלידה בעכברים המשתמשים בפיסטולה עורקית בטנית שונה. כדי לאשר את יצירת VO ואת השינויים המורפולוגיים וההמודינמיים הבאים של RV, אולטרסאונד בטן, אקוקרדיוגרפיה, צביעה היסטוכימית בוצעו במשך 3 חודשים. כתוצאה מכך, ההליך בעכברות לאחר הלידה הראה שיעור הישרדות והצלחה פיסטולה מקובל. בעכברי VO, חלל הקרוואן הוגדל עם דופן חופשית מעובה, ונפח השבץ הוגדל בכ-30%-40% תוך חודשיים לאחר הניתוח. לאחר מכן, הלחץ הסיסטולי RV גדל, רגורגיטציה של שסתום ריאתי תואם נצפתה, והופיע שיפוץ עורק ריאתי קטן. לסיכום, ניתוח פיסטולה עורקית מותאמת (AVF) אפשרי כדי לבסס את מודל RV VO בעכברים לאחר הלידה. בהתחשב בהסתברות לסגירת פיסטולה והתנגדות מוגברת לעורק הריאתי, יש לבצע אולטרסאונד בטן ואקוקרדיוגרפיה כדי לאשר את מצב המודל לפני היישום.

Introduction

עומס נפח החדר הימני (RV) (VO) שכיח בקרב ילדים עם מחלת לב מולדת (CHD), מה שמוביל לעיצוב מחדש פתולוגי של שריר הלב ופרוגנוזה גרועה לטווח ארוך ^1,2,3. הבנה מעמיקה של שיפוץ קרוואנים והתערבויות מוקדמות מוקדמות הקשורות חיונית לתוצאה טובה אצל ילדים עם CHD. ישנם מספר הבדלים במבנים המולקולריים, בתפקודים הפיזיולוגיים ובתגובות לגירויים בליבם של מבוגרים וילדים^בגילאי 1,4,5,6. לדוגמה, בהשפעת עומס לחץ, התפשטות קרדיומיוציטים היא התגובה העיקרית בלבבות יילודים, ואילו פ....

Protocol

כל הנהלים המוצגים כאן תאמו את העקרונות המפורטים בהצהרת הלסינקי ואושרו על ידי הוועדה לרווחת בעלי חיים ולימודי אדם במרכז הרפואי לילדים בשנחאי (SCMC-LAWEC-2023-003). במחקר הנוכחי נעשה שימוש בגורי עכברים C57BL/6 (P7, זכרים, 3-4 גרם). בעלי החיים התקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים). גורי העכברים ואימהותיהם המניקות (גורים:אמהות = 6:1 בכלוב יחיד) הוחזקו בתנאי מעבדה ספציפיים נטולי פתוגנים במחזור אור וחושך של 12 שעות בטמפרטורה של 22 ± 2 מעלות צלזיוס עם גישה חופשית למים ותזונה תזונתית. הגורים חולקו באקראי לשתי קבוצות: קבוצת VO וקבוצת דמה (דמה).

1. הכנת ציוד וכלי ניתוח

הערה: הפרטים המסחריים ש....

תוצאות

שיעור הישרדות ופטנט AVF תוך 3 חודשים
30 (75%) עכברים בקבוצת VO ו-19 (95%) עכברים בקבוצת הדמה שרדו את ניתוח AVF (איור 4A). בקבוצת VO, שמונה עכברים מתו תוך יום אחד לאחר הניתוח עקב דימום מוגזם (n = 5) או קניבליזציה (n = 3), בעוד שני עכברים מתו מסיבות לא ידועות בגיל חודש.

מבי?.......

Discussion

בעבר, מודל RV VO הקלאסי נוצר באמצעות regurgitation^{שסתום 21}; עם זאת, בהשוואה ל- AVF, ניתוח מסתם לב פתוח עשוי לדרוש טכניקות מתוחכמות יותר ועשוי להיות קשור לתמותה גבוהה משמעותית, במיוחד בעכברים לאחר לידה. מכיוון שמחקרים בבעלי חיים הראו כי אותה השפעה של VO הושגה על ידי AVF²², ניתוח פי?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
70% Ethanol	Tiandz,Chia
ACETAMINOPHEN Oral Solution	VistaPharm, Inc. Largo, FL 33771, USA	NDC 66689-054-01
Anesthesia machine	RWD Life Science,China	R550IP
Anesthesia mask	RWD Life Science,China	68680
C57BL/6 mice	Xipu’er-bikai Experimental Animal Co., Ltd (Shanghai, China)
Hair removal cream	Veet, France	VT-200
Hematoxylin and eosin Kit	Beyotime biotech	C0105M
Isoflurane	RWD Life Science,China	R510-22-10
Microscope	Yuyan Instruments, China	SM-301
Surgical suture needles	NINGBO MEDICAL NEEDLE CO.,LTD, China
Thermostatic heating platform	Qingdao Juchuang Environmental Protection Group Co., Ltd, China
Ultrasound device	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Vevo 2100	Image modes includes B-Mode, Color Doppler Mode and Pulsed Wave Doppler Mode
Ultrasound gel	Parker Laboratories,United States	REF 01-08
Ultrasound transducer	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	MS 400