Создание и подтверждение постнатальной модели мышиной перегрузки объема правого желудочка

Резюме

В этом протоколе представлено создание и подтверждение модели постнатальной объемной перегрузки (ВО) правого желудочка у мышей с брюшной артериовенозной фистулой (АВФ), которая может быть применена для изучения того, как ВО способствует постнатальному развитию сердца.

Аннотация

Объемная перегрузка правого желудочка (ПЖ) часто встречается у детей с врожденными пороками сердца. В связи с различными стадиями развития миокард ПЖ может по-разному реагировать на ВО у детей по сравнению со взрослыми. Целью настоящего исследования является создание постнатальной модели ПЖ ВО у мышей, использующих модифицированную брюшную артериовенозную фистулу. Для подтверждения создания ВО и последующих морфологических и гемодинамических изменений ПЖ в течение 3 мес выполняли УЗИ брюшной полости, эхокардиографию, гистохимическое окрашивание. В результате процедура на постнатальных мышах показала приемлемую выживаемость и успешность лечения фистулы. У мышей VO полость ПЖ была увеличена с утолщенной свободной стенкой, а ударный объем увеличился примерно на 30%-40% в течение 2 месяцев после операции. После этого систолическое давление ПЖ повышалось, наблюдалась соответствующая регургитация легочного клапана, возникало ремоделирование малой легочной артерии. В заключение, модифицированная операция артериовенозной фистулы (АВФ) осуществима для создания модели RV VO у постнатальных мышей. Учитывая вероятность закрытия свища и повышенного сопротивления легочной артерии, перед применением необходимо выполнить УЗИ брюшной полости и эхокардиографию для подтверждения статуса модели.

Введение

Объемная перегрузка правого желудочка (ПЖ) часто встречается у детей с врожденными пороками сердца (ВПС), что приводит к патологическому ремоделированию миокарда и неблагоприятному долгосрочному прогнозу ^1,2,3. Глубокое понимание ремоделирования ПЖ и связанных с этим ранних целенаправленных вмешательств имеет важное значение для хорошего исхода у детей с ИБС. Существует несколько различий в молекулярных структурах, физиологических функциях и реакциях на раздражители в сердцах взрослых и детей 1,4,5,6.

протокол

Все процедуры, представленные здесь, соответствовали принципам, изложенным в Хельсинкской декларации, и были одобрены Комитетом по благополучию животных и изучению человека в Шанхайском детском медицинском центре (SCMC-LAWEC-2023-003). Для настоящего исследования использовали детенышей мышей C57BL/6 (P7, самцы, 3-4 г). Животные были получены из коммерческого источника (см. Таблицу материалов). Детеныши мышей и их кормящие матери (щенки:матери = 6:1 в одной клетке) содержались в лабораторных условиях, свободных от специфических патогенов, в 12-часовом цикле света и темноты при температуре 22 ± 2 °C со свободным доступом к воде и питательной диетой. Дет....

Результаты

Выживаемость и проходимость АВФ в течение 3 месяцев
В общей сложности 30 (75%) мышей в группе VO и 19 (95%) мышей в фиктивной группе пережили операцию AVF (рис. 4A). В группе VO восемь мышей умерли в течение 1 дня после операции из-за чрезмерного кровотечения (n = 5) или канниба?.......

Обсуждение

Ранее классическая модель RV VO создавалась с использованием клапанной регургитации²¹; однако, по сравнению с АВФ, операция на открытом клапане сердца может потребовать более сложных методов и может быть связана со значительно более высокой смертностью, особенно у постнатал.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
70% Ethanol	Tiandz,Chia
ACETAMINOPHEN Oral Solution	VistaPharm, Inc. Largo, FL 33771, USA	NDC 66689-054-01
Anesthesia machine	RWD Life Science,China	R550IP
Anesthesia mask	RWD Life Science,China	68680
C57BL/6 mice	Xipu’er-bikai Experimental Animal Co., Ltd (Shanghai, China)
Hair removal cream	Veet, France	VT-200
Hematoxylin and eosin Kit	Beyotime biotech	C0105M
Isoflurane	RWD Life Science,China	R510-22-10
Microscope	Yuyan Instruments, China	SM-301
Surgical suture needles	NINGBO MEDICAL NEEDLE CO.,LTD, China
Thermostatic heating platform	Qingdao Juchuang Environmental Protection Group Co., Ltd, China
Ultrasound device	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Vevo 2100	Image modes includes B-Mode, Color Doppler Mode and Pulsed Wave Doppler Mode
Ultrasound gel	Parker Laboratories,United States	REF 01-08
Ultrasound transducer	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	MS 400