A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להערכת nociception בעכברים נגועים Trypanosoma evansi, באמצעות מכשיר פון פריי האלקטרוני ככלי, מדידת סף מכני של הכף האחורית ואת הקרביים.

Abstract

פתוגנזה של מחלות זיהומיות היא עדיין תחום מורכב למחקר. מהלך של מספר סימנים קליניים, כגון אלודיניה וכאב, ניתן לראות בחיות בית. עם זאת, הידע על המסלולים שלהם והטיפול הנכון דורשים ניסויים מבוקרים, רבים מהם באמצעות חיות מעבדה. מדידת שינויים בספים המכניים של הכף האחורית והקרביים היא טכניקה שימושית לצפייה בשינויים בתפיסת הכאב אצל מכרסמים. תגובת נסיגה יכולה להימדד תחילה בבדיקות בסיסיות, מה שיוצר שליטה טובה יותר בקבוצות הניסוי. ניתן לבצע בדיקות עוקבות לאחר גרימת זיהום והוספת תרופות לפרוטוקול. השימוש במכשיר פון פריי אלקטרוני הקשור לשימוש בסולם פנים כדי לצפות בשינויים דמויי כאב מאפשר הערכה פשוטה, מדויקת ועקבית להערכת אלודיניה וכאב בעכברים. לפיכך, ניסויים המשתמשים במתודולוגיה הנוכחית עבור זיהום Trypanosoma evansi מייצגים שיטה שימושית להערכת allodynia וכאב בבעלי חיים נגועים במעבדה, אשר ניתן ליישם על הטיפול הקונבנציונאלי עבור בעלי חיים.

Introduction

Trypanosoma evansi הוא סוכן אטיולוגי של המחלה המכונה "surra" או "mal-das-cadeiras" בדרום אמריקה 1,2. זה בדרך כלל משפיע על סוסים ובקר, אבל גם בעלי חיים פראיים, להיות מועבר על ידי עטלפים hematophagous, tabanids, ו stomoxes עקיצות זבוב 1,3. סורה היא מחלה מרכזית בחיות בית, אשר יכולה להיות קטלנית בהיעדר הטיפול הנכון, הצגת סימנים קליניים לא ספציפיים כגון אנמיה, אובדן תיאבון ומשקל, חולשת שרירים והפלה, אשר עשויים להשתנות בהתאם המארח ואת האזור הגיאוגרפי 2,4,5,6.

Protocol

כל הניסויים בוצעו באמצעות נקבות עכברים שוויצריות בוגרות בנות 10 שבועות (35-55 גרם). בעלי החיים שוכנו בכלובי פוליסולפון (3-5 בעלי חיים בכל כלוב) בחדר עם טמפרטורה מבוקרת (21 ± 1 מעלות צלזיוס), מחזור אור של 12 שעות / 12 שעות חושך, וצ'או מעבדה סטנדרטי ומים אד ליביטום. עשרה בעלי חיים הוקצו לכל קבוצה בכל ניסוי כדי להדגים את ההשפעות העקביות של טיפולים תרופתיים. תכנון הניסוי הוגש ואושר על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת סנטה קטרינה סטייט (CEUA) (מספר פרוטוקול: 6019201123). כל הניסויים בבעלי חיים עמדו בהנחיות ARRIVE (מחקר בבעלי חיים: דיווח על ניסויים in vivo ) ובוצעו בהתאם למדריך המועצה הלאומית למחקר לטיפול ושימוש בחיות מעבדה.

....

תוצאות

ירידה בסף המכני עקב זיהום T. evansi כפי שהוערך על ידי מכשיר פון פריי אלקטרוני הן בכפה האחורית הימנית והן ברקמות הקרביות
הניסוי נערך במשך 5 ימים, על פי נתונים קודמים הקשורים למדגם T. evansi הזמין 2. עכברים נגועים החלו להראות הבדל משמעותי בסף המכני בכפה האחורית הימני?.......

Discussion

שלב קריטי בניסויים בבעלי חיים נגועים הוא שליטה ברמות הטפילות. זנים שונים של T. evansi עשויים להתנהג בדרכים שונות בעכברים, מה שמוביל מזיהומים חריפים לכרוניים 2,4,5,6. יתר על כן, שינויים במינון הזיהום עשויים להפחית או להארי.......

Disclosures

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר.

Acknowledgements

המחברים מודים במיוחד לאוניברסיטת סנטה קטרינה על התמיכה הכספית, למעבדה לפרמקולוגיה לבעלי החיים ולחלל, ולמעבדה לביוכימיה של המופרזיטים ווקטורים על דגימת הדם השמורה בהקפאה הנגועה ב - T. evansi ששימשה בניסויים אלה.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
26 G 1/2" needle coupled to insulin syringeTKL80288090100Used to infund solutions on laboratory animals
Accessories for von Frey analgesimeterINSIGHTEFF 303Containment box with support for digital analgesimeter assessment
D-(+)-GlucoseSIGMA-ALDRICHG7021A monosaccharide which is the main source of energy in the form of ATP for living organisms
Digital analgesimeterINSIGHTvon Frey Wi-FiThe von Frey Wi-Fi is a portable device used to assess tissue sensitivity to mechanical stimuli
Gilson type 10 µL polypropylene tipCRALPLAST18261Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for hind paw allodynia assessment
Laboratory water bathBEING INSTRUMENTBW-22PUsed to heat liquid and semi-solid substances contained in appropriate recipients to specific temperature
Phosphate buffered salineSIGMA-ALDRICH806552A balanced salt solution buffer used for a variety of cell culture applications
Swiss mice (Mus musculus) from both genderUFSCSwiss WebsterLaboratory animals used for controlled experiments
Trypanosoma evansi cryiopreserved sampleUDESC-Sample used to infect all mice, ceded by the Hemoparasites and Vectors Biochemistry Laboratory
Universal type 10 µL polypropylene tipCRALPLAST18171Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for visceral allodynia assessment

References

  1. Desquesnes, M., et al. Trypanosoma evansi and surra: a review and perspectives on origin, history, distribution, taxonomy, morphology, hosts, and pathogenic effects. BioMed Research International. 2013, 194176 (2013).
  2. Cipriani, D. S., et al.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

JoVE209

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved