Электронный тест фон Фрея, связанный со шкалой гримасы мыши, для оценки аллодинии и боли у мышей, инфицированных Trypanosoma evansi

Резюме

В данной работе мы представляем протокол оценки ноцицепции у мышей, инфицированных Trypanosoma evansi, с использованием электронного аппарата фон Фрея в качестве инструмента, измеряющего механические пороги задней лапы и внутренних органов.

Аннотация

Патогенез инфекционных заболеваний до сих пор остается сложной областью для изучения. У домашних животных может наблюдаться течение нескольких клинических признаков, таких как аллодиния и боль. Тем не менее, знание их путей и правильное лечение требуют контролируемых экспериментов, многие из которых проводятся с использованием лабораторных животных. Измерение изменений механических порогов задней лапы и внутренних органов является полезным методом для наблюдения за изменениями в восприятии боли у грызунов. Реакция отмены может быть измерена сначала в базовых тестах, что обеспечивает лучший контроль экспериментальных групп. Последующие тесты могут быть проведены после индуцирования инфекции и добавления препаратов в протокол. Использование электронного аппарата фон Фрея в сочетании с использованием лицевой шкалы для наблюдения за изменениями, подобными боли, позволяет проводить простую, точную и последовательную оценку аллодинии и боли у мышей. Таким образом, эксперименты с использованием настоящей методики для лечения инфекции Trypanosoma evansi представляют собой полезный метод оценки аллодинии и боли у лабораторно инфицированных животных, который может быть применен к традиционному лечению домашних животных.

Введение

Trypanosoma evansi является этиологическим агентом заболевания, называемого в Южной Америке "surra" или "mal-das-cadeiras" ^1,2. Обычно поражает лошадей и крупный рогатый скот, а также дикую фауну, передаваясь через летучих мышей-гематофагов, табанид и укусы мух ^1,3. Сурра является основным заболеванием домашних животных, которое может привести к летальному исходу при отсутствии правильного лечения, проявляя неспецифические клинические признаки, такие как анемия, потеря аппетита и веса, мышечная слабость и аборты, которые могут варьироваться в ....

протокол

Все эксперименты проводились с использованием 10-недельных взрослых самок швейцарских мышей (35-55 г). Животных размещали в полисульфоновых клетках (3-5 животных в клетке) в помещении с контролируемой температурой (21 ± 1 °C), 12 ч светлым / 12 ч темным циклом, а также стандартным лабораторным кормом и водой ad libitum. Десять животных были распределены в каждую группу в каждом тесте, чтобы продемонстрировать последовательные эффекты медикаментозного лечения. Проект эксперимента был представлен и одобрен Этическим комитетом Государственного университета Санта-Катарины (CEUA) (номер протокола: 6019201123). Все эксперименты на животных проводились в соответстви....

Результаты

Снижение механического порога вследствие инфекции T. evansi по данным электронного аппарата фон Фрея как на правой задней лапе, так и на висцеральных тканях
Эксперимент проводился в течение 5 дней, согласно предыдущим данным, относящимся к имеющемуся образцу T. evansi

Обсуждение

Важнейшим этапом в экспериментах с участием инфицированных животных является контроль уровня паразитемии. Различные штаммы T. evansi могут вести себя у мышей по-разному, что приводит к переходу от острых к хроническим инфекциям 2,4,5,6.<.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
26 G 1/2" needle coupled to insulin syringe	TKL	80288090100	Used to infund solutions on laboratory animals
Accessories for von Frey analgesimeter	INSIGHT	EFF 303	Containment box with support for digital analgesimeter assessment
D-(+)-Glucose	SIGMA-ALDRICH	G7021	A monosaccharide which is the main source of energy in the form of ATP for living organisms
Digital analgesimeter	INSIGHT	von Frey Wi-Fi	The von Frey Wi-Fi is a portable device used to assess tissue sensitivity to mechanical stimuli
Gilson type 10 µL polypropylene tip	CRALPLAST	18261	Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for hind paw allodynia assessment
Laboratory water bath	BEING INSTRUMENT	BW-22P	Used to heat liquid and semi-solid substances contained in appropriate recipients to specific temperature
Phosphate buffered saline	SIGMA-ALDRICH	806552	A balanced salt solution buffer used for a variety of cell culture applications
Swiss mice (Mus musculus) from both gender	UFSC	Swiss Webster	Laboratory animals used for controlled experiments
Trypanosoma evansi cryiopreserved sample	UDESC	-	Sample used to infect all mice, ceded by the Hemoparasites and Vectors Biochemistry Laboratory
Universal type 10 µL polypropylene tip	CRALPLAST	18171	Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for visceral allodynia assessment