פיתוח ויישום של טירוזין פוספטאזים מווסתים רפמיצין

עבודתנו מתמקדת בפיתוח כלים המווסתים את הפעילות של טירוזין פוספטאזים. יישמנו את המערכת המווסתת רפמיצין על מספר פוספטזות והראינו שהיא מקנה ויסות ספציפי וזמני של החלבון המעניין אותנו. מטרתנו לקבוע את השינויים המורפולוגיים הנגרמים על ידי הפעלת SHIP-2 phosphatase.

כלי RapR אפשר לנו לקבוע השפעות חולפות של הפעלת פוספטאז בתאים, וקבענו השפעות ספציפיות מורכבות במורד הזרם של פוספטאז המעורב בהתפשטות תאים ובנדידה. בנוסף, קבענו התנהגויות מונחות תחום של אותו פוספטאז. זה תרם להבנתנו את מנגנוני פוספטאז בוויסות מורפודינמיקה של תאים ואיתות במורד הזרם.

כלי RapR שלנו מציע את היכולת לווסת באופן ספציפי וזמני phosphatase של עניין. לאחר הכנסתו לפוספטאז, תחום iFKBP פועל כמתג אלוסטרי אשר, ברגע שנקשר לרפמיצין, משחזר את הפעילות לפוספטאז, ומתנהג כמתג הפעלה. אנו יכולים גם להשתמש במערכת מווסתת רפמיצין כדי לשחזר מתחמי איתות.

הממצאים שלנו באמצעות כלי RapR פתחו את הדלת לקביעת ההשפעות של האינטראקטום של SHIP-2 על יכולתו לווסת את פעילות התא. מצאנו כי SHIP-2s בקשירת תחום SH2 הוא חיוני בנסיגת תאים. באמצעות כלי RapR, אנו יכולים להמשיך ולחקור אילו שותפים מחייבים עשויים להיות אחראים לתקנה זו.