עבודה זו נתמכה על ידי NSF HRD-0630456, NSF CREST תכנית וNSF הוא DMR-0934142.

1. סינתזה של α, ω-dihydroxyl פולימר [HO-PEO-P2MS-PEO-OH] <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרכיב כור פילמור כפי שמוצג באיור 1. הכור לצורך הניסוי הזה מורכב מתחתית בקבוק 100 מיליליטר סיבוב 2-צוואר שמשותף סטנדרטי להתחדד חיצוני (Chemglass), שני מתאמים לבקרת זרימה עם ברזים למיניהם (Chemglass), ואת מוט 1 טפלון ערבוב. מתאם (איור 1) שמש כדי לשמור על טוהר חנקן גבוה במיוחד (UHP) זורם דרך המערכת על מנת למנוע אוויר ולחות מלהיכנס למערכת אינרטי. המתאם B (איור 1) שמש כדי להזריק, מונומר הממס, ויוזם לתוך בקבוקון התגובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייבש 200 מ&quot;ל של Tetrahydrofuran (THF) על מתכת Na, באמצעות benzophenone כמחוון, למינימום של 6 שעות בגז חנקן יבש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייבוש 10 מ&quot;ל של 2-methoxystyrene מעל הידריד הסידן ל24 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן אמבטית טמפרטורה קרה נשמרת ב-78 ° C באמצעות תערובת נוזלית של isopropanolחנקן נוזלי nd. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 25 מ&quot;ל של THF לתוך בקבוקון תגובת פילמור (ראה תרשים 1) תחת גז חנקן ולשמור על כור בגז חנקן במשך כל פילמור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סיבוב בקבוק 100 מיליליטר מקום תחתון לslurry. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 2 מ&quot;ל (0.27 mmol / מ&quot;ל) של פתרון היוזם לתוך בקבוקון התגובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק מונומר הראשון, 2-methoxystyrene (4 מ&quot;ל) לתוך בקבוקון התגובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר להמשיך תגובה ל40 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 1 מ&quot;ל של מונומר השני, אתילן אוקסיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר להמשיך פילמור בטמפרטורת חדר במשך ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסיים את הפולימר עם HCl (6 ז) / מתנול (1/20, כרך / כרך). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטהר את הפולימר ידי החיש לhexanes ופולימר יבש בתנור ואקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפיין את הפולימר באמצעות NMR. </li></ol> 2. Functionalization של α, פולימר ω-dihydroxyl עם חומצת Caproic N-2 ,4-DNP-Ε אמין לקבל Polym הפונקציונליאה, CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בבקבוק צוואר שלושה, למקם את פולימר α, ω-dihydroxyl (0.05 mmol), חומצת caproic N-2 אמין ,4-DNP-E (0.25 mmol), DCC (0.15 mmol) וDMAP (0.005 mmol) ו להתייבש על קו ואקום במשך 4 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לזקק dichloromethane היבש (10 מ&quot;ל) לתוך הבקבוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשחרר את הוואקום תחת חנקן ומערבבי תגובה ל12 שעות בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תערובת מסנן תגובה ולהתאושש פולימר ידי החיש פעמים לhexanes ומתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יבש זרז פולימר בתנור ואקום ב 40 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את המבנה ופונקציונלי הפולימר ידי FT-IR וH 1 NMR. </li></ol> 3. הכנת פתרון CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP/SWCNT לelectrospinning <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממס% 20 w של CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP בchlorobenzene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממס% 20% 40 w וw של פוליסטירן (MW 800000) בchlorobenzene להכין שני פתרונות. פוליסטירן המולקולרי הגבוה יותר משמש לincreasדואר הסתבכות פולימר שרשרת שרשרת ולהשיג את הצמיגות האופטימלית הנדרשת לelectrospinning. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את פתרוני הפולימר שהוכנו ב3.1 ו -3.2 יחד כדי ליצור 1:1 ו01:02 יחסים של הפולימרים ולהוסיף 1% w צינורות יחידי קירות פחם (SWCNT) לתערובת ומערבבים ללילה אפילו חלוקת CNTs. </li></ol> 4. Electrospinning של פולימר-CNT Composite <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרכיב electrospinning להגדיר כפי שמוצג באיור 2. בצדו הימני של הדמות הוא מקור המתח הגבוה גלסמן. לידו עמדת תשובה עליה הפרוס סיליקון מחוברת למחשב. לשמאל הוא עוד עמדה על תשובה שהמזרק הוא רכוב ומאחוריו הוא המנורה להמחשת ההליך תוך כדי התקדמות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מזרק, למשוך כמות קטנה מתערובת CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP/polystyrene/SWCNT (כ 1 מ&quot;ל) ולעלות את המזרק על הדוכן בתשובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פרוסות סיליקון היא הראד מול המזרק היטב במרחק של 10 סנטימטרים, וקליפ הקרקע של מקור המתח הגבוה קשור אליו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף קליפ נושא המתח הגבוה שיש להחיל את המחט על המזרק, לוחץ על המתג קצת (להשעות טיפה בקצה המחט) ובשלב זה, electrospinning מוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוח על מקור המתח הגבוה ולהתאים מטר מתח עד 10 קילו וולט. בהתאם לאופי של הפולימרים במרוכבים, מתח גבוה יותר עשוי להיות נדרש, במיוחד אם nanofibers תחת מאה ננומטרים בקוטר הם רצוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רקיק נתקאת סיליקון ומקום בdessicator הלילה להתייבש לחלוטין. </li></ol> 5. אפיון Nanofibers <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדמיה ראשונית של nanofibers נעשתה במיקרוסקופ אופטי להתבונן הראייה הכוללת של הסיבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנצל מיקרוסקופ אלקטרוני סורק להתבונן פרטים עדינים כמו מורפולוגיה קוטר גודל,, ממוצע נקבובי, וכו &#39; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להובילמתוך הדמיה נוספת עם מיקרוסקופ כוח אטומי כדי לבחון טופוגרפית 3-D של סיבים, וכו &#39; </li></ol> 6. ספציפי עקידת Nanofibers עם Anti-DNP IgE חלבון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את הפתרון של 4 מיקרוגרם / הליטר מסומן fluorescently, FITC-IgE (E-fluorescein Isothio cyanate-אימונוגלובולין) בפתרון PBS-BSA (פוספט Buffered אלבומין מלוח שור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח חתיכה קטנה של פרוסות סיליקון שביש nanofibers על coverslip גם מאטק. דגירת nanofibers בפתרון זה לשעה אחת. דגירה מתבצעת על ידי pipetting בעדינות החוצה, 10 פתרון IgE ul גבי פרוסות סיליקון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר דגירה, להסיר מאוגד IgE על ידי שטיפת מדגם שלוש פעמים עם פתרון חיץ PBS-BSA. פתרון PBS הוא לוותר בעדינות על הקיר של מנת מאטק, על מנת להימנע מגמירת החיץ ישירות על nanofibers. מערבולת בעדינות את הצלחת ביד, להפצת פתרון חיץ על nanofibers. מוציא בזהירות את החיץ עם פיפטה ומחדשכבול 2 זה פעמים נוספות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשליטה, דגירת nanofibers בIgG כותרת fluorescently (לא ספציפי לDNP) באותם תנאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו את הסיבים הכרוכים עם confocal מיקרוסקופ כדי להתבונן מחייב עם IgE. למחקר שלנו, את המיקרוסקופ השתמש היה היקה confocal TCS SP2 עם 63x עדשה. </li></ol> 7. התנהגות נוכחית מתח של Nanofibers <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> חיבור שני positioners מייקרו למקור זרם נמוך מאוד כמו sourcemeter הרגיש Keithley 6430. להגדיר לקביעת התנהגות המתח הנוכחית מוצג באיור 3. נתון זה מראה את תחנת הבדיקה משמשת כדי לקבוע את מאפייני IV הראשוניים של nanofibers. הוא מורכב של באוש ומיקרוסקופ MicroZoom Lomb, שלב צ&#39;אק אבק, וארבע Micropositioners משמש בחיטוט. בפינה הימנית העליונה הוא Agilent 34405A הדיגיטלי המודד משמש במדידת המתח ומתחת לזה הוא<html> Keithley מד מקור מרחוק 6430 תת Femtoamp משמש למקור לזרמים הנמוכים שהיו קלט לתוך הסיבים. </li><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> הר זרועות הבדיקה של מייקר positioners על מחצלת הסיבים משני צדי מתרס עם טיפים הנוגעים בסיבים. </li><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> חיבור שני positioners מייקרו עוד למודד דיגיטלי, עולה בבדיקה בזרועות בין שני האחרים ולהצניח את הטיפים על מחצלת הסיבים. ודא כי ארבעה טיפים הם כקוליניאריות ככל האפשר. </li><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> קלט כמויות המשתנות של נוכחי מKeithley (בדרך כלל בטווח nanoamps). </li><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את מפל המתח על פני העצות החיצוניות, לכל גודל הנוכחי מקורו. </li><li class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> התוויית ערכים אלה מצביעים על סוג התקן המחצלת מתנהגת כמו הסיבים. </li></ol> 8. נציג תוצאות פולימרים פונקציונליים &quot;&gt; השיטה לסינתזה של α, ω דו [2,4-dinitrophenyl caproic] [פולי (אתילן אוקסיד)-B-פולי (2-methoxystyrene)-B-פולי (אתילן אוקסיד)] (-CDNP-PEO P2MS-PEO-CDNP) מוצג באיור 4. 1 המבנה של הפולימר הפונקציונלי אושר על ידי FT-IR (איור 5) וH 500 MHz ספקטרוסקופית NMR 1 (איור 6). FT-IR מראה את היעלמותו המוחלטת של -OH קליטה רחבה כ -3,500 סנטימטר -1 מצביע functionalization כמותית עם קבוצת CDNP. זה גם אושר על ידי ספקטרום NMR מוצג באיור 6. שימוש בשילוב של הפסגות בספקטרום NMR, נקבע כי CDNP-PEO פולימרי P2MS-PEO-CDNP הם פונקציונליים כמותית. Nanofibers באיור 7, מחצלת של nanofibers המוליך המתקבל על ידי electrospinning CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / קלקר / SWCNT מchlorobenzene היא shעצמו. תמונות confocal מתקבלות הראו כי החלבון IgE נקשר עם DNP על פני הסיב. 3 זוהי אינדיקציה הספציפית של מחייב של פולימרי DNP electrospun כלפי נוגדני IgE. עוצמת האור היא אינדיקטור של הנוכחות של IgE על nanofibers כחלבון מתויג fluorescently. האיור 8 א הוא תמונת מיקרוסקופ (מיקרוסקופ כוח אטומי) של אחד nanofibers את המתקבל על ידי תהליך זה ו8b איור מציג את הממד של nanofiber המסוים הזה הוא סביב 150 ננומטר בקוטר. על ידי תהליך זה סיבים בין 100-700 ננומטר מתקבלים. בשלב הנוכחי זה מאתגר להכין סיבים עם ממד מסוים. זה עולה בקנה אחד עם מה שנצפה על ידי קבוצות אחרות. 4 איור 9 מראה SEM תמונות של CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / קלקר / SWCNT nanofibers והקוטר של nanofibers היו בין 200 ננומטר ל 300 ננומטר. ישנם שלושה SEM תמונות של nanofibers מוצג בהגדלה שונה. המחקר של השלוש התמונות מציג את המורפולוגיות של הסיבים הן ליניארי וחרוזים. המטרה הכללית היא להכין סיבים שהם בעיקר ליניארי. איור 10 מציג את העלילה הרביעית של מחצלות של nanofibers הוכן מCDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / קלקר / SWCNT. העלילה מציגה את התנהגותו של נגד (ohmic). כאשר אנטיגן קשור לnanofibers, אנו מצפים לראות שינוי בהתנהגות IV של סיבי שטיח שהשינוי הזה בהתנגדות הוא מאפיין המצביע על כך שהסיבים הפונקציונליים יש פוטנציאל יישום כרכיב הפעיל בחיישנים לזיהוי מולקולה בודדה . <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig1.jpg" /> איור 1. כור פלמור לסינתזת פולימר α, ω-dihydroxyl. א) נקודת ההזרקה לגז חנקן UHP זרימה. ב) נקודת הזרקה לממס, מונומר, ויוזם. ג) תגובת כלי. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig2.jpg" /> איור 2. הגדרה משמשת לelectrospinning באמצעות מקור מתח גבוה גלסמן. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig3.jpg" /> איור 3. הגדרה המשמשת למדידת חלקות IV באמצעות מרחוק Sourcemeter תת femtoamp (Keithley). <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig4.jpg" /> איור 4).. גישה סינטתית להכנת OH-PEO-P2MS-PEO-OH פולימרים. B) Functionalization של α, ω-dihydroxy [פולי (ethyleneoxide)-B-פולי (2-methoxystyrene)-B-פולי (ethyleneoxide)]. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig5.jpg" /> איור 5. ספקטרום FT-IR של () OH-PEO-P2MS-PEO-OH, מבשר CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP ו (ב) CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP. <img alt="איור 6"src = &quot;/ files/ftp_upload/4135/4135fig6.jpg&quot; /&gt; איור 6. 500 MHz הפרוטון NMR של CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP. <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig7.jpg" /> איור 7). תמונת עקדת FITC-IgE עם CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP electrospun סיבים מchlorobenzene. B) תמונת Confocal מיקרוסקופ של השליטה (nanofibers עם IgG). <img alt="איור 8" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig8.jpg" /> איור 8). תמונת מיקרוסקופ כוח אטומי CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP electrospun סיבים מchlorobenzene ו-B) ממד כגון: פרופיל AFM של סיב אחד שמוצג באיור 5 א. <img alt="איור 9" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig9.jpg" /> איור 9. תמונות SEM של CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / קלקר / SWCNT nanofibers. <img alt="איור 10" src="/files/ftp_upload/4135/4135fig10.jpg"/&gt; איור 10. העלילה הרביעית של מחצלות של nanofibers הוכן מCDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / קלקר / SWCNT.

<ol>
	<li>Sannigrahi, B., Sil, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+Characterization+of+&#945;,&#969;-bi[2,4-dinitrophenyl+(DNP)]+poly(2-methoxystyrene)+Functional+Polymers.+Preliminary+Evaluation+of+the+Interaction+of+the+Functional+Polymers+with+RBL+Mast+Cells.">Synthesis and Characterization of &#945;,&#969;-bi[2,4-dinitrophenyl (DNP)] poly(2-methoxystyrene) Functional Polymers. Preliminary Evaluation of the Interaction of the Functional Polymers with RBL Mast Cells.</a> Journal of Macromolecular Science, Part A. 45, 664-671 (2008).</li><li>Gordon, K., Sannigrahi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Optically+Active+Helical+Poly(2-methoxystyrene).+Enhancement+of+HeLa+and+Osteoblast+Cell+Growth+on+Optically+Active+Helical+Poly(2-methoxystyrene)+Surfaces.">Synthesis of Optically Active Helical Poly(2-methoxystyrene). Enhancement of HeLa and Osteoblast Cell Growth on Optically Active Helical Poly(2-methoxystyrene) Surfaces.</a> Journal of Biomaterials Science. 2, 2055-2072 (2009).</li><li>Baird, E. J., Holowka, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Effective+Poly(Ethylene+Glycol)+Architectures+for+Specific+Inhibition+of+Immune+Receptor+Activation.">Highly Effective Poly(Ethylene Glycol) Architectures for Specific Inhibition of Immune Receptor Activation.</a> Biochemistry. 2, 12739-12748 (2003).</li><li>Ramakrisna, S., Fugihara, K., Lim, W. -. E., Ma, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introductions to Electrospinning and Nanofibers. , (2005).</li><li>Kameoka, J., Craighead, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+Oriented+Polymeric+Nanofibers+on+Planar+Surfaces+by+Electrospinning.">Fabrication of Oriented Polymeric Nanofibers on Planar Surfaces by Electrospinning.</a> Applied Physics Letters. 83, 371-3773 (2003).</li><li>Ramakrishna, S., Lala, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer+Nanofibers+for+Biosensor+Applications.">Polymer Nanofibers for Biosensor Applications.</a> Topics in Applied Physics. 109, 377-392 (2007).</li><li>Reuven, D., Sil, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Archetypical+Conductive+Polymer+Structure+for+Specific+Interaction+with+Proteins.">Archetypical Conductive Polymer Structure for Specific Interaction with Proteins.</a> Journal of Macromolecular Science Part A: Pure and Applied Chemistry. , (2012).</li><li>Ogunro, O., Karunwi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chiral+Asymmetry+of+Helical+Polymer+Nanowire.">Chiral Asymmetry of Helical Polymer Nanowire.</a> The Journal of Physical Chemistry Letters. 1, 704-707 (2010).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

בדו&quot;ח זה, הציג גישה חזקה להכנת nanofibers biofunctional. Nanofibers את מעוטרים לקבוצה פונקציונלית שהוא ספציפי למודל חלבון. ההליך והגישה דווחה בתקשורת זו הוא כללי בטבע ויכול לשמש להכנת nanofibers מעוטר בכל קבוצה פונקציונלית רצויה. פילמור החיים anionic הוא שיטה רבה עצמה כדי לסנתז מבני פולימר מבוקרים מחוברי קוולנטית לכל מספר של קבוצות מעניינות תפקודיות או פונקציונליות שהם ספציפיים לסמנים מסוימים של ריבית. פילמור החיים anionic הוא מבוסס היטב, למונומר 2 methoxystyrene. 2 Electrospinning הוא טכניקה תכליתית שבממדי הסיבים ניתן לשלוט בקלות על ידי שינוי המתח וגם משתנים ריכוז של הפתרון להיות electrospun. 5 nanofibers להראות IV התנגדות התנהגות ובכך הם מבטיחים לתפקד כרכיבים פעילים בbiosensors כלומר הגישה דיווחה טומן בחובו הבטחה לפיתוח מכשיר איתור סמן ביולוגי. 6,7 פילמור של מונומר הראשון, 2-methoxystyrene, הוא 100% הושלם בתוך 100% כלומר 40 דקות של מונומר מומר לפולימר ומונומר פילמור השני הוא איטי הדורש 2 ימים פלמר. כלומר, מונומר 1 polymerizes מהר יותר ממונומר 2. אין מונומר שאינו בשימוש אחד, אבל הסוף של 2 ימים, יש כמה מונומר שאינו בשימוש, אבל זה לא יתרום לpolydispersity. הכנו homopolymers של מונומר 1 כלומר פולי (2-methoxystyrene) ופ&quot;ד של פולימר אלה הם סביב 1.2 וגם קופולימרים לחסום דיווחו כאן הוא גם 1.2. למיטב ידיעתנו, אף מחקר לא בוצע שנראה את ההשפעה של PDI בממד של סיבי electrospun אבל זה בדרך כלל צפוי שPDI הנמוך תורם למוצר מעובד באיכות טובה יותר בגלל הסיבות של גהסתבכויות Hain שרשרת. אנחנו השתמשנו SWCNTs בגלל העבודה הקודמת שמראה שpoly2-methoxystyrene יעיל בגלישה סביב Nanotube הפחם ולשבור את ההצטברות של SWCNT. 8 אנו מאמינים שזה קשור לגודל מסוים של SWCNTs. לבסוף, 1% תוכן SWCNT בתוצאות בסיבי סיבים שהם מספיק electroactive למחקר שלנו.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td></tr><tr><td> מתכת נתרן </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 282065 </td></tr><tr><td> Benzophenone </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 239852 </td></tr><tr><td> 2-methoxystyrene </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 563064 </td></tr><tr><td> Tetrahydrofuran </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 178810 </td></tr><tr><td> Chlorobenzene </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 319996 </td></tr><tr><td> CNTs חומה היחיד </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 704113 </td></tr><tr><td> פוליסטירן </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 81416 </td></tr><tr><td> פרוסות סיליקון </td><td> הסיליקון Quest טורים </td><td> 720200 </td></tr><tr><td> Zeiss FESEM </td><td> Carl Zeiss בע&quot;מ </td><td> Ultra 60 </td></tr><tr><td> Probestation עם Bausch &amp; Lomb MicroZoom השני מיקרוסקופ ביצועים הגבוהים </td><td> באוש וLomb </td><td></td></tr><tr><td> מערכת סריקת יקה Confocal </td><td> Microsystems היקה </td><td> TCS SP2 </td></tr><tr><td> Sourcemeter מרחוק תת femtoamp </td><td> Keithley מכשירים </td><td> 6430 </td></tr><tr><td> Autoranging דיגיטלי מודד </td><td> Keithley מכשירים </td><td> 175A </td></tr><tr><td> משאבת מזרק </td><td> Chemyx בע&quot;מ </td><td> היתוך 200 </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ אופטי Zeiss </td><td> Carl Zeiss בע&quot;מ </td><td> Zeiss / Axiotech </td></tr></tbody></table>

procedure for fabricating biofunctional nanofibers

Electrospinning הוא שיטת עיבוד יעילה להכנת nanofibers מעוטר בקבוצות פונקציונליות. Nanofibers מעוטר בקבוצות פונקציונליות עשוי להיות מנוצל כדי ללמוד אינטראקציות חומר סמן ביולוגי כלומר מעשה כbiosensors עם פוטנציאל כמו גלאי מולקולה בודדות. פתחנו גישה יעילה להכנת פולימרים פונקציונליים שבו יש את היכולת הפונקציונלית של במיוחד מחייב עם מודל חלבון. במערכת המודל שלנו, הקבוצה הפונקציונלית היא 2,4-dinitrophenyl (DNP) והחלבון הוא אנטי DNP IgE (אימונוגלובולין E). הפולימרים פונקציונליים, α, ω דו [2,4-dinitrophenyl caproic] [פולי (אתילן אוקסיד)-B-פולי (2-methoxystyrene)-B-פולי (אתילן אוקסיד)] (-CDNP-PEO-P2MS-PEO CDNP), הוא הוכן על ידי החיים פילמור anionic. יוזם difunctional מנוצל בפילמור הוכן על ידי תגובת אלקטרון העברת α-methylstyrene ומתכת אשלגן (מראה). מונומר 2-methoxystyrene נוסףראשון שהיוזם, ואחריו על ידי התוספת של מונומר השני, אתילן אוקסיד, ולבסוף הפולימר החי הופסק על ידי מתנול. Α, ω-dihydroxyl פולימר [HO-PEO-P2MS-PEO-OH] היה מגיב עם חומצת N-2 ,4-DNP-∈ אמין caproic, על ידי צימוד DCC, וכתוצאה מכך ההיווצרות של α, ω דו [ 2,4-dinitrophenylcaproic] [פולי (ethyleneoxide)-B-פולי (2-methoxystyrene)-B-פולי (אתילן אוקסיד)] (CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP). הפולימרים התאפיינו FT-IR, NMR H 1 וג&#39;ל חלחול כרומטוגרפיה (GPC). התפלגויות המשקל המולקולריות של הפולימרים היו צרות (1.1-1.2) ופולימרים בעלי משקל מולקולרי גדול מ 50,000 שמשו במחקר זה. הפולימרים היו צהובות ואבקות מסיסות בtetrahydrofuran. מסיסים במים CDNP-PEO-P2MS-PEO-CDNP / DMEG (גליקול dimethoxyethylene) מורכבים נקשר ומשיגים מחייב מצב יציב עם הפתרון IgE בתוך כמה שניות. משקל מולקולרי גבוה יותר (כלומר מסיס מים כ -50,000) CDNפולימרי P-PEO-P2MS-PEO-CDNP, המכיל פחמן קיר אחד% 1 (SWCNT) עובדו לnanofibers האלקטרו (100 ננומטר ל 500 ננומטר קוטר) על מצע סיליקון. Fluorescence ספקטרוסקופיה מראה כי אנטי DNP IgE האינטראקציה עם nanofibers באמצעות קשירה עם הקבוצות הפונקציונליות DNP לקשט את הסיבים. תצפיות אלו מצביעות על כך שnanofibers כראוי פונקציונלי לקיים הבטחה לפיתוח מכשיר איתור סמן ביולוגי.

Watch this Scientific Journal Video about Procedure for Fabricating Biofunctional Nanofibers at JoVE.com

Procedure for Fabricating Biofunctional Nanofibers

גישה יעילה להכנת nanofibers מעוטר בקבוצות המסוגלים אינטראקציה ספציפית עם חלבונים תפקודיות מתוארת. הגישה דורשת 1 הכנת פולימרים פונקציונליים עם הקבוצה הפונקציונלית המתאימה. הפולימרים הפונקציונליים הם מפוברקים לnanofibers ידי electrospinning. היעילות של הכריכה של nanofibers עם חלבון ונלמדת על ידי מיקרוסקופיה confocal.

הליך לבודת Nanofibers Biofunctional

Electrospinning is an effective processing method for preparing nanofibers decorated with functional groups. Nanofibers decorated with functional groups ...

procedure-for-fabricating-biofunctional-nanofibers

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Biology

12.5K Views.  Clark Atlanta University. גישה יעילה להכנת nanofibers מעוטר בקבוצות המסוגלים אינטראקציה ספציפית עם חלבונים תפקודיות מתוארת. הגישה דורשת 1 הכנת פולימרים פונקציונליים עם הקבוצה הפונקציונלית המתאימה. הפולימרים הפונקציונליים הם מפוברקים לnanofibers ידי electrospinning. היעילות של הכריכה של nanofibers עם חלבון ...

Video: Procedure for Fabricating Biofunctional Nanofibers

A Craniotomy Surgery Procedure for Chronic Brain Imaging

Imaging techniques are becoming increasingly important in the study brain function. Among them, two-photon laser scanning microscopy has emerged as an extremely useful method, because it allows the study of the live intact brain. With appropriate preparations, this technique allows the observation of the same cortical area chronically, from minutes to months. In this video, we show a preparation for chronic in vivo imaging of the brain using two-photon microscopy. This technique was initially pioneered by Dr. Karel Svoboda, who is now a Howard Hughes Medical Institute Investigator at Janelia Farm. Preparations like the one shown here can be used for imaging of neocortical structure (e.g., dendritic and axonal dynamics),  to record neuronal activity using calcium-sensitive dyes, to image cortical blood flow dynamics, or for intrinsic optical imaging studies. Deep imaging of the neocortex is possible with optimal cranial window surgeries. Operating under the most sterile conditions possible to avoid infections, together with using extreme care to do not damage the dura mater during the surgery, will result in successful and long-lasting glass-covered cranial windows.


This video and protocol demonstrate how to implant a glass-covered cranial window in rodents. These preparations can be used for chronic in vivo two-photon imaging of the neocortex over time scales of months. It may also be used for other types of imaging, including optical intrinsic signal imaging.

כירורגיה Craniotomy נוהל הדמיה מוחית כרונית

Imaging techniques are becoming increasingly important in the study brain function. Among them, two-photon laser scanning microscopy has emerged as an ...

Murine Renal Transplantation Procedure

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell et al over 30 years ago (1) and refined by Zhang et al years later (2), few people in the world have mastered this procedure. In our laboratory we have successfully performed 1200 orthotopic kidney transplantations with &gt; 90% survival rate. The key points for success include stringent control of reperfusion injury, bleeding and thrombosis, both during the procedure and post-transplantation, and use of 10-0 instead of 11-0 suture for anastomoses.
Post-operative care and treatment of the recipient is extremely important to transplant success and evaluation. All renal graft recipients receive antibiotics in the form of an injection of penicillin immediately post-transplant and sulfatrim in the drinking water continually. Overall animal health is evaluated daily and whole blood creatinine analyses are performed routinely with a portable I-STAT machine to assess graft function.

Renal transplantation in mice is a technically challenging procedure that requires careful post-operative care and treatment for success.

Murine נוהל השתלת כליה

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure

Gua Sha is a traditional Chinese folk therapy that employs skin scraping to cause subcutaneous microvascular blood extravasation and bruises. The protocol for bioluminescent optical imaging of HO-1-luciferase transgenic mice reported in this manuscript provides a rapid in vivo assay of the upregulation of the heme oxygenase-1 (HO-1) gene expression in response to the Gua Sha procedure. HO-1 has long been known to provide cytoprotection against oxidative stress. The upregulation of HO-1, assessed by the bioluminescence output, is thought to represent an antioxidative response to circulating hemoglobin products released by Gua Sha. Gua Sha was administered by repeated strokes of a smooth spoon edge over lubricated skin on the back or other targeted body part of the transgenic mouse until petechiae (splinter hemorrhages) or ecchymosis (bruises) indicative of extravasation of blood from subcutaneous capillaries was observed. After Gua Sha, bioluminescence imaging sessions were carried out daily for several days to follow the dynamics of HO-1 expression in multiple internal organs.

Gua Sha, traditional Chinese therapeutic skin scraping, causes subcutaneous microvascular blood extravasation. We report a protocol of bioluminescence imaging of HO-1-luciferase transgenic mice to demonstrate that Gua Sha upregulates heme oxygenase-1 (HO-1) in multiple organs.

הדמיה של פליטת אור upregulation הרן-1 Oxygenase בנוהל גואה שא

Gua Sha is a traditional Chinese folk therapy that employs skin scraping to cause subcutaneous microvascular blood extravasation and bruises. The protocol ...

Mammary Epithelial Transplant Procedure

This article describes and compares the fat pad clearance procedure developed by DeOme KB et al.1 and the sparing procedure developed by Brill B et al.2, followed by the mammary epithelial transplant procedure. The mammary transplant procedure is widely used by mammary biologists because it takes advantage of the fact that significant development of the mammary epithelium doesn't occur until after puberty. At 3 weeks of age, growth of the mammary epithelial tree is confined to the vicinity of the nipple and the fat pad is largely devoid of mammary epithelium, but by 7 weeks of age the epithelial ductal tree extends throughout the entire fat pad. Therefore, if this small portion of the fat pad containing epithelium, the region between the nipple and the lymph node, is removed at 3 weeks of age, the endogenous epithelium will never populate the mammary fat pad and the fat pad is described as "cleared". At this time, mammary epithelium from another source can be transplanted in the cleared fat pad where it has the potential to extend mammary ductal trees through out the fat pad. This procedure has been utilized in many experimental models including the examination of tumor phenotype in transgenic mammary epithelial tissue without the confounding effects of genotype on the entire animal3, in the identification of mammary stem cells by transplanting cells in limited dilution4,5, determining if hyperplastic nodules proceed to mammary tumors6, and to assess the effect of prior hormone exposure on the behavior of the mammary epithelium7,8.
Three week old host mice are anesthetized, cleaned and restrained on a surgical stage. A mid-sagittal incision is made through the skin, but not the peritoneum, extending from the pubis to the sternum. Oblique cuts are made through the skin from the mid-sagittal incision across the pelvis toward each leg. The skin is pulled away from the peritoneum to expose the 4th inguinal mammary gland. The fat pad is cleared by removing the fat pad tissue anterior to the lymph node. Epithelium fragments or epithelial cells are transplanted into the remaining cleared fat pad and the mouse is closed.

This article demonstrates the procedure developed by DeOme KB et al. (1959) and the sparing procedure developed by Brill B et al. (2008) for clearing the 4th inguinal mammary fat pad of a pubescent mouse in preparation for transplantation of mammary fragments, mammary epithelial cells, or mammary tumor cells.

החלב להשתלות אפיתל נוהל

This article describes and compares the fat pad clearance procedure developed by DeOme KB et al.1 and the sparing procedure developed by Brill B et al.2, ...

A Chemical Screening Procedure for Glucocorticoid Signaling with a Zebrafish Larva Luciferase Reporter System

Glucocorticoid stress hormones and their artificial derivatives are widely used drugs to treat inflammation, but long-term treatment with glucocorticoids can lead to severe side effects. Test systems are needed to search for novel compounds influencing glucocorticoid signaling in vivo or to determine unwanted effects of compounds on the glucocorticoid signaling pathway. We have established a transgenic zebrafish assay which allows the measurement of glucocorticoid signaling activity in vivo and in real-time, the GRIZLY assay (Glucocorticoid Responsive In vivo Zebrafish Luciferase activitY). The luciferase-based assay detects effects on glucocorticoid signaling with high sensitivity and specificity, including effects by compounds that require metabolization or affect endogenous glucocorticoid production. We present here a detailed protocol for conducting chemical screens with this assay. We describe data acquisition, normalization, and analysis, placing a focus on quality control and data visualization. The assay provides a simple, time-resolved, and quantitative readout. It can be operated as a stand-alone platform, but is also easily integrated into high-throughput screening workflows. It furthermore allows for many applications beyond chemical screening, such as environmental monitoring of endocrine disruptors or stress research.

We describe the procedure and data analysis of a chemical screening system for glucocorticoid stress hormone signaling using zebrafish larvae: the Glucocorticoid Responsive In vivo Zebrafish Luciferase activitY (GRIZLY) assay. The assay sensitively and specifically detects effects on glucocorticoid signaling by compounds that require metabolization or affect endogenous glucocorticoid production.

הליך מיון כימי לGlucocorticoid איתות עם מערכת כתב דג הזברה הזחל בלוציפראז

Glucocorticoid stress hormones and their artificial derivatives are widely used drugs to treat inflammation, but long-term treatment with glucocorticoids ...

Isolation of Human Hepatocytes by a Two-step Collagenase Perfusion Procedure

The liver, an organ with an exceptional regeneration capacity, carries out a wide range of functions, such as detoxification, metabolism and homeostasis. As such, hepatocytes are an important model for a large variety of research questions. In particular, the use of human hepatocytes is especially important in the fields of pharmacokinetics, toxicology, liver regeneration and translational research. Thus, this method presents a modified version of a two-step collagenase perfusion procedure to isolate hepatocytes as described by Seglen 1.
Previously, hepatocytes have been isolated by mechanical methods. However, enzymatic methods have been shown to be superior as hepatocytes retain their structural integrity and function after isolation. This method presented here adapts the method designed previously for rat livers to human liver pieces and results in a large yield of hepatocytes with a viability of 77&plusmn;10%. The main difference in this procedure is the process of cannulization of the blood vessels. Further, the method described here can also be applied to livers from other species with comparable liver or blood vessel sizes.

A modified two-step collagenase perfusion procedure for isolation of human hepatocytes is described. This method can also be applied to other mammalian livers. The isolated hepatocytes are available in high yield and viability, making them a suitable model for scientific research in areas such as liver regeneration, pharmacokinetics and toxicology.

בידוד של hepatocytes האנושי על ידי שני שלבים Collagenase זלוף נוהל

The liver, an organ with an exceptional regeneration capacity, carries out a wide range of functions, such as detoxification, metabolism and homeostasis. ...

Procedure to Evaluate the Efficiency of Flocculants for the Removal of Dispersed Particles from Plant Extracts

Plants are important to humans not only because they provide commodities such as food, feed and raw materials, but increasingly because they can be used as manufacturing platforms for added-value products such as biopharmaceuticals. In both cases, liquid plant extracts may need to be clarified to remove particulates. Optimal clarification reduces the costs of filtration and centrifugation by increasing capacity and longevity. This can be achieved by introducing charged polymers known as flocculants, which cross-link dispersed particles to facilitate solid-liquid separation. There are no mechanistic flocculation models for complex mixtures such as plant extracts so empirical models are used instead. Here a design-of-experiments procedure is described that allows the rapid screening of different flocculants, optimizing the clarification of plant extracts and significantly reducing turbidity. The resulting predictive models allow the identification of robust process conditions and sets of polymers with complementary properties, e.g. effective flocculation in extracts with specific conductivities. The results presented for tobacco leaf extracts can easily be adapted to other plant species or tissues and will thus facilitate the development of more cost-effective downstream processes for commodities and plant-derived pharmaceuticals.

The design-of-experiments procedure presented here allows the evaluation of different flocculants in terms of their ability to aggregate dispersed particles in plant extracts, thus reducing turbidity and the costs of downstream processing.

נוהל כדי להעריך את היעילות של flocculants להרחקת מפוזרי חלקיקים מן תמציות צמחים

Plants are important to humans not only because they provide commodities such as food, feed and raw materials, but increasingly because they can be used ...

Procedure and Key Optimization Strategies for an Automated Capillary Electrophoretic-based Immunoassay Method

New technologies that utilize capillary-based immunoassays promise faster and more quantitative protein assessment compared to traditional immunoassays. However, similar to other antibody-based protein assays, optimization of capillary-based immunoassay parameters, such as protein concentration, antibody dilution, and exposure time is an important prerequisite to the generation of meaningful and reliable data. Measurements must fall within the linear range of the assay where changes in signal are directly proportional to changes in lysate concentration. The process of choosing appropriate lysate concentrations, antibody dilutions, and exposure times in the human bronchial epithelial cell line, BEAS-2B, is demonstrated here. Assay linearity is shown over a range of whole cell extract protein concentrations with p53 and &#945;-tubulin antibodies. An example of signal burnout is seen at the highest concentrations with long exposure times, and an &#945;-tubulin antibody dilution curve is shown demonstrating saturation. In addition, example experimental results are reported for doxorubicin-treated cells using optimized parameters.

A capillary-based immunoassay using a commercial platform to measure target proteins from total protein preparations is demonstrated. In addition, assay parameters of exposure time, protein concentration, and antibody dilution are optimized for a cell culture model system.

הליך ואסטרטגיות אופטימיזציה מפתח שיטה אוטומטית נימי מתכלה מבוסס על Electrophoretic

New technologies that utilize capillary-based immunoassays promise faster and more quantitative protein assessment compared to traditional immunoassays. ...

A Semiautomated ChIP-Seq Procedure for Large-scale Epigenetic Studies

Chromatin immunoprecipitation followed by sequencing (ChIP-Seq) is a powerful and widely used approach to profile chromatin DNA associated with specific histone modifications, such as H3K27ac, to help identify cis-regulatory DNA elements. The manual process to complete a ChIP-Seq is labor intensive, technically challenging, and often requires large-cell numbers (&#62;100,000 cells). The method described here helps to overcome those challenges. A complete semiautomated, microscaled H3K27ac ChIP-Seq procedure including cell fixation, chromatin shearing, immunoprecipitation, and sequencing library preparation, for batch of 48 samples for cell number inputs less than 100,000 cells is described in detail. The semiautonomous platform reduces technical variability, improves signal-to-noise ratios, and drastically reduces labor. The system can thereby reduce costs by allowing for reduced reaction volumes, limiting the number of expensive reagents such as enzymes, magnetic beads, antibodies, and hands-on time required. These improvements to the ChIP-Seq method suit perfectly for large-scale epigenetic studies of clinical samples with limited cell numbers in a highly reproducible manner.

This paper describes a semiautomated, microscaled ChIP-Seq protocol of DNA regions associated with a specific histone modification (H3K27ac) using a ChIP liquid-handler platform, followed by library preparation using tagmentation. The procedure includes control assessment for quality and quantity purposes and can be adopted to other histone modifications or transcription factors.

הליך ChIP-Seq חצי-אטומי למחקרים אפיגנטיים בקנה מידה גדול

Chromatin immunoprecipitation followed by sequencing (ChIP-Seq) is a powerful and widely used approach to profile chromatin DNA associated with specific ...

שיפור הישרדות ופיתוח מרמוסטים בגישה של גידול ידיים

Hand-Rearing Method for Infant Marmosets

The common marmoset (Callithrix jacchus) is a small and highly social New World monkey with high reproduction rates, which has been proven to be a compelling non-human primate model for biomedical and neuroscience research. Some females give birth to triplets; however, the parents cannot raise all of them. To save these infants, we have developed a hand-rearing method for raising newborn marmosets. In this protocol, we describe the formula of the food, the time for feeding, the configuration of the temperature and humidity, as well as the adaptation of the hand-reared infants to the colony environment. This hand-rearing method significantly increases the survival rate of marmoset infants (without hand-rearing: 45%; with hand-rearing: 86%) and provides the opportunity to study the development of marmoset infants with similar genetic backgrounds raised in different postnatal environments. As the method is practical and easy to use, we anticipate that it could also be applied to other labs working with common marmosets.

מחבר זרקור: Marmoset Research - היקף ואתגרים 

Here, we describe a hand-rearing method for raising infant marmosets in an animal incubator. This method greatly increases the survival rate of marmoset infants, which provides the opportunity to study the development of marmoset infants with similar genetic backgrounds raised in different postnatal environments.