המחברים מודים לתרומה האמנותית של Hyewon קופר.

<ol>
	<li>Whitear, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chordotonal+organs+in+Crustacea.">Chordotonal organs in Crustacea.</a> Nature. 187, 522-523 (1038).</li><li>Alexandrowicz, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+comparative+anatomy+of+leg+propriocetors+in+some+decapod+Crustacea.">The comparative anatomy of leg propriocetors in some decapod Crustacea.</a> J. Mar. Biol. Assoc. U.K. 52 (3), 605-634 (1972).</li><li>Hartman, H. B., Boettiger, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+functional+organization+of+the+propys-dactylus+organ+in+Cancer+irroratus+Say.">The functional organization of the propys-dactylus organ in Cancer irroratus Say.</a> Comp. Biochem. Physiol. 22, 651-663 (1967).</li><li>Cooper, R. L., Hartman, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+the+bender+apodeme+tension+receptors+in+the+Dungeness+crab,+Cancer+magister.">Responses of the bender apodeme tension receptors in the Dungeness crab, Cancer magister.</a> Comp. Biochem. Physiol. A Physiol. 109 (2), 479-486 (1994).</li><li>Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+proprioceptive+neurons+on+chordotonal+organs+in+the+crab,+Cancer+magister.">Mapping proprioceptive neurons on chordotonal organs in the crab, Cancer magister.</a> Crustaceana. 81 (4), 447-475 (2008).</li><li>Burke, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+organ+for+proprioception+and+vibration+sense+in+Carcinus+maenas.">An organ for proprioception and vibration sense in Carcinus maenas.</a> J. Exp. Biol. 31, 127-138 (1953).</li><li>Hill, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> First and Last Experiments in Muscle Mechanics. , (1970).</li><li>Stuart, D. G., Mosher, C. C., Gerlach, R. L., Reinking, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+arrangement+and+transducing+properties+of+Golgi+tendon+organs.">Mechanical arrangement and transducing properties of Golgi tendon organs.</a> Exp. Brain Res. 14 (3), 274-292 (1972).</li><li>Macmillan, D. L., Dando, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tension+receptors+on+the+apodemes+of+muscles+in+the+walking+legs+of+the+crab,+Cancer+magister.">Tension receptors on the apodemes of muscles in the walking legs of the crab, Cancer magister.</a> Mar. Behav. Physiol. 1 (1-4), 185-208 (1972).</li><li>B&#233;vengut, M., Simmers, A. J., Clarac, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+neuronal+projections+and+neuromuscular+organization+of+the+basal+region+of+the+shore+crab+leg.">Central neuronal projections and neuromuscular organization of the basal region of the shore crab leg.</a> J. Comp. Neurol. 221 (2), 185-198 (1983).</li><li>El Manira, A., Cattaert, D., Clarac, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+connections+mediate+resistance+reflex+in+crayfish+(Procambarus+clarkii)+legs.">Monosynaptic connections mediate resistance reflex in crayfish (Procambarus clarkii) legs.</a> J. Comp. Physiol. A. 168 (3), 337-349 (1991).</li><li>Le Bon-Jego, M., Cattaert, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+component+of+the+resistance+reflex+in+the+locomotor+network+of+the+crayfish.">Inhibitory component of the resistance reflex in the locomotor network of the crayfish.</a> J. Neurophysiol. 88 (5), 2575-2588 (2002).</li><li>Ray, D. L., Clarac, F., Cattaert, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+the+sensory+motor+pathway+of+resistance+reflex+in+crayfish.+I.+Multisensory+coding+and+motor+neuron+monosynaptic+responses.">Functional analysis of the sensory motor pathway of resistance reflex in crayfish. I. Multisensory coding and motor neuron monosynaptic responses.</a> J. Neurophysiol. 78 (6), 3133-3143 (1997).</li><li>Wiersma, C. A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vergleichende+Untersuchungen&#252;ber+das+periphere+Nerve-muskelsystem+von+Crustaceen+(Comparative+studies+on+the+peripheral+nerve-muscle+system+of+crustaceans).">Vergleichende Untersuchungen&#252;ber das periphere Nerve-muskelsystem von Crustaceen (Comparative studies on the peripheral nerve-muscle system of crustaceans).</a> J. Comp. Physiol. 19, 349-385 (1933).</li><li>Wiersma, C. A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+receptors+in+decapod+crustacea.">Movement receptors in decapod crustacea.</a> J. Mar. Biol. Assoc. U.K. 38 (01), 01-143 (1959).</li><li>Hartman, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tension+receptors+on+the+closer+muscle+apodeme+in+the+walking+legs+of+the+blue+crab+Callinectes+sapidus.">Tension receptors on the closer muscle apodeme in the walking legs of the blue crab Callinectes sapidus.</a> J. Comp. Physiol. A. 157 (3), 355-362 (1985).</li><li>Holsinger, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The effect of regional phenotypic differences of Procambarus clarkii opener muscle on sarcomere length, fiber diameter, and force development MSc thesis [dissertation]. , (2013).</li><li>Parsons, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+morphology+and+ultrastructure+of+tension+receptors+in+the+walking+legs+of+the+crab,+Carcinus+maenas.">The morphology and ultrastructure of tension receptors in the walking legs of the crab, Carcinus maenas.</a> Cell Tissue Res. 211 (1), 139-149 (1980).</li><li>Parsons, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+and+central+interactions+of+tension+receptors+in+the+leg+muscle+of+Carcinus.">Responses and central interactions of tension receptors in the leg muscle of Carcinus.</a> Comp. Biochem. Physiol. A Physiol. 72 (2), 391-399 (1982).</li><li>Tryba, A. K., Hartman, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+responses+of+series+force+receptors+innervating+the+opener+muscle+apodeme+in+the+blue+crab,+Callinectes+sapidus.">Dynamic responses of series force receptors innervating the opener muscle apodeme in the blue crab, Callinectes sapidus.</a> J. Comp. Physiol. A. 180 (3), 215-221 (1997).</li><li>Whitear, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fine+structure+of+crustacean+proprioceptors.+I.+The+chordotonal+organs+in+the+legs+of+the+shore+crab,+Carcinus+meanas.">The fine structure of crustacean proprioceptors. I. The chordotonal organs in the legs of the shore crab, Carcinus meanas.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 245 (725), 291-325 (1962).</li><li>Whitear, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fine+structure+of+crustacean+proprioceptors.+II.+The+thoracico-coxal+organs+in+Carcinus,+Pagurus+and+Astacus.">The fine structure of crustacean proprioceptors. II. The thoracico-coxal organs in Carcinus, Pagurus and Astacus.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 248 (752), 437-456 (1965).</li><li>Leksrisawat, B., Cooper, A. S., Gilberts, A. B., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+Receptor+Organs+in+the+Crayfish+Abdomen:+A+Student+Laboratory+Exercise+in+Proprioception.">Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception.</a> J. Vis. Exp. (45), e2323 (2010).</li><li>Baierlein, B., Thurow, A. L., Atwood, H. L., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+Potentials,+Synaptic+Responses,+Neuronal+Circuitry,+Neuromodulation+and+Muscle+Histology+Using+the+Crayfish:+Student+Laboratory+Exercises.">Membrane Potentials, Synaptic Responses, Neuronal Circuitry, Neuromodulation and Muscle Histology Using the Crayfish: Student Laboratory Exercises.</a> J. Vis. Exp. (47), e2322 (2011).</li><li>Delaney, K., Gelperin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+interneurons+controlling+fictive+feeding+in+Limaxmaximus;+I.+Anatomy+and+criteria+for+re-identification.">Cerebral interneurons controlling fictive feeding in Limaxmaximus; I. Anatomy and criteria for re-identification.</a> J. Comp. Physiol. A. 166, 297-310 (1990).</li><li>Hartman, H. B., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+and+molting+effects+on+a+proprioceptor+organ+in+the+Dungeness+crab,+Cancer+magister.">Regeneration and molting effects on a proprioceptor organ in the Dungeness crab, Cancer magister.</a> J. Neurobiol. 25 (5), 461-471 (1994).</li><li>Hartman, H. B., Austin, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proprioceptor+organs+in+the+antennae+of+Decapoda+Crustacea.">Proprioceptor organs in the antennae of Decapoda Crustacea.</a> J. Comp. Physiol. 81 (2), 187-202 (1972).</li><li>Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+sensory+processes+during+limb+regeneration+in+adult+crayfish.">Development of sensory processes during limb regeneration in adult crayfish.</a> J. Exp. Biol. 201 (Pt 11), 1745-1752 (1998).</li><li>Chung, Y. -. S., Cooper, R. M., Graff, J., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+and+chronic+effect+of+low+temperature+on+survival,+heart+rate+and+neural+function+in+crayfish+(Procambarus+clarkii)+and+prawn+(Macrobrachium+rosenbergii)+species.">The acute and chronic effect of low temperature on survival, heart rate and neural function in crayfish (Procambarus clarkii) and prawn (Macrobrachium rosenbergii) species.</a> Open J. Mol. Int. Physiol. 2 (3), 75-86 (2012).</li><li>Blundon, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+temperature+and+thermal+history+on+neuromuscular+properties+of+two+crustacean+species.">Effects of temperature and thermal history on neuromuscular properties of two crustacean species.</a> J. Comp. Physiol. B. 158 (6), 689-696 (1989).</li><li>Cooper, R. M., Schapker, H., Adami, H., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+and+ventilatory+measures+in+crayfish+during+copulation.">Heart and ventilatory measures in crayfish during copulation.</a> Open J. Mol. Int. Physiol. 1 (3), 36-42 (2011).</li><li>Bierbower, S. M., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanistic+action+of+carbon+dioxide+on+a+neural+circuit+and+NMJ+communication.">The mechanistic action of carbon dioxide on a neural circuit and NMJ communication.</a> Journal of Experimental Zoology. , (2013).</li><li>Bierbower, S. M., Shuranova, Z. P., Viele, K., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+systems+and+environmental+change+on+behavior+during+social+interactions.">Sensory systems and environmental change on behavior during social interactions.</a> Brain Behav. 3 (1), 4-13 (2013).</li></ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

המטרה של קבוצה זו של ניסויים היא 1) ללמד ולהציג את עקרונות היסוד של הקלטות תאי מאיבר פרופריוצפטיביות זיהוי ועצבי מתח ו2) כדי להדגיש את החשיבות של מיפוי האנטומי ביחס לתפקוד פיסיולוגי של מערכות חושיות מסוימות. גישה זו ניסיונית והמודלים של בעלי החיים מנוצל הם זולים וקלים יחסית לביצוע במעבדות הוראת נוירופיזיולוגיה. הנוירונים של איברי chordotonal הם משני סוגים תפקודיים ספציפיים, אלה המגיבים לתנועה ואלו מגיבים לעמדות סטטיות. הקלטות תא בודדות ממגוון רחב של איברי chordotonal, לא משנה באיזו משותף נבדק, הראו את זה כדי להיות המקרה 3,5. ואכן, איברי chordotonal קשורים מפרקי המחושים של לובסטרים לחשוף אותם שני סוגים חושיים ואנטומיה בסיסית 27. בנוסף לקיומן של שני סוגי תא עצב (תנועה וpositiב), הנוירונים חולקים את אותה סידור האנטומי בגדילי אלסטי המיוחסים להם. Somata הגדול הממוקם proximally על הגדיל נוטה להשתייך לנוירונים הרגישים התנועה הדינמית. יש נוירונים שלאותת עמדות סטטיות somata הקטן וממוקמים distally. תאים אלה הם tonically פעילים. משותף פ&quot;ד מכיל רק איבר chordotonal אחת בעוד יש שני איברים chordotonal בcarpus-propodus (CP) וmerus-carpus מפרקים (MC). הנתיחה כדי לחשוף מבני פרופריוצפטיביות בסרטנים כחולים (sapidus ג) להקלטת אלקטרו דורשת אסטרטגיה שמאפשרת משותפות תנועות להתקיים בעמדות טבעיות בעת הקלטה מתא עצב תחושתי. העצבים המתח לשריר הפותחן ברגל ההליכה הוא עצב דק מאוד מורכב מכמה תאי עצב. אלא אם טיפול נלקח, עצב המתח, כמו גם את העצב המוטורי innervating השרירים להיות מגורה, יכול להיות שניזוקו במהלך נתיחה זו. עבורהקלטות אופטימליות אלקטרודות היניקה צריכה להיות מותאמות לגודל של העצב. הקלטות הן נגישות בקלות במעבדה תלמיד באמצעות מיקרוסקופ לנתח הגדלת 30-40X וmicromanipulators הסוף נמוך. ניסויים עתידיים שיהיו מעניין להמשיך עם איברי chordotonal המשותפים יהיו לבחון פרופילים המבניים ופיסיולוגיים במהלך התחדשות רגל במינים שונים בשלבים שונים במחזור החיים כהמשך למחקר ראשוני זה המשמש מגיסטר הסרטן 19.26 . שאלות שנותרו לטפל הן 1) אין החלוקה והארגון מחדש של תאי עצב תלוי בגילו של בעל החיים בעת התחדשות איבר, 2) הן תחזיות axonal למערכת העצבים המרכזית (חוט עצב הגחון) באיבר התחדשות תפקודי או עושה את זה לקחת את הזמן ומשותף שימוש לבסס קשרים פונקציונליים, ו3) מה קורה לאקסונים ניתקו הפרוקסימלי למטוס autotomy כאשר האיבר הוא autotomized? 28 סרטנים להתאים לתנאי סביבה וטמפרטורת הסביבה שלהם, אבל לא ברור כיצד הם שומרים על תיאום בתוך מעגל עצבי כמו נוירונים לשנות את הפעילות שלהם בתגובה לשינויי טמפרטורה. קצב איטי של שינוי עשוי לאפשר לבעלי החיים קצת זמן להתאקלמות ואילו שינוי מהיר עשוי not29, 30. שינויים פיסיולוגיים בpH או osmolarity בשל חילוף חומרים, ביום 31 בהתנהגות, או השפעה על הסביבה עשויים להציב אתגרים דומים למעגלים עצביים המעורבים בפרופריוספציה. הכנות סרטנים אלה הן אידיאליים לטיפול בבעיות מסוג זה משום שתפקידם מאופיין גם ברמת תא בודדת. בפרוטוקול זה יש לנו הראה את החשיבות הפיזיולוגית של נוירונים מתח בניטור הכוח שנוצר על ידי שריר הפותחן. ניתן לעקוב אחרי הקולטנים מתח אלה למיקום שלהם בתוך apodeme באמצעות נהלים מכתים. אלהנוירונים, כמו ביונקים, לזהות כוח ברמות שונות ולגייס נוירונים נוספים כמו עליות הכוח. התדירות בפעילות קשורה לתדירות הגירוי של הנוירון המוטורי עד שהגיעה לרוויה בקבלה פן. באמצעות פרוטוקול שחרור מהיר עם מפרק dactylus מכווץ, פעילות המתח נעלמה במהירות, אך לאחר מכן חוזרת על החזרת מתח במפרק מורחב במלואו. זהו הליך ניסיוני קלאסי כדי להמחיש את הכוח שנמדד על ידי קולטנים מתח. ניתן ליישם neuromodulators השונים להכנה כדי לראות איך זה משפיע על פיתוח כוח והתגובה עצבית. אחד ההיבטים החשובים הוא איך התגובות עצביות מעובדות ומשולבת במערכת העצבים המרכזית ואת השפעתן על פעילותם של תאי עצב מוטוריים. הטכניקות שהראינו תאפשר אחד כדי להתחיל לטפל במידע נוסף על מתח פונקצית מעגל נוירון (חושית) עצבים מוטוריים, כלומר אות ברגל בשלמותה לגנגליון ובחזרהלשריר. הנהלים מכתים הפגינו הם מפתח להבנת הפיסיולוגיה של תאי עצב תחושתיים המעצבבת את איברי פרופריוצפטיביות. סידור האנטומי של הנוירונים המבוססים על תפקוד והגודל של סומה דומה באיברי chordotonal השונים ברגלי הסרטנים. לא ידוע אם הסדרים עצביים דומים מצויים גם במינים סרטנים אחרים או חרקים. שילוב של הקלטות פיסיולוגיות של תאים בודדים ומיפוי המיקום מאפשר יחסי פונקצית מבנה ישיר. השימור ארוך הטווח של ההסדר עם אנטומיים CoCl 2 מכתים וקיבעון מאפשר אחת לעשות שוב ושוב צעדים ולהעריך את הסידור המבני. פרופריוספציה וקבלת מתח של שרירי שלד הן מערכות חוש המאפשרים התנהגויות מתואמות ובתגובות לסביבה חיצונית ופנימית לבעלי החיים באו לידי ביטוי במגוון רחב של הגדרות שרירי שלדs. איבר קולט שרירים בבטן של הסרטנים הוא הכנה אחרת מתועדת היטב (ראה פרויקט crawdad; <a href="http://www.crawdad.cornell.edu/">http://www.crawdad.cornell.edu/)</a> למטרות הוראה של פרופריוספציה רק עם שני נוירונים לחמים-קטע בטן 23 . היכולת להקליט מתא עצב אחד לצרורות עצבים חושיות מספקת פרטים נוספים המסייעות בהבנת העקרונות הבסיסיים של קליטה חושית. הכנות סרטנים פשוטות יחסית אלה מאפשרים אחד כדי לטפל בהיבטים בסיסיים של פרופריוספציה וניטור מתח, עם הפוטנציאל כדי לקבוע את המעגלים העצביים המאפשרים שילוב של תשומות פרופריוצפטיביות ואחרות חושיות 9-12, 32, 33 מרכזי.

<html> פרופריוספציה היא התחושה של מיקום ותנועת גפיים המאפשר התנהגות מנוע מתואמת. Proprioceptors מורכב של עמדה (סטטית) ותנועת קולטנים (תנועתית). בחרקים וסרטנים, איברי chordotonal הם המבנים המספקים מידע כי למערכת העצבים המרכזית 1. לא כל איברי chordotonal span משותפים אבל הם עדיין יכולים לעקוב אחר תנועות מפרקות עקב ההתקשרות שלהם על apodemes (גיד כמו מבנים) אשר מקיף את המפרק ולעבור בשיתוף עם שרירי השלד ומפרקי ביטוי. יש רגלי סרטנים שישה פרקים, שכל אחד מן האיברים chordotonal אחד או שניים 2. בדרך כלל יש לו איבר chordotonal 60-100 או יותר נוירונים חושיים מוטבעים בתוך גדיל אלסטי, הנוירונים כי אות מצב סטטי משותף, כיוון ומהירות תנועת 3-6. הקלט מאיברי chordotonal בכל מפרק ובהרגל ולאחר מכן במרכז עיבוד המאפשר תנועות מתואמות על ידי בעלי החיים. &gt; הכוחות שרירי רגליים לייצר במהלך הצירים איזומטרי ואיזוטוני מזוהים על ידי קולטנים מתח הקשורים לסיבי שריר ונספחיהם לapodemes7-9. בפרוטוקולים רגל הליכה הסרטנים הבאים אנו מציגים מתודולוגיה להקלטות מתא העצב עיקרי חושי העוקב אחר פרופריוספציה ונוירונים המגיבים לכוחות שנוצרו על ידי סיבי שריר. טכניקה להפעלת תנועות רגליים וכימותי דור כוח היא גם מוצגת, כמו גם טכניקות אנטומיים שיכול לשמש כדי לאפיין את ההסדר של מבנים במערכת עצבים ההיקפיים אלה. הנהלים יודגמו בהמשך לאפשר ניתוח מבני ותפקודי של תאי העצב המעצבבים את שני הסוגים של קולטנים ביחס למיקום שלהם על גדיל אלסטי chordotonal וapodeme. לשם המחשה, שאנו משתמשים propodite-dactylopodite (PD) איבר chordotonal, האיבר שמשתרע על פני המקטע ביותר הדיסטלי של רגל הסרטנים 3.למרות מחקרי אלקטרו מפורטים החלו את 1930s ועדיין מתבצעים היום, כמה היבטים הפכו ידועים על הקשרים המגזריות של proprioceptors במפרקים השונים ותפקידם בשליטה מתואמת של muscles10-16. הקמת הקשר בין מבנה לתפקוד בין איברי פרופריוצפטיביות, השרירים ומערכת העצבים יהיו עוד יותר לעזור להגדיר תפקידים אלה. למשל, תיוג somata והסופים הדיסטלי של נוירונים מתח מוכנסים לתוך apodeme יגלה ביחס למיקום שלהם לסיבי שריר 8,17-21. אנו מציגים שלוש טכניקות צביעה לרגליים סרטנים שניתן להשתמש בם במחקר או מעבדות אקדמיות. מכתים מתילן כחול מספק ניגוד הולם לשרירים ועצבים, והוא מומלץ כטכניקה פשוטה לתלמידים ללמוד אנטומיה. מעבדות שיש setups מיקרוסקופ פלואורסצנטי יכולות להשיג מכתים עצבי בררני יותר על ידי חשיפת העצבים לזמן קצרים לצבע 4-di-2-ASP החיוני. החלופה השלישית היא CoCl 2 מילוי, שכתמים ומתקן את תאי העצב, ואינה דורשת דימות פלואורסצנטי. למרות שזה עבודה והזמן אינטנסיבי, תהליך צביעה זה נותן ניגודיות גבוהה וספציפיות לעצבים, כי הם מלאים. יחד טכניקות אלה יכולים לשמש להשוואה בין איברי chordotonal שונים, לא רק באיבר או בין איברים, אלא גם בין מיני סרטנים וחרקים אחרים 20-22. סרטנים כחולים (sapidus ג) שימוש בהקלטות פיסיולוגיות ומכתים אנטומיים זמינים בכל רחבי הגבול הדרומי ודרום מזרחי של ארצות הברית. מין זה משמש כנציגם של הסדרי עצב chordotonal ומתח נמצאים ברוב הסרטנים. מעבדות בחוף המערבי יעדיפו להשתמש הסרטנים הרבה יותר גדולים Dungeness (מגיסטר הסרטן) לניסויים אלה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="686">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sylgard</td>
			<td style="width:184px;">Dow Corning</td>
			<td style="width:119px;">182 silicone kit</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S7653</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P9333</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CaCl2</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">C5670</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPES acid</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">3375</td>
			<td style="width:167px;">Free acid, crystalline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPES base</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G7021</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M2643</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Na2SO4&#8226;10H2O</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">246980</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Bouin&#8217;s solution fixative</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">HT10-1-32</td>
			<td style="width:167px;">Caution: Hazardous material (Special shipping cost required)</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">CoCl2</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Caution: Hazardous material. Please follow proper disposal according to local and federal regulations.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Methylene blue chloride</td>
			<td style="width:184px;">Matheson Co., Inc</td>
			<td style="width:119px;">Basic Blue 9, C.I. 52015</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">4-Di-2-ASP</td>
			<td style="width:184px;">Molecular Probes</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">4-(4-diethylaminostyryl)-N-methylpyridinium iodide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bleach</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">To chloride silver wire</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaOH</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">221465</td>
			<td style="width:167px;">To adjust pH</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">H1758</td>
			<td style="width:167px;">To adjust pH</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;"></td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Materials</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dissecting tools</td>
			<td style="width:184px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">assortment</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Intracellular electrode probe</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Faraday cage</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Insect Pins</td>
			<td style="width:184px;">Fine Science Tools, Inc</td>
			<td style="width:119px;">26001-60</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dissecting microscope (100X)</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fiber optic lamp</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Small adjustable mirror</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">To direct light beam toward the preparation.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Glass electrodes</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">CLS7095B5X</td>
			<td style="width:167px;">Box of 200, suction electrodes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:184px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">MD4-M3-R</td>
			<td style="width:167px;">Can fix for base or on a metal rod</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Raised preparation stand</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Silver wire (10/1,000 inch)</td>
			<td style="width:184px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:119px;">782500</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Computer</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">AC/DC differential amplifier</td>
			<td style="width:184px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:119px;">Model 3000</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PowerLab 26T</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">27T</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Force transducer</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">0-50g</td>
			<td style="width:167px;">MLTF050/ST</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Head stage</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Comes with AC/DC amplifier</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LabChart7</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electrical leads</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass tools</td>
			<td style="width:184px;">Make yourself</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">For manipulating nerves</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cable and connectors</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pipettes with bulbs</td>
			<td style="width:184px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">13-711-7</td>
			<td style="width:167px;">Box of 500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Beakers</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wax or modeling clay</td>
			<td style="width:184px;">Any company or local stores</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stimulator</td>
			<td style="width:184px;">Grass Instruments</td>
			<td style="width:119px;">SD9 or S88</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="84" rowspan="2" style="height:84px;width:216px;">Plastic tip for suction electrode</td>
			<td rowspan="2" style="width:184px;">Local hardware store (Watt&#8217;s brand)</td>
			<td rowspan="2" style="width:119px;">&#188; inch OD x 0.170 inch ID</td>
			<td style="width:167px;">Cut in small pieces. Pull out over a flame and cut back the tip to the correct size</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

proprioception and tension receptors in crab limbs: student laboratory exercises

המטרה העיקרית של הליכים אלה היא להדגים למטרות הוראה ומחקר כיצד להקליט את הפעילות של חיים עצב סנסורי עיקרי אחראי לפרופריוספציה כפי שהם מזהים מיקום ותנועה משותפים, ומתח בשרירים. פעילות חשמלית מproprioceptors הסרטנים וקולטניים מתח שתועדה על ידי מכשור נוירופיזיולוגיות בסיסי, ומתמר משמש למדידת כוח שנוצר על ידי גירוי עצב מוטורי בו זמנית. בנוסף, אנו מדגימים כיצד להכתים את הנוירונים להערכה מהירה של הסידור האנטומי שלהם או לקיבוע קבוע. מכתים מגלה ארגון האנטומי כי הוא נציג של איברי chordotonal ברוב הסרטנים. השוואה בין התגובות עצבי מתח לתגובות פרופריוצפטיביות היא כלי הוראה יעיל בקביעה כיצד נוירונים חושיים אלה מוגדרים מבחינה תפקודית וכיצד האנטומיה מתואמת לפונקציה. שלוש טכניקות צביעהמוצגים ומאפשר לחוקרים ומדריכים לבחירת שיטה שהוא אידיאלי למעבדה שלהם.

כאשר איבר פ&quot;ד נמתח על ידי הרחבת המשותפת באופן מלא, הפעילות בעצב פ&quot;ד היא איתנה במהלך התנועה כפי שמוצג לשנייה הראשונה באיור 10. פעילות מסוימות נותרת בזמן שהוא החזיק עדיין במצב הפתוח. פעילות זו היא מהנוירונים סטטי העמדה הרגישים (המחצית שנייה של ההקלטה שמוצגת באיור 10). תנועה מעוררת תגובה בזמן העקירה, והירי הוא בעיקר נוכח במהלך המתיחה של גדיל chordotonal (איור 11). ניתוח נוסף של הקוצים ניתן לגשת בקלות על ידי מיון אמפליטודות יחסית. זוהי גישה להפגין אוכלוסיות שונות של תאי עצב תחושתיים שגויסו לתפקידים או סוגים של תנועות 5. אמפליטודות אופיינית נעה .25-1.5 mV, אולם ערכים אלו תלויים בהתנגדות (כלומר אטימות) של חותם האלקטרודה יניקה. תדר של קוצים בtהוא טווחי גודל שונים יכול גם להיות מיוצג באופן גרפי לניתוח. כוחות שנוצרו על ידי שריר הפותחן ביחס לתדירות הגירוי ניתן להשוות על ידי superimposing עקבות בהתאמה מתח זמן על גב אחד את השני (13A דמויות ו-B). זה גם יכול להתבצע עבור כל עמדה משותפת בכל תדר גירוי נתון. פעילות של עצב המתח אז יכולה להיות מתואמת עם כמות הכוח יחסי שנוצר בכל תדר גירוי, ועבור כל עמדה משותפת. כמו בעצב פ&quot;ד, מגוון רחב של אמפליטודות ספייק נראה בתגובה להתכווצות של שריר הפותחן (13C איור). סידור האנטומי של תאי עצב ברגל ההליכה בבירור הוא ציין עם מכתים מתילן כחול (איור 14). שים לב לנוירון הגדיל ומתח chordotonal אלסטי כי הוא קרוב לapodeme. כמה somata בקטרים ​​שוניםמיקומים ספציפיים ד הם גם נראים בנתון זה. כמובן כולו של עצב המתח והעצב מוטורי אלונקה מוצגים באיור 15. נוירונים בודדים של עצב פ&quot;ד מוצגים עם ניגודיות גבוהה יותר באמצעות 4-Di-2-ASP (איור 16) וCoCl 2 (איור 17) מילוי טכניקות. בהגדלה גבוהה ניתן לראות את קצות חושים פנימיים של scolopales התומכת (16B דמויות) 21,22,26. <img alt="איור 10" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig10.jpg" width="500px" /> איור 10. העבר ומחזיק ב 0 °. הנוירונים הדינמיים הם חזקים בירי בתנועה וקוצים מהנוירונים רגישים סטטי נמצאים בזמן המשותף מוחזקים פתוח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig10highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר &lt;</a>/&gt;. <img alt="איור 11" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig11.jpg" width="500px" /> איור 11. ראפיד פתוח וסגירה ממכווצת באופן מלא לעמדה מורחבת (90-0 °). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig11highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 12" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig12.jpg" width="500px" /> קוצים תאיים איור 12. נרשמו מעצב פ&quot;ד. המשותף הוא פתוח לגמרי ולאחר מכן עבר במהירות ל½ מכווץ עמדה ולאחר מכן התקיים עדיין. שים לב לפעילות בתנועה וירידה בפעילות כאשר סטטי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig12highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בהר&quot;י הגדול יותר</a><html> ge. <img alt="איור 13" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig13.jpg" width="500px" /> איור 13. הכוחות יחסי שהם פיתחו עם המפרק מכווץ באופן מלא ומגורה בתדרים השונים. () עקבות מתח פעמיות ממתמר הכוח מוצגות עם כל תדר גירוי. (ב) העקבות בפנל הן על גבי בצבעים שונים על מנת להקל בהשוואה. (C) מתח בזמן עקבות של פעילות חשמלית שנרשמו מעצבי המתח כאשר העצב המוטורי היה מגורה ב80 הרץ. שים לב לדפוס הקבוע של חפצי הגירוי בהשוואה לפעילות העצבית. כמו כן, שים לב לאמפליטודות השונות של התגובות עצביות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig13highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <html> ithin-page = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 14" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig14.jpg" width="500px" /> איור 14. כתם כחול מתילן של הכנת רגל הליכה. somas הבודד מוצג עם הסיומות חושיות שלהם מקרינים לתוך גדיל אלסטי. קרוב לapodeme נוירון מתח מוצג. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig14highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 15" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig15.jpg" width="500px" /> איור 15. עצב המתח הנובע מקצה הדיסטלי (חצים אדומים) ומצטרף לעצב המוטורי (חץ ירוק). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig15highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <html> e = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 16" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig16.jpg" width="500px" /> איור 16. () חזרה מילוי של עצב PD במגיסטר הסרטן עם 4-Di-2-ASP. (ב) הגדלה גבוהה של סופים חושיים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig16highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <img alt="איור 17" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig17.jpg" width="500px" /> איור 17. נוירונים שהיו מלאים בCoCl 2 ומעובד (א &#39;). מתווה לייחס של ההכנה המוכתמת מוצג (ב &#39;). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig17highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspac</html style=";text-align:right;direction:rtl">ing = &quot;0&quot; width = &quot;392&quot;&gt; <colgroup><col /><col /></colgroup><tbody><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:235px;"> מלוח </td><td style="width:157px;"> G / L </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> NaCl </td><td style="width:157px;"> 27.29 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> KCl </td><td style="width:157px;"> 0.81 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> O 4 • 7H 2 MgSO </td><td style="width:157px;"> 4.81 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> CaCl 2 • 2H 2 O </td><td style="width:157px;"> 1.85 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> Na 2 O 4 • 10H 2 SO </td><td style="width:157px;"> 0.97 </td></tr><tr height=&quot;20&quot;&gt; <td height="20" style="height:20px;width:235px;"> דקסטרוז (D-גלוקוז) </td><td style="width:157px;"> 1.982 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> חומצת HEPES </td><td style="width:157px;"> 0.476 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> מלח HEPES </td><td style="width:157px;"> 2.08 </td></tr><tr height="40"><td height="40" style="height:40px;width:235px;"> התאם לpH 8.1 עם NaOH או HCl </td><td style="width:157px;"></td></tr></tbody></table> טבלת 1. מתכונים למלוחים סרטנים.

Watch this Scientific Journal Video about Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises at JoVE.com

קולטני פרופריוספציה ומתח באיברי סרטנים | מדעי המוח | וִידֵאוֹ

Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

טכניקות האנטומי ופיסיולוגיות הם הפגינו כדי לטפל בתפקוד ומבנה לproprioceptors משותף וקולטניים מתח שרירים בגפיים הליכה סרטנים.

רצפטורים פרופריוספציה והמתח בסרטן איברים: תרגילי מעבדה הסטודנטים

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons ...

proprioception-tension-receptors-crab-limbs-student-laboratory

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Neuroscience

Fundamentals

Scientific Inquiry

SCIENTISTS IN ACTION

25.0K Views.  University of Kentucky.  טכניקות האנטומי ופיסיולוגיות הם הפגינו כדי לטפל בתפקוד ומבנה לproprioceptors משותף וקולטניים מתח שרירים בגפיים הליכה סרטנים. 

Video: Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in rodents have shown a direct link between testosterone and aggressive behavior1 and folk wisdom adapts these findings to humans, suggesting that testosterone induces antisocial, egoistic or even aggressive behavior2. However, many researchers doubt a direct testosterone-aggression link in humans, arguing instead that testosterone is primarily involved in status-related behavior3,4. As a high status can also be achieved by aggressive and antisocial means it can be difficult to distinguish between anti-social and status seeking behavior.
We therefore set up an experimental environment, in which status can only be achieved by prosocial means. In a double-blind and placebo-controlled experiment, we administered a single sublingual dose of 0.5 mg of testosterone (with a hydroxypropyl-&beta;-cyclodextrin carrier) to 121 women and investigated their social interaction behavior in an economic bargaining paradigm. Real monetary incentives are at stake in this paradigm; every player A receives a certain amount of money and has to make an offer to another player B on how to share the money. If B accepts, she gets what was offered and player A keeps the rest. If B refuses the offer, nobody gets anything. A status seeking player A is expected to avoid being rejected by behaving in a prosocial way, i.e. by making higher offers.
The results show that if expectations about the hormone are controlled for, testosterone administration leads to a significant increase in fair bargaining offers compared to placebo. The role of expectations is reflected in the fact that subjects who report that they believe to have received testosterone make lower offers than those who say they believe that they were treated with a placebo. These findings suggest that the experimental economics approach is sensitive for detecting neurobiological effects as subtle as those achieved by administration of hormones. Moreover, the findings point towards the importance of both psychosocial as well as neuroendocrine factors in determining the influence of testosterone on human social behavior.

The procedure described in this protocol shows that testosterone administration and folk beliefs about testosterone may be associated with directly opposed social behaviors.

שילוב של התנהגות אנדוקרינולוגיה וכלכלה ניסויית: החלטת טסטוסטרון חברתית ביצוע

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse. Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the neurobiology and phenomenology of relapse to drug use. Although procedural variations have emerged over the past several decades, the most conventional reinstatement procedures are based on the drug self-administration (SA) model. In this model, an animal is trained to perform an operant response to obtain drug. Subsequently, the behavior is extinguished by withholding response-contingent reinforcement. Reinstatement of drug seeking is then triggered by a discrete event, such as an injection of the training drug, re-exposure to drug-associated cues, or exposure to a stressor 1.
Reinstatement procedures were originally developed to study the ability of acute non-contingent exposure to the training drug to reinstate drug seeking in rats and monkeys 1, 2. Reinstatement procedures have since been modified to study the role of environmental stimuli, including drug-associated cues and exposure to various forms of stress, in relapse to drug seeking 1, 3, 4.
Over the past 15 years, a major focus of the reinstatement literature has been on the role of stress in drug relapse. One of the most commonly used forms of stress for studying this relationship is acute exposures to mild, intermittent, electric footshocks. The ability of footshock stress to induce reinstatement of drug seeking was originally demonstrated by Shaham and colleagues (1995) in rats with a history of intravenous heroin SA5. Subsequently, the effect was generalized to rats with histories of intravenous cocaine, methamphetamine, and nicotine SA, as well as oral ethanol SA 3, 6.
Although footshock-induced reinstatement of drug seeking can be achieved reliably and robustly, it is an effect that tends to be sensitive to certain parametrical variables. These include the arrangement of extinction and reinstatement test sessions, the intensity and duration of footshock stress, and the presence of drug-associated cues during extinction and testing for reinstatement. Here we present a protocol for footshock-induced reinstatement of cocaine seeking that we have used with consistent success to study the relationship between stress and cocaine seeking.

Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the role of stress in relapse to drug seeking. Here, we report on a method for inducing the reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats via acute exposures to mild, intermittent electric footshock.

נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Membrane Potentials, Synaptic Responses, Neuronal Circuitry, Neuromodulation and Muscle Histology Using the Crayfish: Student Laboratory Exercises

The purpose of this report is to help develop an understanding of the effects caused by ion gradients across a biological membrane. Two aspects that influence a cell's membrane potential and which we address in these experiments are: (1) Ion concentration of K+ on the outside of the membrane, and (2) the permeability of the membrane to specific ions. The crayfish abdominal extensor muscles are in groupings with some being tonic (slow) and others phasic (fast) in their biochemical and physiological phenotypes, as well as in their structure; the motor neurons that innervate these muscles are correspondingly different in functional characteristics. We use these muscles as well as the superficial, tonic abdominal flexor muscle to demonstrate properties in synaptic transmission. In addition, we introduce a sensory-CNS-motor neuron-muscle circuit to demonstrate the effect of cuticular sensory stimulation as well as the influence of neuromodulators on certain aspects of the circuit. With the techniques obtained in this exercise, one can begin to answer many questions remaining in other experimental preparations as well as in physiological applications related to medicine and health. We have demonstrated the usefulness of model invertebrate preparations to address fundamental questions pertinent to all animals.

The experiments demonstrate an easy approach for students to gain experience in examining muscle structure, synaptic responses, the effects of ion gradients and permeability on membrane potentials. Also, a sensory-CNS-motor-muscle circuit is presented to show a means to test effects of compounds on a neuronal circuit.

ממברנה פוטנציאלים, התגובות Synaptic, המעגלים הנוירונים, Neuromodulation ו היסטולוגיה שרירים שימוש סרטן הנהרות: מעבדה תרגילים סטודנטים

The purpose of this report is to help develop an understanding of the effects caused by ion gradients across a biological membrane. Two aspects that ...

Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception

The primary purpose of this experiment is to demonstrate primary sensory neurons conveying information of joint movements and positions as proprioceptive information for an animal. An additional objective of this experiment is to learn anatomy of the preparation by staining, dissection and viewing of neurons and sensory structures under a dissecting microscope. This is performed by using basic neurophysiological equipment to record the electrical activity from a joint receptor organ and staining techniques. The muscle receptor organ (MRO) system in the crayfish is analogous to the intrafusal muscle spindle in mammals, which aids in serving as a comparative model that is more readily accessible for electrophysiological recordings. In addition, these are identifiable sensory neurons among preparations. The preparation is viable in a minimal saline for hours which is amenable for student laboratory exercises. The MRO is also susceptible to neuromodulation which encourages intriguing questions in the sites of modulatory action and integration of dynamic signals of movements and static position along with a gain that can be changed in the system.

The primary purpose of this experiment is to understand how primary sensory neurons convey information of joint movements and positions as proprioceptive information for an animal. An additional objective of this report is present the anatomy of the preparation by dissection and viewing of neurons under a dissecting microscope.

קולטן שרירים איברים בבטן סרטן הנהרות: מעבדה הסטודנטים תרגיל הפרופריוספציה

The primary purpose of this experiment is to demonstrate primary sensory neurons conveying information of joint movements and positions as proprioceptive ...

Physiological Experimentation with the Crayfish Hindgut: A Student Laboratory Exercise

The purpose of the report is to describe dissection techniques for preparing the crayfish hindgut and to demonstrate how to make physiological recordings with a force transducer to monitor the strength of contraction. In addition, we demonstrate how to visually monitor peristaltic activity, which can be used as a bioassay for various peptides, biogenic amines and neurotransmitters. This preparation is amenable to student laboratories in physiology and for demonstrating pharmacological concepts to students. This preparation has been in use for over 100 years, and it still offers much as a model for investigating the generation and regulation of peristaltic rhythms and for describing the mechanisms underlying their modulation. The pharmacological assays and receptor sub-typing that were started over 50 years ago on the hindgut still contribute to research today. This robust preparation is well suited to training students in physiology and pharmacology.

In this report we demonstrate techniques that can be used to investigate the biology of the crayfish hindgut. We show how to dissect a crayfish abdomen and study the associated anatomy, physiology and modulation of activity. The peristaltic activity and strength of contractions are measured using a force transducer.

ניסויים פיזיולוגיים עם במעי האחורי סרטן הנהרות: תרגיל מעבדה סטודנטים

The purpose of the report is to describe dissection techniques for preparing the crayfish hindgut and to demonstrate how to make physiological recordings ...

Assaying Surface Expression of Chemosensory Receptors in Heterologous Cells

The vivid world of odors is recognized by the sense of olfaction. Olfaction in mice is mediated by a repertoire of about 1200 G Protein Coupled Receptors (GPCRs) 1 that are postulated to bind volatile odorant molecules and converting the extracellular signal into an intracellular signal by coupling with G protein G&alpha;olf. Binding of the odorants to the receptors is thought to follow a combinatorial rule, that is, one odorant may bind several receptors and one receptor may bind several odorants to varying degrees 2. Biochemical, signaling and ligand binding studies have been conveniently carried out for most GPCRs using heterologous cells. However use of heterologous cells for study of odorant receptors, was precluded for a long time since on transfection they failed to export to the surface. Saito et al have demonstrated single membrane pass Receptor Transporting Protein (RTP) family chaperones show enhanced expression in the olfactory sensory neurons and act as chaperones to traffic odorant receptors to the surface in heterologous cells, when co transfected together 3. To carry out biochemical assays for receptors using heterologous cells, one must first determine if the receptor shows robust surface expression in the cell line. This can be assayed by overexpressing the receptors with the chaperone RTP1S followed by live cell staining to fluorescently label the extracellular domain or a tag in the extracellular domain exclusively. Here we demonstrate a protocol to carry out live cell staining that can be used to detect odorant receptors on the surface of HEK293T cells conveniently. In addition, it may also be used to assay for surface expression of other chemosensory receptors or GPCRs.

Here we demonstrate a protocol to carry out live cell staining that can be used to detect odorant receptors on the surface of HEK293T cells conveniently. In addition, it may also be used to assay for surface expression of other chemosensory receptors or GPCRs.

Assaying הביטוי Surface של קולטנים Chemosensory בתוך תאים Heterologous

The vivid world of odors is recognized by the sense of olfaction. Olfaction in mice is mediated by a repertoire of about 1200 G Protein Coupled Receptors ...

Optical Imaging of Neurons in the Crab Stomatogastric Ganglion with Voltage-sensitive Dyes

Voltage-sensitive dye imaging of neurons is a key methodology for the understanding of how neuronal networks are organised and how the simultaneous activity of participating neurons leads to the emergence of the integral functionality of the network. Here we present the methodology of application of this technique to identified pattern generating neurons in the crab stomatogastric ganglion. We demonstrate the loading of these neurons with the fluorescent voltage-sensitive dye Di-8-ANEPPQ and we show how to image the activity of dye loaded neurons using the MiCAM02 high speed and high resolution CCD camera imaging system. We demonstrate the analysis of the recorded imaging data using the BVAna imaging software associated with the MiCAM02 imaging system. The simultaneous voltage-sensitive dye imaging of the detailed activity of multiple neurons in the crab stomatogastric ganglion applied together with traditional electrophysiology techniques (intracellular and extracellular recordings) opens radically new opportunities for the understanding of how central pattern generator neural networks work.

Here we present the methodology for fast and high resolution fluorescent voltage-sensitive dye imaging of detailed activity of neurons in the crab stomatogastric ganglion.

דימות אופטי של נוירונים גנגליון סרטן Stomatogastric עם מתח רגיש צבעים

Voltage-sensitive dye imaging of neurons is a key methodology for the understanding of how neuronal networks are organised and how the simultaneous ...

Use of pHluorin to Assess the Dynamics of Axon Guidance Receptors in Cell Culture and in the Chick Embryo

During development, axon guidance receptors play a crucial role in regulating axons sensitivity to both attractive and repulsive cues. Indeed, activation of the guidance receptors is the first step of the signaling mechanisms allowing axon tips, the growth cones, to respond to the ligands. As such, the modulation of their availability at the cell surface is one of the mechanisms that participate in setting the growth cone sensitivity. We describe here a method to precisely visualize the spatio-temporal cell surface dynamics of an axon guidance receptor both in vitro and in vivo in the developing chick spinal cord. We took advantage of the pH-dependent fluorescence property of a green fluorescent protein (GFP) variant to specifically detect the fraction of the axon guidance receptor that is addressed to the plasma membrane. We first describe the in vitro validation of such pH-dependent constructs and we further detail their use in vivo, in the chick spinal chord, to assess the spatio-temporal dynamics of the axon guidance receptor of interest.

We describe here the use of a pH-sensitive green fluorescent protein variant, pHluorin, to study the spatio-temporal dynamics of axon guidance receptors trafficking at the cell surface.&#160;The pHluorin-tagged receptor is expressed both in cell culture and in vivo, using electroporation of the chick embryo.

שימוש pHluorin כדי להעריך את הדינמיקה של קולטני הדרכה אקסון בתרבות התא בעובר אפרוח

During development, axon guidance receptors play a crucial role in regulating axons sensitivity to both attractive and repulsive cues. Indeed, activation ...

Inducing Plasticity of Astrocytic Receptors by Manipulation of Neuronal Firing Rates

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be stimulated by neuronally-released transmitter. However, the ability of astrocytic receptors to exhibit plasticity in response to changes in neuronal activity has received little attention. Here we describe a model system that can be used to globally scale up or down astrocytic group I metabotropic glutamate receptors (mGluRs) in acute brain slices. Included are methods on how to prepare parasagittal hippocampal slices, construct chambers suitable for long-term slice incubation, bidirectionally manipulate neuronal action potential frequency, load astrocytes and astrocyte processes with fluorescent Ca2+ indicator, and measure changes in astrocytic Gq GPCR activity by recording spontaneous and evoked astrocyte Ca2+ events using confocal microscopy. In essence, a &#8220;calcium roadmap&#8221; is provided for how to measure plasticity of astrocytic Gq GPCRs. Applications of the technique for study of astrocytes are discussed. Having an understanding of how astrocytic receptor signaling is affected by changes in neuronal activity has important implications for both normal synaptic function as well as processes underlying neurological disorders and neurodegenerative disease.

Here we describe an adaptation of protocols used to induce homeostatic plasticity in neurons for the study of plasticity of astrocytic G protein-coupled receptors. Recently used to examine changes in astrocytic group I mGluRs in juvenile mice, the method can be applied to measure scaling of various astrocytic GPCRs, in tissue from adult mice in situ and in vivo, and to gain a better appreciation of the sensitivity of astrocytic receptors to changes in neuronal activity.

גרימת פלסטיות של astrocytic רצפטורים על ידי מניפולציה של מחירים ירי עצביים

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be ...

Receptor Autoradiography Protocol for the Localized Visualization of Angiotensin II Receptors

This protocol describes receptor binding patterns for Angiotensin II (Ang II) in the rat brain using a radioligand specific for Ang II receptors to perform receptor autoradiographic mapping.
Tissue specimens are harvested and stored at -80 &#176;C. A cryostat is used to coronally section the tissue (brain) and thaw-mount the sections onto charged slides. The slide-mounted tissue sections are incubated in 125I-SI-Ang II to radiolabel Ang II receptors. Adjacent slides are separated into two sets: &#39;non-specific binding&#39; (NSP) in the presence of a receptor saturating concentration of non-radiolabeled Ang II, or an AT1 Ang II receptor subtype (AT1R) selective Ang II receptor antagonist, and &#39;total binding&#39; with no AT1R antagonist. A saturating concentration of AT2 Ang II receptor subtype (AT2R) antagonist (PD123319, 10 &#181;M) is also present in the incubation buffer to limit 125I-SI-Ang II binding to the AT1R subtype. During a 30 min pre-incubation at ~22 &#176;C, NSP slides are exposed to 10 &#181;M PD123319 and losartan, while &#39;total binding&#39; slides are exposed to 10 &#181;M PD123319. Slides are then incubated with 125I-SI-Ang II in the presence of PD123319 for &#39;total binding&#39;, and PD123319 and losartan for NSP in assay buffer, followed by several &#39;washes&#39; in buffer, and water to remove salt and non-specifically bound radioligand. The slides are dried using blow-dryers, then exposed to autoradiography film using a specialized film and cassette. The film is developed and the images are scanned into a computer for visual and quantitative densitometry using a proprietary imaging system and a spreadsheet. An additional set of slides are thionin-stained for histological comparisons.
The advantage of using receptor autoradiography is the ability to visualize Ang II receptors in situ, within a section of a tissue specimen, and anatomically identify the region of the tissue by comparing it to an adjacent histological reference section.

Here we present a protocol to describe the localization of angiotensin II Type 1 receptors in the rat brain by quantitative, densitometric, in vitro receptor autoradiography using an iodine-125 labeled analog of angiotensin II.

קולטן autoradiography פרוטוקול עבור ויזואליזציה המרוכזת של אנגיוטנסין II רצפטורים

This protocol describes receptor binding patterns for Angiotensin II (Ang II) in the rat brain using a radioligand specific for Ang II receptors to ...