Os autores são gratos pelas contribuições artísticas de Hyewon Cooper.

<ol>
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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+and+molting+effects+on+a+proprioceptor+organ+in+the+Dungeness+crab,+Cancer+magister.">Regeneration and molting effects on a proprioceptor organ in the Dungeness crab, Cancer magister.</a> J. Neurobiol. 25 (5), 461-471 (1994).</li><li>Hartman, H. B., Austin, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proprioceptor+organs+in+the+antennae+of+Decapoda+Crustacea.">Proprioceptor organs in the antennae of Decapoda Crustacea.</a> J. Comp. Physiol. 81 (2), 187-202 (1972).</li><li>Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+sensory+processes+during+limb+regeneration+in+adult+crayfish.">Development of sensory processes during limb regeneration in adult crayfish.</a> J. Exp. Biol. 201 (Pt 11), 1745-1752 (1998).</li><li>Chung, Y. -. S., Cooper, R. M., Graff, J., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+and+chronic+effect+of+low+temperature+on+survival,+heart+rate+and+neural+function+in+crayfish+(Procambarus+clarkii)+and+prawn+(Macrobrachium+rosenbergii)+species.">The acute and chronic effect of low temperature on survival, heart rate and neural function in crayfish (Procambarus clarkii) and prawn (Macrobrachium rosenbergii) species.</a> Open J. Mol. Int. Physiol. 2 (3), 75-86 (2012).</li><li>Blundon, J. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanistic+action+of+carbon+dioxide+on+a+neural+circuit+and+NMJ+communication.">The mechanistic action of carbon dioxide on a neural circuit and NMJ communication.</a> Journal of Experimental Zoology. , (2013).</li><li>Bierbower, S. M., Shuranova, Z. P., Viele, K., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+systems+and+environmental+change+on+behavior+during+social+interactions.">Sensory systems and environmental change on behavior during social interactions.</a> Brain Behav. 3 (1), 4-13 (2013).</li></ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

O objectivo deste conjunto de experimentos é 1) para ensinar e expor os princípios fundamentais de gravações extracelular de um órgão proprioceptivo identificáveis ​​e nervo tensão e 2) de salientar a importância do mapeamento anatômico em relação à função fisiológica de sistemas sensoriais particulares. Esta abordagem experimental e os modelos animais utilizados são relativamente baratos e fáceis de conduzir, em laboratórios de ensino neurofisiologia. Os neurônios dos órgãos chordotonal são de dois tipos funcionais específicos, aqueles que respondem ao movimento e aqueles que respondem a posições estáticas. Gravações celulares solteiro a partir de uma variedade de órgãos chordotonal, não importa qual conjunto é examinada, têm mostrado que este seja o caso 3,5. De fato, os órgãos chordotonal associados às articulações antenares de lagostas revelar os mesmos dois tipos sensoriais e anatomia básica 27. Além de haver dois tipos de neurônios (movimento e positidiante), os neurônios compartilham o mesmo arranjo anatômico em seus respectivos cordões elásticos. A grande somata localizado proximalmente na costa tendem a pertencer aos neurônios sensíveis dinâmicas de movimento. Os neurônios que sinalizam posições estáticas têm pequena somata e estão localizados distalmente. Estas células são tonicamente ativo. A joint PD contém apenas um único órgão chordotonal enquanto há dois órgãos chordotonal no carpo-própodo (PB) e merus-carpo (MC) articulações. A dissecção de expor estruturas proprioceptivas em caranguejos azuis (C. sapidus) para a gravação eletrofisiológico requer uma estratégia que permite movimentos articulares a ter lugar nas posições naturais durante a gravação de neurônios sensoriais. O nervo para o músculo tensão abridor na perna curta é muito bom nervo composta por vários neurônios. A menos que se tenha o cuidado, o nervo tensão, bem como o nervo motor que inervam o músculo a ser estimulado, pode ser danificado durante o esvaziamento. Paragravações óptimas os eléctrodos de sucção têm de ser adaptados ao tamanho do nervo. As gravações são facilmente acessíveis em um laboratório estudante usando um de 30 40X microscópio ampliação de dissecação e micromanipuladores low-end. Futuros experimentos que seriam interessantes para prosseguir com os órgãos chordotonal conjuntas seria examinar os perfis estruturais e fisiológicas durante a regeneração perna em várias espécies em diferentes fases do ciclo de vida como um acompanhamento para um estudo inicial que utilizou Cancer magister 19,26 . Perguntas restantes a serem abordados são: 1) que a distribuição e organização dos neurônios regenerados dependem da idade do animal quando regenerar um membro, 2) são as projeções axonais para o CNS (cordão nervoso ventral) em um galho de regeneração funcional ou o faz levar tempo e utilização conjunta para estabelecer conexões funcionais, e 3) o que acontece com os axônios cortados proximal ao plano autotomy quando o membro é autotomized? 28 Crustáceos estar de acordo com as condições ambientais e sua temperatura circundante, mas não está claro como eles manter a coordenação dentro de um circuito neural como neurônios alteram sua atividade em resposta a mudanças de temperatura. A baixa taxa de mudança pode permitir que o animal algum tempo para aclimatação ao passo que uma mudança rápida pode not29 de 30. As alterações fisiológicas no pH ou osmolaridade devido ao metabolismo, o comportamento de 31, ou o impacto ambiental pode apresentar desafios semelhantes aos circuitos neurais envolvidos na propriocepção. Estas preparações de crustáceos são ideais para enfrentar esses tipos de problemas, porque a sua função é bem caracterizado em um nível de uma única célula. Neste protocolo, têm demonstrado a importância fisiológica dos neurônios tensão no monitoramento força gerada pelo músculo abridor. Esses receptores de tensão pode ser atribuída a sua localização dentro do apodeme usando procedimentos de coloração. Estesneurônios, como em mamíferos, detectar vigor em vários níveis e recrutar neurônios à medida que a força aumenta. A freqüência da atividade está relacionada com a freqüência de estimulação do neurônio motor até à saturação na recepção é atingido. Usando um protocolo de liberação rápida com a articulação dactylus flexionado, atividade tensão desaparece rapidamente, mas, em seguida, retorna após recuperar a tensão em uma joint totalmente estendida. Este é um procedimento experimental clássico para ilustrar a força medida pelos receptores de tensão. Vários neuromoduladores pode ser aplicado para a preparação ver como efetua o desenvolvimento de força e a resposta neuronal. Um dos aspectos importantes é a forma como as respostas neurais são processados ​​e integrados no sistema nervoso central e o seu impacto sobre a actividade de neurónios motores. As técnicas que têm mostrado permitem começar a tratar mais informações sobre a tensão (sensorial) função do circuito neuronal do nervo motor, ou seja, sinal de uma perna intacta para o gânglio e de voltapara o músculo. Os procedimentos de coloração demonstrados são a chave para a compreensão da fisiologia dos neurônios sensoriais que inervam órgãos proprioceptivos. Disposição anatómica dos neurónios baseados em função do tamanho e da soma são semelhantes em vários órgãos chordotonal dentro das pernas de caranguejo. Não se sabe se os arranjos neuronais semelhantes também são encontrados em outras espécies de crustáceos e insetos. Combinando gravações fisiológicas a partir de células individuais e mapear a localização permite relações de função estrutura direta. A preservação de longo prazo da disposição anatômica com CoCl 2 marcação e fixação permite repetidamente fazer medidas e avaliar o arranjo estrutural. Propriocepção e recepção da tensão dos músculos do esqueleto são modalidades sensoriais que permitem comportamentos coordenadas e as respostas ao ambiente externo e interno para animais articulados em uma variedade de configurações do músculo esqueléticos. O órgão receptor muscular no abdômen do lagostim é uma outra preparação bem documentado (ver o Projeto Crawdad; <a href="http://www.crawdad.cornell.edu/">http://www.crawdad.cornell.edu/</a> ) para fins de ensino de propriocepção com apenas dois neurônios por hemi-segmento abdominal 23 . Ser capaz de gravar a partir de neurônios individuais para feixes de nervos sensoriais fornece mais detalhes que ajudam na compreensão dos princípios básicos da recepção sensorial. Estas preparações de crustáceos relativamente simples permitem abordar aspectos fundamentais da propriocepção e monitoramento de tensão, com o potencial para determinar os circuitos neurais que permitem a integração centro de insumos proprioceptivos e outros sensoriais 9-12, 32, 33.

A propriocepção é a sensação de posição dos membros e movimento que permite que o comportamento motor coordenada. Propriocepção consistem em posição (estático) e movimento (cinestésicas) receptores. Em insetos e crustáceos, os órgãos chordotonal são as estruturas que fornecem essas informações para o SNC 1. Nem todos os órgãos chordotonal abrangem um conjunto, mas eles ainda podem monitorar movimentos articulares devido ao seu apego às apodemes (tendão como estruturas), que abrangem todo o conjunto e se movem em associação com o músculo esquelético e articulação conjunta. Pernas de caranguejo tem seis articulações, cada uma tendo um ou dois órgãos chordotonal 2. Normalmente, um órgão chordotonal tem 60-100 ou mais neurônios sensoriais embutidos dentro de um fio elástico, neurônios que sinalizam posição conjunta estática, direção e velocidade do movimento 3-6. A entrada a partir de órgãos chordotonal em cada junta e perna é então processado centralmente permitindo movimentos coordenados dos animais. <p class="jove_content"&gt; As forças que produzem os músculos da perna durante as contrações isométricas e isotônicas são detectados por receptores de tensão associados com as fibras musculares e seus anexos a apodemes7-9. Nos protocolos de curta perna de crustáceos que se seguem apresentamos metodologia para gravações de neurônios sensoriais primários que monitoram a propriocepção e os neurônios que respondem a forças geradas por fibras musculares. Também é apresentada uma técnica para activar os movimentos das pernas e quantificar a geração de forças, bem como técnicas de anatómicas que podem ser utilizados para caracterizar o arranjo destas estruturas do sistema nervoso periférico. Os procedimentos demonstrados abaixo permitem a análise estrutural e funcional dos neurónios que enervam os dois tipos de receptores em relação à sua localização sobre um fio elástico e chordotonal apodeme. Para ilustrar, usamos o propodite-dactylopodite (PD) órgão chordotonal, o órgão que abrange o segmento mais distal da perna de caranguejo 3.Embora estudos eletrofisiológicos detalhados começou na década de 1930 e ainda estão sendo realizadas hoje, alguns aspectos tornaram-se conhecidos sobre as conexões segmentares de proprioceptores nas diversas articulações e seus papéis no controle coordenado de muscles10-16. Estabelecer a relação estrutura-função entre os órgãos proprioceptivos, músculos e do sistema nervoso irá ainda ajudar a definir esses papéis. Por exemplo, a rotulagem do somata e terminações distais dos neurônios tensão inseridos no apodeme irá revelar sua localização em relação às fibras musculares 8,17-21. Apresentamos três técnicas de coloração para as pernas de crustáceos que podem ser utilizados na investigação ou laboratórios acadêmicos. Coloração azul de metileno fornece o contraste adequado para músculos e nervos e é recomendado como uma técnica simples para os alunos aprenderem anatomia. Labs, que têm configurações de microscopia de fluorescência pode realizar a coloração mais neuronal selectiva expondo brevemente o nervos para o corante vital 4-di-2-ASP. A terceira alternativa é CoCl 2 aterramento, que mancha e corrige os neurônios, e não necessita de imagens de fluorescência. Embora seja trabalho e tempo intensivo, este processo de coloração dá alto contraste e especificidade para os nervos que são preenchidos. Juntas, essas técnicas podem ser usadas para comparar vários órgãos chordotonal, não apenas dentro de um membro ou entre os membros, mas também entre outros crustáceos e insetos espécies 20-22. Caranguejos azuis (C. sapidus) usados ​​em gravações fisiológicas e para a coloração anatômica estão prontamente disponíveis em todo a fronteira sul e sudeste dos Estados Unidos. Esta espécie serve como um representante dos arranjos nervosas chordotonal e tensão encontrados na maioria dos caranguejos. Laboratórios na costa oeste vai preferir usar o muito maior caranguejo Dungeness (magister Câncer) para estes experimentos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="686">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sylgard</td>
			<td style="width:184px;">Dow Corning</td>
			<td style="width:119px;">182 silicone kit</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S7653</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P9333</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CaCl2</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">C5670</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPES acid</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">3375</td>
			<td style="width:167px;">Free acid, crystalline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPES base</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G7021</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M2643</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Na2SO4&#8226;10H2O</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">246980</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Bouin&#8217;s solution fixative</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">HT10-1-32</td>
			<td style="width:167px;">Caution: Hazardous material (Special shipping cost required)</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">CoCl2</td>
			<td style="width:184px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Caution: Hazardous material. Please follow proper disposal according to local and federal regulations.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Methylene blue chloride</td>
			<td style="width:184px;">Matheson Co., Inc</td>
			<td style="width:119px;">Basic Blue 9, C.I. 52015</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">4-Di-2-ASP</td>
			<td style="width:184px;">Molecular Probes</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">4-(4-diethylaminostyryl)-N-methylpyridinium iodide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bleach</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">To chloride silver wire</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaOH</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">221465</td>
			<td style="width:167px;">To adjust pH</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HCl</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">H1758</td>
			<td style="width:167px;">To adjust pH</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;"></td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Materials</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dissecting tools</td>
			<td style="width:184px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">assortment</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Intracellular electrode probe</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Faraday cage</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Insect Pins</td>
			<td style="width:184px;">Fine Science Tools, Inc</td>
			<td style="width:119px;">26001-60</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dissecting microscope (100X)</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fiber optic lamp</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Small adjustable mirror</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">To direct light beam toward the preparation.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Glass electrodes</td>
			<td style="width:184px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">CLS7095B5X</td>
			<td style="width:167px;">Box of 200, suction electrodes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:184px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">MD4-M3-R</td>
			<td style="width:167px;">Can fix for base or on a metal rod</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Raised preparation stand</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Silver wire (10/1,000 inch)</td>
			<td style="width:184px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:119px;">782500</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Computer</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">AC/DC differential amplifier</td>
			<td style="width:184px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:119px;">Model 3000</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PowerLab 26T</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">27T</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Force transducer</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;">0-50g</td>
			<td style="width:167px;">MLTF050/ST</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Head stage</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Comes with AC/DC amplifier</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LabChart7</td>
			<td style="width:184px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electrical leads</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass tools</td>
			<td style="width:184px;">Make yourself</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">For manipulating nerves</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cable and connectors</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pipettes with bulbs</td>
			<td style="width:184px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">13-711-7</td>
			<td style="width:167px;">Box of 500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Beakers</td>
			<td style="width:184px;">Any company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wax or modeling clay</td>
			<td style="width:184px;">Any company or local stores</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stimulator</td>
			<td style="width:184px;">Grass Instruments</td>
			<td style="width:119px;">SD9 or S88</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="84" rowspan="2" style="height:84px;width:216px;">Plastic tip for suction electrode</td>
			<td rowspan="2" style="width:184px;">Local hardware store (Watt&#8217;s brand)</td>
			<td rowspan="2" style="width:119px;">&#188; inch OD x 0.170 inch ID</td>
			<td style="width:167px;">Cut in small pieces. Pull out over a flame and cut back the tip to the correct size</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

proprioception and tension receptors in crab limbs: student laboratory exercises

O principal objetivo desses procedimentos é o de demonstrar para fins de ensino e pesquisa como gravar a atividade dos neurônios sensoriais primários vivendo responsáveis ​​pela propriocepção como eles estão detectando posição conjunta e movimento, e tensão muscular. A atividade elétrica de proprioceptores crustáceos e receptores de tensão é gravado por instrumentação neurofisiológica básico, e um transdutor é usado para medir simultaneamente força que é gerada pela estimulação de um nervo motor. Além disso, demonstramos como marcar os neurônios para uma rápida avaliação de sua disposição anatômica ou para fixação permanente. Coloração revela organização anatômica que é representante de órgãos chordotonal na maioria dos crustáceos. Comparando as respostas nervosas tensão às respostas proprioceptivo é uma ferramenta de ensino eficaz na determinação de como estes neurónios sensoriais são funcionalmente definidos como a anatomia e está correlacionada com a função. Três técnicas de coloraçãosão apresentados permitindo aos pesquisadores e instrutores para escolher um método que é ideal para o seu laboratório.

Quando o órgão de DP é estirada, estendendo totalmente o conjunto, a actividade do nervo PD é robusta durante o movimento, conforme mostrado para o primeiro segundo a Figura 10. Alguma actividade permanece enquanto é ainda mantida na posição de aberta. Esta atividade é a partir dos neurônios sensíveis à posição estáticos (segunda metade da gravação mostra a Figura 10). Movimento evoca uma resposta durante o deslocamento, e o disparo é principalmente presente durante o alongamento da cadeia chordotonal (Figura 11). Uma análise mais aprofundada dos picos podem ser prontamente abordado por triagem as amplitudes relativas. Esta é uma abordagem para demonstrar diferentes populações de neurônios sensoriais sendo recrutados para posições ou tipos de movimentos 5. Amplitudes típicas variam 0,25-1,5 mV, mas esses valores estão dependentes da resistência (isto é, aperto) da vedação do eléctrodo de sucção. A freqüência de picos de tele várias faixas de tamanho também pode ser representado graficamente para análise. Forças geradas pelo músculo abertura no que diz respeito à frequência de estimulação pode ser comparado pela sobreposição dos respectivos vestígios de tempo de tensão em cima umas das outras (Figuras 13A e B). Isto também pode ser realizado para cada posição de articulação em cada dada frequência de estimulação. Actividade do nervo tensão pode então ser correlacionado com a quantidade de força relativa gerada em cada frequência de estimulação, e para cada posição de articulação. Como no nervo PD, uma variedade de amplitudes de pico são vistas em resposta à contracção do músculo do abridor (Figura 13C). Arranjo anatômica de neurônios na perna curta é claramente observado com a coloração azul de metileno (Figura 14). Observe o fio e tensão neurônio chordotonal elástica que fica perto da apodeme. Vários somata com diferentes diâmetros umd locais específicos também são visíveis nesta figura. O curso total do nervo e tensão nervosa motora maca são mostrados na Figura 15. Neurónios individuais do nervo PD são mostrados com maior contraste, utilizando 4-Di-2-ASP (Figura 16) e CoCl2 (Figura 17) Backfill técnicas. Em alta ampliação das terminações sensoriais pode ser visto dentro dos scolopales de apoio (Figura 16B) 21,22,26. <img alt="Figura 10" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig10.jpg" width="500px" /> Figura 10. Mova e mantenha a 0 °. Os neurônios dinâmicos são robustos em disparo durante o movimento e picos de neurônios sensíveis estáticos estão presentes, enquanto o conjunto é mantido aberto. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig10highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada &lt;</a>/ A&gt;. <img alt="Figura 11" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig11.jpg" width="500px" /> Figura 11. Rápida aberta e fechamento de totalmente flexionado na posição estendida (90-0 º). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig11highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . <img alt="Figura 12" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig12.jpg" width="500px" /> Figura 12. Picos extracelulares gravados a partir do nervo PD. A junta está totalmente estendido e, em seguida, moveu-se rapidamente para um ½ posição de flexão e, em seguida, realizou ainda. Observe a atividade durante o movimento e diminuição da atividade, quando estático. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig12highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver ampliado ima</a>ge. <img alt="Figura 13" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig13.jpg" width="500px" /> Figura 13. As forças relativas que são desenvolvidos com a articulação totalmente flexionado e estimulado nas várias freqüências. (A) os traços de tensão em tempo do transdutor de força são mostrados com cada freqüência de estimulação. (B) Os traços no painel A são sobrepostas em cores diferentes para facilitar a comparação. (C) em tempo de tensão vestígios de atividade elétrica gravados a partir do nervo tensão quando o nervo motor foi estimulada a 80 Hz. Nota do padrão regular dos artefactos do estímulo em comparação com a actividade neuronal. Além disso, observe as várias amplitudes das respostas neurais. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig13highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . Figura 14. Metileno mancha azul da preparação curta perna. Somas individuais são mostrados com suas terminações sensoriais projetando para o fio elástico. Perto do apodeme um neurônio tensão é mostrado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig14highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . <img alt="Figura 15" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig15.jpg" width="500px" /> Figura 15. O nervo tensão decorrente da extremidade distal (setas vermelhas) e juntando-se o nervo motor (seta verde). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig15highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . Figura 16. (A) Um back-preenchimento do nervo PD em Cancer magister com 4-Di-2-ASP. (B) Maior aumento de terminações sensoriais. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig16highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . <img alt="Figura 17" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51050/51050fig17.jpg" width="500px" /> Figura 17. Os neurónios que foram preenchidos com CoCl2 e processados ​​(A). Esboço rastreada da preparação manchado mostrado (B). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51050/51050fig17highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = &quot;0&quot; width = &quot;392&quot;&gt; <colgroup><col /><col /></colgroup><tbody><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:235px;"> Salina </td><td style="width:157px;"> g / L </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> NaCl </td><td style="width:157px;"> 27.29 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> KCl </td><td style="width:157px;"> 0,81 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> MgSO 4 • 7H 2 O </td><td style="width:157px;"> 4,81 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> CaCl 2 2H 2 O • </td><td style="width:157px;"> 1.85 </td></tr><tr height="26"><td height="26" style="height:26px;width:235px;"> Na 2 SO 4 • 10H 2 O </td><td style="width:157px;"> 0,97 </td></tr><tr height=&quot;20&quot;&gt; <td height="20" style="height:20px;width:235px;"> Dextrose (D-glicose) </td><td style="width:157px;"> 1.982 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> Ácido HEPES </td><td style="width:157px;"> 0,476 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;width:235px;"> HEPES sal </td><td style="width:157px;"> 2.08 </td></tr><tr height="40"><td height="40" style="height:40px;width:235px;"> Ajustar a pH 8,1 com NaOH ou HCl </td><td style="width:157px;"></td></tr></tbody></table> Tabela 1. Receitas para caranguejo salina.

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Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

Técnicas fisiológicas e anatômicas são demonstrados para lidar com a função e estrutura para proprioceptores articulares e receptores de tensão muscular em membros de passeio de crustáceos.

Propriocepção e tensão Receptores em Caranguejo Limbs: Exercícios Laboratório Student

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons ...

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25.0K visualizações.  University of Kentucky.  Técnicas fisiológicas e anatômicas são demonstrados para lidar com a função e estrutura para proprioceptores articulares e receptores de tensão muscular em membros de passeio de crustáceos. 