The authors would like to acknowledge Jonathan Chou, MD for his assistance on preparation and editing of the final manuscript and Wenzhong Liu for the OCT data. We would also like to acknowledge support from the Macula Society Research Grant (AAF), support from an unrestricted grant to Northwestern University from Research to Prevent Blindness, Inc., New York, NY, USA, and support from NIH-EY019951.

מטופלים כל בעלי החיים בהתאם למדריך של הטיפול והשימוש בחי מעבדה 2,013 Edition, האגודה למחקר בחזון ורפואת עיניים (ארוו) דוח לשימוש בבעלי חיים ברפואת עיניים ומחקר חזון, וכפי שאושר על ידי בעלי החיים המוסדיים טיפול ושימוש הוועדה לאוניברסיטת נורת&#39;ווסטרן. הערה: ההליך הבא יכול להיעשות לגמרי עם מפעיל אחד; עם זאת, הוא הרבה נערך בצורה יעילה יותר עם שני מפעילים עם המשימות לפצל בהתאם. 1. הכינו תחנת לייזר וטרום-לייזר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את הלייזר ומנורת סדק שבו זה יכול להיות נגיש בקלות. הפעל לייזר ומוגדר מראש נקבע פרמטרים (למשל 75 גודל מיקרומטר נקודה, 100 כוח mW, 100 משך אלפיות שני). זהירות: ודא מפעיל לובש כל סימני ציוד לבעלי החיים ובטיחות לייזר מגן אישי ובטיחות לייזר רלוונטית מוצגים מחוץ לחדר ההליך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני השימוש בכל חיות ניסוי, למצוא פרמטרים אידיאליים באמצעות כיול, עכבר הלא ניסיוני. פרמטרים לייזר יהיו תלויים בליזר משמש. פרמטרים אידיאליים מוגדרים על ידי הגדרת כוח הלייזר הנמוכה ביותר שאופן עקבי גורמת היווצרות &quot;בועה&quot; כשהתמקד כראוי. ראה וידאו לדוגמא של נגע עם היווצרות &quot;בועה&quot; נכונה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את התחנה מראש הלייזר כך שהרדמה, בעלי חיים חמים, מגבוני רקמות, וכל טיפות העיניים (Tropicamide, Tetracaine, ודמעות מלאכותיות) בקלות בהישג יד למפעיל. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא חיה שחמה הוא מראש מחומם לטמפרטורה לתקן (37 ° C) לפני הזרקת חומר הרדמה לעכבר ראשון כדי להימנע מהיפותרמיה המושרית הרדמה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח שלב עכבר על חם כך שהוא יכול לשמור על חום ולהישאר חם פעם הליך לייזר מתחיל. </li></ol> 2. עכבר הרדמה והכנה טרום-לייזר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני להזריקing הרדמה, לבדוק את העין macroscopically על מנת להבטיח שאין לה עיוותים או הפרעות שלהפחית בהירות קרנית (למשל קטרקט). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול עכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא משקל, מין, ומספר תעודת זהות של בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במשקל, לחשב את הכמות מתאימה של הרדמה לשימוש המבוסס על הנחיות שניתנו על ידי מוסד (100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין הידרוכלוריד למשל, 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine או 250 מ&quot;ג / קילוגרם tribromoethanol; לעכבר 20 גרם להזריק 0.20 מיליליטר xylazine / קוקטייל קטמין או 0.25 מיליליטר של tribromoethanol). יש טבלה של מינונים מחושבים מראש למשקל במרווחים של 1 גרם במטרה לצמצם טעויות מתמטיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורף עכבר ולהזריק חומר הרדמה המבוססים על חישובי intraperitoneally בשלב 2.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר על בעלי חיים חמים ולהמתין עד עכבר הוא מורדם לחלוטין על ידי בדיקת רפלקס הדוושה באמצעות קמצוץ הבוהן (כ 3-5 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפשיל רקמה לנגב ולהגן על אזור האף של העכבר כדי למנוע aspiratיון של גליל-מנוזל. עכבר מתגלגל על ​​הצד שלה ומניח את ירידה (כ -30 μl) של hydrochloride tetracaine לכל עין להרדמה מקומית. חכה 2 דקות לפתרון ייכנס לתוקף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 2.7 עם ירידה של Tropicamide האקטואלי אחת להתרחבות אישונים. לחלופין, להשתמש hydrochloride phenylephrine (2.5%) להתרחבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה 2 דקות לפתרונות לתוקף; לשמור על בעלי חיים על חם בזמן הזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הזמן מתאים שחלף, המקום במהירות העכבר על הבמה העכבר ולמקם את הבמה על שאר סנטר של מנורת סדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מנורת סדק לבהירות האור הנמוכה ביותר ולבדוק את מידת התרחבות אישונים. אם התלמיד אינו מספק מורחב (כ 2.5-3 מ&quot;מ), לחזור לעכבר חיה חמה ולחכות. לחלופין, לנהל עוד טיפה של Tropicamide. ברגע שהעין היא מספיק מורחבת, המשך להליך לייזר. </li></ol> 3. לייזר נוהל הערה: ודא p האחרersons בחדר ללבוש משקפי מגן כאשר ממנורת סדק עין-חתיכה-מוגן לייזר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את המיקום של עכבר על עכבר השלבים, כך שהוא ממוקם באופן אידיאלי להדמיה של עצב ראייה (ראה 3.1.2). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוון את העכבר למחזיק בה כך שזה טמון במאוזן, מאונך לשסף את מנורת קרן, עם הראש בצד אחד וזנב בקצה השני. מיקום אידיאלי עכבר יגרום להדמיה עצב ראייה הרבה יותר קלה ברגע שהכיסוי להחליק מיושם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעט להפוך את העכבר כך שהוא בזווית של ° ~ 170 עם הראש קרוב יותר למפעיל לייזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא העכבר כי הוא קרוב ככל האפשר לשסף את המנורה, אך עדיין במצב שבו הוא יציב ובו ידו של המפעיל תהיה מספיק מקום למניפולציה עדינה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר העכבר ממוקם באופן אידיאלי, למקם ירידה של פתרון דמעה מלאכותי אחד על coverslip זכוכית x 25 מ&quot;מ 25 מ&quot;מ. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים טיפה אחת של פתרון דמעה מלאכותי על מול של העכברעין osite - יבטיח עין זה התייבשות והיווצרות קטרקט עיכוב עזרה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק פינת coverslip בין אצבעות אגודל ומצביע; עמדה כך שהזכוכית נדחקה בין טיפים של שני האצבעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לעטוף שלוש אצבעות שנותרו סביב גופו של בעל החיים לתמיכה וייצוב יד. מיקום יד כדי שcoverslip הזכוכית ניתן להציב בקלות בעין של העכבר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקפד שפרק כף היד הוא התייצב על משטח יציב כדי להפחית יד רעד. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שמצב יציב מתקבל, לחץ בזהירות coverslip זכוכית (עם ירידה של דמעה מלאכותית עדיין דבקה) על העין של העכבר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא coverslip ממוקם כניצב ככל האפשר לקרן הלייזר על מנת למנוע פיזור קרן לייזר או השתקפות. Coverslip פועל כעדשת מגע כדי לשטח את הקרנית. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסתכל דרך מנורת סדק ועם יד חופשית לעבור להתמקד UNTניתן דמיין רשתית il. הרשתית תהיה בצבע בהיר-צהוב / אדום בהתאם למיקום דמיין, כלי ברורים, אדומים יהיו גלויים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט ובזהירות לתפעל את הראש עכבר ו / או coverslip עד לדמיין את עצב הראייה. עצב הראייה יהיה בצבע צהוב עם כלי מרובים קורנים ממנו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהמפעיל אישר הדמיה של עצב ראייה, להפעיל לייזר מתמקד קרן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שקרן לייזר הופעלה, לתמרן לייזר מתמקד קרן למיקום רצוי (כ קוטר דיסק 1 מעצב הראייה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרן לייזר להתמקד על הרשתית של העין קרקעית העין. מיקוד נכון מושגת על ידי בעל קרן לייזר החדה והברורה ביותר. אם מכוון את האלומה נראה סגלגל או מחוץ לפוקוס, פוקוס לעבור מנורת סדק או coverslip זכוכית מחדש את העמדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהקרן מכוונת היא על הרשתית ממוקדת, ליזום ממשל לייזר באמצעות הדק הרגל של הלייזר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקפד להימנע כלי רשתית כדי למנוע התוך עיני שהואmorrhage. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צפה להופעתו של בועה מייד לאחר מתן לייזר. קווי המתאר של יריית הלייזר צריך להיות ברורים ולא מעורפלים בכל דרך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם ירה הלייזר אינו גורם להיווצרות בועה, או אזור של השפעה נראה מעורפל (מראה מעונן עם גבול מעגלי מעורפל לעומת גבול ברור ומוגדר בצורה חדה של השפעה מוצלחת), או אם דימום נראה לאחר מתן לייזר, לא כוללים נגעים אלה לניתוח בעתיד. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 3.10-3.12 לכל העמדות הרצויות CNV (בדרך כלל בגיל 3, 6, 9, ו -12 עמדות שעה סביב עצב ראייה). אם זירוזי לייזר מוחלים על כ אותו מרחק מעצב ראייה, ולמקד לא צריך להיות הכרחי. עם זאת, בשל העקמומיות החזקה של העין העכבר ווריאציות קטנות שעשויות להתקיים ברשתית, ממקד מחדש את הקרן עשויה להיות נחוץ בין ממשלי לייזר ברציפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא במחברת המיקום ותוצאה של דוארממשל לייזר אח ירייה ותוצאה (מוצלח, מעורפל, דימום, וכו &#39;.) של כל ירייה מנוהלת לעין. הקפד למקם את הלייזר במצב המתנה כאשר אינו בשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על 3.1-3.14 לעין אחרת של העכבר, במידת הצורך, תוך שימוש ביד הנגדית לייצוב וcoverslip חדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי הכל יריות הלייזר הרצוי מנוהלות, לכבות את הלייזר ומנורת סדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בטל עכבר coverslip ומניחים על חם להתאוששות מן ההרדמה. Macroscopically לבדוק עין לכל פגיעה ומניח ירידה של פתרון דמעה מלאכותי כדי לשמור על עין התייבשות ואפשרות למנוע התפתחות קטרקט בעתיד. ברגע שהעכבר מתאושש מהרדמה, לחזור לכלוב. </li></ol><table fo:keep-together.within-page="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> Avertin </td><td> Avertin </td><td> Avertin </td><td> XYL / KET </td><td> XYL / KET </td></tr><tr><td> עכבר משקל (גרם) </td><td> מנה (מ&quot;ג / קילוגרם) </td><tד&gt; ריכוז פתרון (מ&quot;ג / מיליליטר) </td><td> מנה הרדמה (מיליליטר) </td><td> מנה (מ&quot;ג / קילוגרם) </td><td> מנה הרדמה (מיליליטר) </td></tr><tr><td> 15 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .1875 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.15 </td></tr><tr><td> 16 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.2 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.16 </td></tr><tr><td> 17 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .2125 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.17 </td></tr><tr><td> 18 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.225 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.18 </td></tr><tr><td> 19 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .2375 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.19 </td></tr><tr><td> 20 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.25</td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 21 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .2625 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.21 </td></tr><tr><td> 22 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.275 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.22 </td></tr><tr><td> 23 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .2875 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.23 </td></tr><tr><td> 24 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.3 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.24 </td></tr><tr><td> 25 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .3125 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.25 </td></tr><tr><td> 26 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.325 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.26 </td></tr><tr><td> 27 </td><td> 250 </td><tד&gt; 20 </td><td> .3375 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.27 </td></tr><tr><td> 28 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.35 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.28 </td></tr><tr><td> 29 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> .3625 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.29 </td></tr><tr><td> 30 </td><td> 250 </td><td> 20 </td><td> 0.375 </td><td> 100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין; 10 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine </td><td> 0.3 </td></tr></tbody></table> טבלת 1: תרשים XyIKet מינון.

<ol>
	<li>Bressler, N. M., Bressler, S. B., Fine, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+related+macular+degeneration.">Age related macular degeneration.</a> Surv Ophthalmol. 32, 375-413 (1988).</li><li>Congdon, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Causes+and+Prevalence+of+Visual+Impairment+Among+Adults+in+the+United+States.">Causes and Prevalence of Visual Impairment Among Adults in the United States.</a> Arch Ophthalmol. 122, 477-485 (2004).</li><li>Jager, R. D., Mieler, W. F., Miller, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-Related+Macular+Degeneration.">Age-Related Macular Degeneration.</a> NEJM. 358, 2606-2617 (2008).</li><li>Poor, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+of+the+Mouse+Model+of+Choroidal+Neovascularization+Induced+by+Laser+Photocoagulation.">Reliability of the Mouse Model of Choroidal Neovascularization Induced by Laser Photocoagulation.</a> IOVS. 55, 6525-6534 (2014).</li><li>Ryan, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+an+experimental+model+of+subretinal+neovascularization+in+disciform+macular+degeneration.">The development of an experimental model of subretinal neovascularization in disciform macular degeneration.</a> Trans Am Ophthalmol Soc. 77, 707-745 (1979).</li><li>Miller, H., Miller, B., Ishibashi, T., Ryan, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+laser+induced+choroidal+subretinal+neovascularization.">Pathogenesis of laser induced choroidal subretinal neovascularization.</a> IOVS. 31, 899-908 (1990).</li><li>Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+age+related+macular+degeneration.">Animal models of age related macular degeneration.</a> Molr Aspects Mede. 33, 487-509 (2012).</li><li>Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Choroidal+and+Retinal+Neovascularization.">Animal Models of Choroidal and Retinal Neovascularization.</a> Prog Retin Eye Res. 29, 500-519 (2010).</li><li>Zeiss, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=REVIEW+PAPER:+Animals+as+Models+of+Age+Related+Macular+Degeneration+An+Imperfect+Measure+of+the+Truth.">REVIEW PAPER: Animals as Models of Age Related Macular Degeneration An Imperfect Measure of the Truth.</a> Vet Pathol Online. 47, 396-413 (2010).</li><li>Tobe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+Disruption+of+the+FGF2+Gene+Does+Not+Prevent+Choroidal+Neovascularization+in+a+Murine+Model.">Targeted Disruption of the FGF2 Gene Does Not Prevent Choroidal Neovascularization in a Murine Model.</a> Am J Pathol. 153, 1641-1646 (1998).</li><li>He, L., Marneros, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+Are+Essential+for+the+Early+Wound+Healing+Response+and+the+Formation+of+a+Fibrovascular+Scar.">Macrophages Are Essential for the Early Wound Healing Response and the Formation of a Fibrovascular Scar.</a> Am J Pathol. 182, 2407-2417 (2013).</li><li>Hoerster, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+ex+vivo+characterization+of+laser+induced+choroidal+neovascularization+variability+in+mice.">In vivo and ex vivo characterization of laser induced choroidal neovascularization variability in mice.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 250, 1579-1586 (2012).</li><li>Jawad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Macrophage+Class+A+Scavenger+Receptors+in+a+Laser+Induced+Murine+Choroidal+Neovascularization+Model.">The Role of Macrophage Class A Scavenger Receptors in a Laser Induced Murine Choroidal Neovascularization Model.</a> IOVS. 54, 5959-5970 (2013).</li><li>Lambert, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+induced+choroidal+neovascularization+model+to+study+age+related+macular+degeneration+in+mice.">Laser induced choroidal neovascularization model to study age related macular degeneration in mice.</a> Nat Protocols. 8, 2197-2211 (2013).</li><li>Sakurai, E., Anand, A., Ambati, B. K., van Rooijen, N., Ambati, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+Depletion+Inhibits+Experimental+Choroidal+Neovascularization.">Macrophage Depletion Inhibits Experimental Choroidal Neovascularization.</a> IOVS. 44, 3578-3585 (2003).</li><li>Espinosa Heidmann, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+Depletion+Diminishes+Lesion+Size+and+Severity+in+Experimental+Choroidal+Neovascularization.">Macrophage Depletion Diminishes Lesion Size and Severity in Experimental Choroidal Neovascularization.</a> IOVS. 44, 3586-3592 (2003).</li><li>Giani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Evaluation+of+Laser+Induced+Choroidal+Neovascularization+Using+Spectral+Domain+Optical+Coherence+Tomography.">In Vivo Evaluation of Laser Induced Choroidal Neovascularization Using Spectral Domain Optical Coherence Tomography.</a> IOVS. 52, 3880-3887 (2011).</li><li>Kwak, N., Okamoto, N., Wood, J. M., Campochiaro, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF+Is+Major+Stimulator+in+Model+of+Choroidal+Neovascularization.">VEGF Is Major Stimulator in Model of Choroidal Neovascularization.</a> IOVS. 41, 3158-3164 (2000).</li><li>Reich, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+interfering+RNA+(siRNA)+targeting+VEGF+effectively+inhibits+ocular+neovascularization+in+a+mouse+model.">Small interfering RNA (siRNA) targeting VEGF effectively inhibits ocular neovascularization in a mouse model.</a> Molr Vis. 9, 210-216 (2003).</li><li>Baffi, J., Byrnes, G., Chan, C. C., Csaky, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choroidal+Neovascularization+in+the+Rat+Induced+by+Adenovirus+Mediated+Expression+of+Vascular+Endothelial+Growth+Factor.">Choroidal Neovascularization in the Rat Induced by Adenovirus Mediated Expression of Vascular Endothelial Growth Factor.</a> IOVS. 41, 3582-3589 (2000).</li><li>Claybon, A., Bishop, A. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+a+Mouse+Eye+for+a+Whole+Mount+of+the+Retinal+Pigment+Epithelium.">Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium.</a> JoVE. , 2563 (2011).</li><li>Espinosa-Heidmann, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+as+an+Independent+Risk+Factor+for+Severity+of+Experimental+Choroidal+Neovascularization.">Age as an Independent Risk Factor for Severity of Experimental Choroidal Neovascularization.</a> IOVS. 43, 1567-1573 (2002).</li><li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+and+Optimization+of+Standards+for+a+Preclinical+Animal+Test+Model+of+Laser+Induced+Choroidal+Neovascularization.">Improvement and Optimization of Standards for a Preclinical Animal Test Model of Laser Induced Choroidal Neovascularization.</a> PLoS ONE. 9, e94743 (2014).</li><li>Weinstock, M., Stewart, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occurrence+in+rodents+of+reversible+drug+induced+opacities+of+the+lens.">Occurrence in rodents of reversible drug induced opacities of the lens.</a> British J Ophthalmol. 45, 408-414 (1961).</li><li>Ridder III, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Causes+of+Cataract+Development+in+Anesthetized+Mice.">Causes of Cataract Development in Anesthetized Mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li></ol>

The authors declare they have no competing financial interests.

ישנם גורמים רבים שיכולים להשפיע על אספקת לייזר והתפתחות נגע CNV תוצאה לאחר לייזר אינדוקציה מוצלחת. גורמים אלה צריכים להיות מבוקרים ולטופלו על מנת לקבל את התוצאות הכי אמינות. הרלוונטי ביותר של גורמים אלה הם בחירת עכבר (גנוטיפ, גיל, ומין), בחירת חומר הרדמה, והגדרות לייזר. ...

ניוון מקולרי (AMD) הקשורות לגיל הוא אחד הגורמים המובילים לעיוורון באנשים מעל גיל 50 1-3. AMD יכול להיות מסווג לשתי צורות: מכולה (&quot;יבש&quot;) AMD וneovascular (&quot;רטוב&quot;) AMD. לשעבר מתאפיין בניוון גיאוגרפי של אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE), choriocapillaris, וקולטניים אור, ואילו האחרונים מאופיין בפלישה של כלי חריגים מדמה העין לתוך שכבות רשתית החיצוניות גורמים לדליפה, דימום, וסיסטיק, וסופו של דבר מוביל לעיוורון 1,2. של שתי צורות, AMD neovascular מהווה את רוב הפסד 1 חזון. למרבה המזל, יש טופס זה אפשרויות ניהול רבות יעילות תרופתיות, ואילו עמיתו מכולה שלה כרגע אין מוכח טיפולים רפואיים 3. יתר על כן, בגלל צורת neovascular כבר בקלות מחדש נכנעה במודל חיה, זה כבר יותר נרחב נגיש לבסיסימחקר MD לחקור את המנגנונים פתולוגיים הבסיסיים כדי לפתח טיפולים חדשניים 4. מודל החיה הראשון של neovascularization choroidal הניסיוני (CNV) פותח על ידי אל ריאן ואח. בפרימטים לא אנושיים 5. קרע זה מודל מושרה של הקרום של ברוך באמצעות photocoagulation לייזר, מה שגרם לתגובה דלקתית מקומית וכתוצאה מכך אנגיוגנזה דומה לזה שראה בAMD neovascular. ההתקדמות ההיסטופתולוגיים של האינדוקציה הודעה לייזר-אנגיוגנזה נמצאה לחקות neovascular AMD, אשר אישר את תקפות המודל 6. פרימטים לא אנושיים להציע את האנטומיה דומה ביותר לבני אדם, אך למרבה הצער, הם יקרים כדי לשמור, לא ניתן בקלות מניפולציות גנטית, ויש לי כמובן זמן איטי של התקדמות המחלה 7. Contrastingly, מודלים של מכרסמים הם הרבה יותר יעיל וחסכוני לשמירה, ניתן להשפיע גנטי בקלות יחסית, ויש לי הרבה יותר מהר couRSE של התקדמות מחלה (יכולים להיות שנערכו ניסויים בסולם של שבועות זמן מול חודשים). ניסויים אלה צריכים להתנהל רק במכרסמים פיגמנט כקשה מאוד לדמיין בבעלי החיים לבקן. מודל CNV מושרה לייזר עכבר, פותח לראשונה על ידי קבוצת Campochiaro בסוף שנתי ה -90 10, גדל להיות מודל החיה הדומיננטי ברוב המחקרים שנעשה לאחרונה 11-16. בשל פתוגנזה המורכבת ועדיין לא ברורה של CNV, מודל הלייזר יושם בכל ההיבטים של מחקר רטוב AMD החל חקר המנגנונים המולקולריים הנהיגה אנגיוגנזה להערכת שיטות טיפול חדשות לשימוש בבני אדם בעתיד. לדוגמא, סקוראי et al. ואספינוסה-Heidmann et al. השתמש במודל הלייזר כדי לחקור את ההשפעה של מקרופאגים על הפיתוח של CNV באמצעות עכברים מהונדסים וטיפולים תרופתיים דלדול 15, 16. גיאני et al. וHoerster et al. טומוגרפיה אופטית קוהרנטיות משומשת (אוקטובר) לתמונת CNV במאמץ לאפיין את ההתקדמות של CNV ולהשוות את הממצאים היסטופתולוגיות לממצאים ראו בהדמית אוקטובר 12,17 מושרה לייזר. לבסוף, מחקרים שכלל הזרקת זגוגית של תרופות אנטי-angiogenic שימשו כדרישות קדם לניסויים בבני אדם והיו חיוניים בפיתוח הדור הראשון של תרופות אנטי-VEGF המשמשות בניהול neovascular היום 10,18,19 AMD. מודלים חלופיים לCNV הניסיוני לנצל שיטות ניתוחיות לגרום CNV. הליך זה כרוך הזרקת חומרים פרו-angiogenic (למשל וקטורים ויראליים רקומביננטי ביתר VEGF, הזרקת subretinal של תאי הרשתית ו / או חרוזי פוליסטירן) לחקות את ביטוי VEGF המוגבר ראה בAMD neovascular, במטרה לגרום לאנגיוגנזה 8,20. עם זאת, שיטה זו מניבה שכיחות נמוכה יותר של אופן דרסטי neovascularization; מחקרים אלה הראו כי CNV בעכברי C57 / BL6 מתרחש ב- 31% מזריקות לעומת 70% שיעור ההצלחה ~ ראה בשיטת photocoagulation הלייזר באותו הזן של עכברים 8,14. מסיבות אלה, ובהתחשב ביתרונות של שימוש במכרסמים לעומת פרימטים לא אנושיים, מודל העכבר של CNV מושרה לייזר הפך מודל החיה הסטנדרטי של CNV לניסויי מחקר AMD neovascular ביותר 8. עין העכבר היא רקמה זעירה, עדינה לעבוד איתו. תמרון של העין כדי להמחיש את הרשתית הוא קשה ודורש הרבה תרגול עד השליטה מושגת. משימה זו היא מסובכת על ידי העובדה שהוא חייב להיות למד עם דומיננטי והיד הלא דומיננטית. יתר על כן, לאחר התנועות העדינות הנדרשות כדי להמחיש את הרשתית כבר למדו, התיאום בין שני הידיים ודוושת רגל הפעלת הלייזר הם חשובים. במאמר זה, אנו מבקשים לזקק את האתגרים של למידה כל המניפולציות הפיזיות מעורבות בproc CNV מושרה הלייזרedure למדריך שיעזור למפעילים להשיג הצלחה מהירה עם המודל הזה.

<table><tbody><tr><td>532 nm (green) argon ophthalmic laser</td><td>IRIDEX</td><td>GLx</td><td>any ophthalmic 532 nm (green) argon laser can be used</td></tr><tr><td>slit lamp</td><td>Carl Zeiss</td><td>30SL-M</td><td>any slit lamp can be used as long as it is compatible with the laser</td></tr><tr><td>tribromoethanol</td><td>Sigma</td><td>T48402-25G</td><td>used to make anesthetic</td></tr><tr><td>tert-amyl alcohol</td><td>Sigma</td><td>152463-1L</td><td>used to make anesthetic</td></tr><tr><td>amber glass vials + septa</td><td>Wheaton</td><td>WH-223696</td><td>tribromoethanol storage</td></tr><tr><td>tissue wipes</td><td>VWR</td><td>82003-820</td><td>miscellaneous&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>1% Tropicamide</td><td>Falcon Pharmaceuticals</td><td>RXD2974251</td><td>pupillary dilation</td></tr><tr><td>0.5% Tetracaine hydrochloride</td><td>Alcon</td><td>&amp;nbsp;0065-0741-12</td><td>topical anesthesia</td></tr><tr><td>artificial tears</td><td>Alcon</td><td>&amp;nbsp;58768-788-25</td><td>hydration</td></tr><tr><td>heat therapy pump (for animal warming)</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td>used to maintain animal body temp</td></tr><tr><td>warming pad</td><td>Kent Scientific</td><td>TPZ-0510EA</td><td>maintains animal body temperature</td></tr><tr><td>30 G insulin needles</td><td>BD</td><td>328418</td><td>IP anesthesia injection</td></tr><tr><td>scale</td><td>American Weigh Scale</td><td>AWS-1KG-BLK</td><td>mouse weighing</td></tr><tr><td>cover slip (25 mm x 25 mm)</td><td>VWR</td><td>48366089</td><td>flatten cornea to visualize mouse retina</td></tr><tr><td>xylazine</td><td>obtained from institution</td><td>obtained from institution</td><td>anesthesia</td></tr><tr><td>ketamine</td><td>obtained from institution</td><td>obtained from institution</td><td>anesthesia</td></tr><tr><td>Volocity</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>used for volumetric re-construction</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>National Institutes of Health</td><td></td><td>used for image analysis</td></tr></tbody></table>

a mouse model for laser-induced choroidal neovascularization

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) research. By administering targeted laser injury to the RPE and Bruch&#8217;s membrane, the procedure induces angiogenesis, modeling the hallmark pathology observed in neovascular AMD. 
First developed in non-human primates, the laser-induced CNV model has come to be implemented into many other species, the most recent of which being the mouse. Mouse experiments are advantageously more cost-effective, experiments can be executed on a much faster timeline, and they allow the use of various transgenic models. The miniature size of the mouse eye, however, poses a particular challenge when performing the procedure. Manipulation of the eye to visualize the retina requires practice of fine dexterity skills as well as simultaneous hand-eye-foot coordination to operate the laser. However, once mastered, the model can be applied to study many aspects of neovascular AMD such as molecular mechanisms, the effect of genetic manipulations, and drug treatment effects. 
The laser-induced CNV model, though useful, is not a perfect model of the disease. The wild-type mouse eye is otherwise healthy, and the chorio-retinal environment does not mimic the pathologic changes in human AMD. Furthermore, injury-induced angiogenesis does not reflect the same pathways as angiogenesis occurring in an age-related and chronic disease state as in AMD.
Despite its shortcomings, the laser-induced CNV model is one of the best methods currently available to study the debilitating pathology of neovascular AMD. Its implementation has led to a deeper understanding of the pathogenesis of AMD, as well as contributing to the development of many of the AMD therapies currently available.

כימות של נגעי CNV יכולה להתבצע באמצעות ניתוח של choroids רכוב השטוח באמצעות מכתים immunofluorescence לתייג כלי CNV. שתי שיטות הנפוצות ביותר המועסקות של הכנת רקמה הן תיוג FITC-dextran, נעשה באמצעות זלוף מייד לפני הקרבת בעלי חיים, או חיסוני מכתים שלאחר המוות עם סמן תא אנדותל. שתי שיטות אלה תו...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization at JoVE.com

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

מודל עכבר לneovascularization Choroidal מושרה לייזר

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

a-mouse-model-for-laser-induced-choroidal-neovascularization

Research

JoVE Journal

Medicine

17.6K Views.  Northwestern University Feinberg School of Medicine. Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

Video: A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

Laser-Induced Chronic Ocular Hypertension Model on SD Rats

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular hypertension is one of the well established animal models. This video demonstrates how to induce ocular hypertension by Argon laser photocoagulation in rat.

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular hypertension is one of the well established animal models. This video demonstrates how to induce ocular hypertension by Argon laser photocoagulation in rat.

לייזר המושרה Ocular יתר לחץ דם כרוני דגם SD על חולדות

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular ...

Biology

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model of ocular hypertension to mimic human high-tension glaucoma. Here laser illumination is applied to the corneal limbus to photocoagulate the aqueous outflow, inducing angle closure. The changes of IOP are monitored using a rebound tonometer before and after the laser treatment. An optomotor behavioral test is used to measure corresponding changes in visual capacity. The representative result from one mouse which developed sustained IOP elevation after laser illumination is shown. A decreased visual acuity and contrast sensitivity is observed in this ocular hypertensive mouse. Together, our study introduces a valuable model system to investigate neuronal degeneration and the underlying molecular mechanisms in glaucomatous mice.

Chronic ocular hypertension is induced using laser photocoagulation of the trabecular meshwork in mouse eyes. The intraocular pressure (IOP) is elevated for several months after laser treatment. The decrease of visual acuity and contrast sensitivity of experimental animals are monitored using the optomotor test.

מודל עכבר לייזר המושרה של לחץ תוך עיני מוגבר כרוני לאפיון פגמים חזותיים

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the cornea, which can be caused by trauma, keratoplasty or infectious disease, breaks down the so called &lsquo;angiogenic privilege' of the cornea and forms the basis of multiple visual pathologies that may even lead to blindness. Although there are several treatment options available, the fundamental medical need presented by corneal neovascular pathologies remains unmet. In order to develop safe, effective, and targeted therapies, a reliable model of corneal NV and pharmacological intervention is required. Here, we describe an alkali-burn injury corneal neovascularization model in the mouse. This protocol provides a method for the application of a controlled alkali-burn injury to the cornea, administration of a pharmacological compound of interest, and visualization of the result. This method could prove instrumental for studying the mechanisms and opportunities for intervention in corneal NV and other neovascular disorders.

Neovascularization (NV) of the cornea can complicate multiple visual pathologies. Utilizing a controlled, alkali-burn injury model, a quantifiable level of corneal NV can be produced for mechanistic study of corneal NV and evaluation of potential therapies for neovascular disorders.

פגיעה דגם אלקלי לשרוף של הקרנית neovascularization בעכבר

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the ...

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, difficulties in observing posterior choroidal melanoma in vivo limit tumor location and growth evaluation in real-time. The approach described here optimizes techniques for establishing choroidal melanoma in mice via a multi-step sub-choroidal B16LS9 cell injection procedure. To enable precision in injecting into the small dimensions of the mouse uvea, the complete procedure is performed under a microscope. First, a conjunctival peritomy is formed in the dorsal-temporal area of the eye. Then, a tract into the sub-choroidal space is created by inserting a needle through the exposed sclera. This is followed by the insertion of a blunt needle into the tract and the injection of melanoma cells into the choroid. Immediately after injection, noninvasive optical coherence tomography (OCT) imaging is utilized to determine tumor location and progress. Retinal detachment is evaluated as a predictor of tumor site and size. The presented method enables the reproducible induction of choroid-localized melanoma in mice and the live imaging of tumor growth evaluation. As such, it provides a valuable tool for studying intraocular tumors.

Implantation and Evaluation of Melanoma in the Murine Choroid via Optical Coherence Tomography

The present protocol describes the implantation and evaluation of melanoma in the murine choroid utilizing optical coherence tomography.

השתלה והערכה של מלנומה בכורואיד מורין באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית

Establishing experimental choroidal melanoma models is challenging in terms of the ability to induce tumors at the correct localization. In addition, ...

Cancer Research

In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model

Laser-induced choroidal neovascularization (CNV) is a well-established model to mimic the wet form of age-related macular degeneration (AMD). In this protocol, we aim to guide the reader not simply through the technical considerations of generating laser-induced lesions to trigger neovascular processes, but rather focus on the powerful information that can be obtained from multimodal longitudinal in vivo imaging throughout the follow-up period.
The laser-induced mouse CNV model was generated by a diode laser administration. Multimodal in vivo imaging techniques were used to monitor CNV induction, progression and regression. First, spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) was performed immediately after the lasering to verify a break of Bruch&#39;s membrane. Subsequent in vivo imaging using fluorescein angiography (FA) confirmed successful damage of Bruch&#39;s membrane from serial images acquired at the choroidal level. Longitudinal follow-up of CNV proliferation and regression on days 5, 10, and 14 after the lasering was performed using both SD-OCT and FA. Simple and reliable grading of leaky CNV leasions from FA images is&#160;presented. Automated segmentation for measurement of total retinal thickness, combined with manual caliber application for measurement of retinal thickness at CNV sites, allow unbiased evaluation of the presence of edema. Finally, histological verification of CNV is performed using isolectin GS-IB4 staining on choroidal flatmounts. The staining is thresholded, and the isolectin-positive area is calculated with ImageJ.
This protocol is especially useful in therapeutics studies requiring high-throughput-like screening of CNV pathology as it allows fast, multimodal, and reliable classification of CNV pathology and retinal edema. In addition, high resolution SD-OCT enables the recording of other pathological hallmarks, such as the accumulation of subretinal or intraretinal fluid. However, this method does not provide a possibility to automate CNV volume analysis from SD-OCT images, which has to be performed manually.

In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model

Here, we present the usefulness of longitudinal in vivo imaging in the follow-up of morphological changes of laser-induced choroidal neovascularization in mice.

אין ויוו הדמיה עם מודאלים מרובים וניתוח של עכבר לייזר המושרה חיבור כורוידאלית דגם

Laser-induced choroidal neovascularization (CNV) is a well-established model to mimic the wet form of age-related macular degeneration (AMD). In this ...

Neuroscience

Optimization of the Retinal Vein Occlusion Mouse Model to Limit Variability

Mouse models of retinal vein occlusion (RVO) are often used in ophthalmology to study hypoxic-ischemic injury in the neural retina. In this report, a detailed method pointing out critical steps is provided with recommendations for optimization to achieve consistently successful occlusion rates across different genetically modified mouse strains. The RVO mouse model consists primarily of the intravenous administration of a photosensitizer dye followed by laser photocoagulation using a retinal imaging microscope attached to an ophthalmic guided laser. Three variables were identified as determinants of occlusion consistency. By adjusting the wait time after rose bengal administration and balancing the baseline and experimental laser output, the variability across experiments can be limited and a higher success rate of occlusions achieved. This method can be used to study retinal diseases that are characterized by retinal edema and hypoxic-ischemic injury. Additionally, as this model induces vascular injury, it can also be applied to study the neurovasculature, neuronal death, and inflammation.

Here, we describe an optimized protocol for retinal vein occlusion using rose bengal and a laser-guided retinal imaging microscope system with recommendations to maximize its reproducibility in genetically modified strains.

אופטימיזציה של מודל העכבר לחסימת ורידים ברשתית כדי להגביל את השונות

Mouse models of retinal vein occlusion (RVO) are often used in ophthalmology to study hypoxic-ischemic injury in the neural retina. In this report, a ...

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images from which the retinal thickness can be calculated. Although OCT is widely used in clinical practice, its application in basic research is not as prevalent, especially in small animals such as mice. Because of the small size of their eyeballs, it is challenging to conduct fundus imaging examinations in mice. Therefore, a specialized retinal imaging system is required to accommodate OCT imaging on small animals. This article demonstrates a small-animal-specific system for OCT examination procedures and a detailed method for image analysis. The results of retinal OCT examination of very-low-density lipoprotein receptor (Vldlr) knockout mice and C57BL/6J mice are presented. The OCT images of C57BL/6J mice showed retinal layers, while those of Vldlr knockout mice showed subretinal neovascularization and retinal thinning. In summary, OCT examination could facilitate the noninvasive detection and measurement of retinopathy in mouse models.

Here, we describe an in vivo imaging technique using optical coherence tomography to facilitate the diagnosis and quantitative measurement of retinopathy in mice.

יישום טומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית למודל עכבר של רטינופתיה

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Image-Guided Optical Coherence Tomography to Assess Structural Changes in Rodent Retinas

Ocular diseases, such as age-related macular degeneration, glaucoma, retinitis pigmentosa, and uveitis, are always accompanied by retinal structural changes. These diseases affecting the fundus always exhibit typical abnormalities in certain cell types in the retina, including photoreceptor cells, retinal ganglion cells, cells in the retinal blood vessels, and cells in the choroidal vascular cells. Noninvasive, highly efficient, and adaptable imaging techniques are required for both clinical practice and basic research. Image-guided optical coherence tomography (OCT) satisfies these requirements because it combines fundus photography and high-resolution OCT, providing an accurate diagnosis of tiny lesions as well as important changes in the retinal architecture. This study details the procedures of data collection and data analysis for image-guided OCT and demonstrates its application in rodent models of choroidal neovascularization (CNV), optic nerve crush (ONC), light-induced retinal degeneration, and experimental autoimmune uveitis (EAU). This technique helps researchers in the eye field to identify rodent retinal structural changes conveniently, reliably, and tractably.

<meta charset="utf8"></head><body>טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה להערכת שינויים מבניים ברשתית המכרסמים

The protocol presented here details the procedures of data collection and data analysis for image-guided optical coherence tomography (OCT) and demonstrates its application in multiple rodent models of ocular diseases.

טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה להערכת שינויים מבניים ברשתית המכרסמים

Ocular diseases, such as age-related macular degeneration, glaucoma, retinitis pigmentosa, and uveitis, are always accompanied by retinal structural ...

אפיון סוגי נגעים שונים של CNV המושרה בלייזר בעכבר

Characterization of Vascular Morphology of Neovascular Age-Related Macular Degeneration by Indocyanine Green Angiography

Age-related macular degeneration (AMD) is a leading cause of blindness among older individuals, and its prevalence is rapidly increasing due to the aging population. Choroidal neovascularization (CNV) or wet AMD, which accounts for 10%-20% of all AMD cases, is responsible for an alarming 80%-90% of AMD-related blindness. Current anti-VEGF therapies show suboptimal responses in approximately 50% of patients. Resistance to anti-VEGF treatment in CNV patients is often associated with arteriolar CNV, while responders tend to have capillary CNV. While fluorescein angiography (FA) is commonly used to assess leakage patterns in wet AMD patients and animal models, it does not provide information about CNV vascular morphology (arteriolar CNV vs. capillary CNV). This protocol introduces the use of indocyanine green angiography (ICGA) to characterize lesion types in laser-induced CNV mouse models. This method is crucial for investigating the mechanisms and treatment strategies for anti-VEGF resistance in wet AMD. It is recommended to incorporate ICGA alongside FA for comprehensive assessment of both leakage and vascular features of CNV in mechanistic and therapeutic studies.

מחבר זרקור: התגברות על עמידות נגד VEGF באמצעות הערכה מתקדמת של מורפולוגיה וסקולרית בניאו-וסקולריזציה כורואידית

Currently, fluorescein angiography (FA) is the preferred method for identifying leakage patterns in animal models of choroidal neovascularization (CNV). However, FA does not provide information about vascular morphology. This protocol outlines the use of indocyanine green angiography (ICGA) to characterize different lesion types of laser-induced CNV in mouse models.

אפיון מורפולוגיה וסקולרית של ניוון מקולרי נאו-וסקולרי הקשור לגיל על ידי אינדוציאנין אנגיוגרפיה ירוקה

Age-related macular degeneration (AMD) is a leading cause of blindness among older individuals, and its prevalence is rapidly increasing due to the aging ...

מודל עכבר לneovascularization Choroidal מושרה לייזר

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

לייזר המושרה Ocular יתר לחץ דם כרוני דגם SD על חולדות

מודל עכבר לייזר המושרה של לחץ תוך עיני מוגבר כרוני לאפיון פגמים חזותיים

פגיעה דגם אלקלי לשרוף של הקרנית neovascularization בעכבר

השתלה והערכה של מלנומה בכורואיד מורין באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית

אין ויוו הדמיה עם מודאלים מרובים וניתוח של עכבר לייזר המושרה חיבור כורוידאלית דגם

אופטימיזציה של מודל העכבר לחסימת ורידים ברשתית כדי להגביל את השונות

יישום טומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית למודל עכבר של רטינופתיה

טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה להערכת שינויים מבניים ברשתית המכרסמים

טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה להערכת שינויים מבניים ברשתית המכרסמים

אפיון מורפולוגיה וסקולרית של ניוון מקולרי נאו-וסקולרי הקשור לגיל על ידי אינדוציאנין אנגיוגרפיה ירוקה