This work was supported by a National Heart, Lung, and Blood Institute grant 1RO1-HL-105296-01 (to D.E. Berkowitz) and an Australian Research Council Grant DP110101134 (to A. Avolio).

פרוטוקול זה אושר על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס. 1. הכנה של פתרונות, חומרים, ובעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון 300 מיקרוגרם / מיליליטר של phenylephrine (PE) ו -300 מיקרוגרם פתרון מיליליטר / של nitroprusside נתרן (SNP) בתמיסת מלח 0.9%. הכן פתרון הפרין-מלוח נפרד על ידי ערבוב 1 מיליליטר של 1,000 U / ml הפרין ל -10 מיליליטר של 0.9% מלח. הערה: סמים צריכים להיות בטמפרטורת חדר לפני השימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את הצנתר לעירוי תוך ורידי בסמים משני 30 G x ½ &quot;מזרקים וPE 10 צינורות פוליאתילן. כדי להפוך את הקטטר, להכניס מחט אחת לקצה אחד של הצינור. להסיר את חלק המחט של המזרק האחר ולהכניס את הקצה הקהה לקצה השני של הצינור. צרף את הצנתר למזרק 1 מ&quot;ל ולמלא את הקטטר עם פתרון הפרין-מלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכבר מקום באינדוקצית ההרדמה הקאמרית גontaining isoflurane 2-2.5% ב100% חמצן. השאר את העכבר בתא האינדוקציה עד שאינו מגיב לגירויים חיצוניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את העכבר מתא האינדוקציה ולמקם אותו על משטח רל המחומם (ECG). לשמור על בעלי החיים בisoflurane 2%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה וטרינר או תמיסת מלח לעיניו של בעל החיים כדי למנוע יובש במהלך ההליך. </li></ol> 2. החדרת הצנתר לוריד זנב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מאז ורידי הזנב ממוקמים רוחבי משני צידי הזנב, המקום חי על צידו לקבלת גישה טובה יותר. לאבטח את העכבר על כרית ECG עם קלטת. ודא שהחיה נשמר חמה כדי לקדם את ההתרחבות של ורידי הזנב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות פיסת צינורות silastic כחוסם עורק, לקשור החוסם עורק סביב בסיס הזנב. לקשור את חוסם עורקים חזק מספיק כדי לכווץ את הוורידים אבל לא מספיק כדי לנתק את זרימת הדם בעורקים. לאחר 2-3 דקות, הווריד צריך לתפוח החוצה ולהיות גלוי יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך בעדינות את הזנב המתוח. לכופף את הזנב בזווית ביד אחת ולהחזיק במקביל המחט לזנב עם האחר. פירס המחט בי הזנב כפוף דרך העור לתוך הווריד. דם ידחוף בחזרה לקטטר אם המחט מוחדרת לווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח טיפה אחת של דבק רקמות שבו המחט מוחדרת להבטחת קטטר. הסר את חוסם עורקים ולאשר patency על ידי הזרקת תמיסת מלח עם מעט התנגדות. </li></ol> 3. החדרת צנתר לחץ דם דרך עורק הירך <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את צנתר הלחץ לתוך מזרק 30 מיליליטר מלא במים מזוקקים ולחבר את הצנתר ליחידת בקרת לחץ. משרים את הצנתר במים, לחשמל, ל30-45 דקות במהלך הליכי ההקמה והניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את פרקדן בעלי החיים ואת קלטת כפותיו על כרית ECG. החל קרם מקריח על החזה ומעל לעורק הירך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה 3-5 דקות ולהסיר שמנת ושיער. הלהסיר שיער מoroughly החזה כדי למנוע חפצים במהלך אולטרסאונד. נגב את שני חזה ואזורי גפיים האחורי עם כרית טבולה להסיר קרם מקריח עודף. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים בסדר, עושה חתך בעור מעל המיקום של עורק הירך. לנתח דרך רקמת השומן תת עורי כדי לחשוף את עורק הירך. עורק הירך מכוסה חלקית על ידי הבטן. השתמש hemostats כדי להזיז את הבטן משם. שמור את הרקמות לחות באמצעות כיסויו גזה לחה או לחלופין נוטף מלוח על זה מעת לעת כדי למנוע רקמות מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מלקחיים עדינים, להפריד את העצב מחבילת וריד העורק. בעדינות לחדור מבעד לנדן סביב חבילת עורק הווריד כדי להפריד את העורק מהווריד. לעבור תפר אחד סביב העורק בסוף הפרוקסימלי ולמקם את שני תפרים בקצה הדיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מאובטח לקשור את התפר הדיסטלי ביותר לעצור את זרימת דם דיסטלי. השתמש hemostats למשוך את pתפר roximal להפסיק באופן זמני את זרימת דם לעורק הירך. השתמש microscissors לעשות חתך קטן לתוך עורק הירך. הפוך את החתך ליד קשר דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כייל את תוכנת רכישת נתונים לקטטר תוך שימוש בהגדרות הכיול ביחידת בקרת לחץ. לעבור יחידת בקרת לחץ חזרה לקריאה מתמר ולאזן את הקטטר הלחץ כך שתפוקות קטטר 0 mm Hg במזרק המים מלאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הצנתר לעורק הירך. פתח את החתך עם מלקחיים עדינים ביד אחת ולהכניס את ראש הצנתר לעורק ביד השנייה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קשר תפר האמצע סביב חוט קטטר כדי לאבטח את הצנתר לעורק. להירגע התפר הפרוקסימלי ולקדם את הקטטר קדימה אל אב העורקים בבטן. קשר התפר הפרוקסימלי כדי להבטיח עוד יותר את הצנתר וכדי למנוע דימום. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר בזהירות את משטח א.ק.ג. עם עכבר, קטטר לחץ ומלוח שלyringe לבמה ההדמיה אולטרסאונד. חבר את הקטטר לחץ דם ליחידת בקרת לחץ. מניחים את המזרק מלוח במשאבת המזרק. לאפשר לבעלי החיים וקטטר לאזן במשך 20 דקות. </li></ol> 4. מדידת קוטר אבי העורקים על פני טווח של לחץ דם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפחית isoflurane ל -1.5%. דמיינו את אב העורקים עולים longitudinally על B-מצב באמצעות תצוגת ציר זמן. הר מתמר על מערכת הרכבות כך שאותה התצוגה נשמרת לתקופת הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על המיינפריים אולטרסאונד, הצב את סמן M-המצב על הקטע של אב העורקים להיות במעקב. עקוב אחר השינוי בקוטר אב העורקים על מחזור הלב באמצעות M-mode. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשנות את המלוחים במזרק לפתרון PE ולמקם את המזרק לתוך משאבת המזרק. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא M-mode בלחץ אב העורקים בתחילת מחקר. להתחיל עירוי ב 360 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה ולהחדיר דקות 1 ללחץ אב העורקים להגיע לרמה. לעכבר 25 גרם, זה לעשותse משווה ל 30 μl / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את M-mode, ואז לעצור את העירוי, ולהמתין 2 דקות ללחץ דם לחזור לנקודת התחלה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קצב עירוי נמוך עד 240 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה. לעכבר 25 גרם, מינון זה משווה ל 20 μl / min. התחל עירוי, להחדיר דקות 1 ללחץ דם לרמה, ושיא M-mode. לעצור את העירוי, ולהמתין 2 דקות ללחץ דם לחזור לנקודת התחלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 4.4 עבור 120 מיקרוגרם / קילוגרם / דקת PE (10 μl / min לעכבר 25 גרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלף PE עם מי מלח ולהחדיר המלוחים בשיעור המשמש לעירוי 360 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה (30 μl / min לעכבר 25 גרם). להשרות במשך 2-3 דקות, עד שעירוי נוסף אינו מייצר עלייה בלחץ באב עורקים ולחץ חוזר לנקודת התחלה. חכה 5 דקות ללחץ הדם לייצוב בתחילת המחקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלף מלוח עם SNP. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא M-mode בלחץ אב העורקים בתחילת מחקר. להתחיל עירוי ב 240 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה (20 μl / min לעכבר 25 גרם)להשרות למשך 1 דקה. כאשר לחץ באב עורקים מגיע לרמה, להקליט M-mode. לעצור את העירוי ולחכות 2 דקות ללחץ דם לחזור לנקודת התחלה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קצב עירוי נמוך עד 120 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה (10 μl / min במשך 25 עכבר ז). התחל עירוי, להחדיר דקות 1 ללחץ דם לרמה, ושיא M-mode. להפסיק עירוי ולחכות 2 דקות ללחץ דם לחזור לנקודת התחלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 4.8 עבור 60 מיקרוגרם / קילוגרם / דקת SNP (5 μl / min במשך 25 עכבר ז). </li></ol> 5. הפסקת הניסוי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדימו, להגדיל את isoflurane עד 4%. כאשר נשימת הואט, בדרך כלל ב1-2 דקות, לחתוך את עצם החזה עם מספריים כדי לפתוח את חלל בית החזה ולחשוף את הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפוס את הלב עם מלקחיים בינוניים ולהעיף אותו מהגוף על ידי חיתוך באב העורקים עולים עם מספריים. </li></ol>

<ol>
	<li>Mitchell, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+arterial+stiffness+and+wave+reflection+with+advancing+age+in+healthy+men+and+women+-+The+Framingham+Heart+Study.">Changes in arterial stiffness and wave reflection with advancing age in healthy men and women - The Framingham Heart Study.</a> Hypertension. 43, 1239-1245 (2004).</li><li>Mahmud, A., Feely, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+smoking+on+arterial+stiffness+and+pulse+pressure+amplification.">Effect of smoking on arterial stiffness and pulse pressure amplification.</a> Hypertension. 41, 183-187 (2003).</li><li>Lehmann, E. D., Gosling, R. G., Sonksen, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+wall+compliance+in+diabetes.">Arterial wall compliance in diabetes.</a> Diabet Med. 9, 114-119 (1992).</li><li>Wang, Y. -. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+cardiac+functional+reserve+and+elevation+of+aortic+stiffness+in+hyperlipidemic+Yucatan+minipigs+with+systemic+and+coronary+atherosclerosis.">Reduction of cardiac functional reserve and elevation of aortic stiffness in hyperlipidemic Yucatan minipigs with systemic and coronary atherosclerosis.</a> Vasc. Pharmacol. 39, 69-76 (2002).</li><li>Ben-Shlomo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+Pulse+Wave+Velocity+Improves+Cardiovascular+Event+Prediction:+An+Individual+Participant+Meta-Analysis+of+Prospective+Data+From+17,635+Subjects.">Aortic Pulse Wave Velocity Improves Cardiovascular Event Prediction: An Individual Participant Meta-Analysis of Prospective Data From 17,635 Subjects.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 63, 636-646 (2014).</li><li>Mitchell, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+stiffness+and+cardiovascular+events:+the+Framingham+Heart+Study.">Arterial stiffness and cardiovascular events: the Framingham Heart Study.</a> Circulation. 121, 505-511 (2010).</li><li>Mattace-Raso, F. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+stiffness+and+risk+of+coronary+heart+disease+and+stroke:+the+Rotterdam+Study.">Arterial stiffness and risk of coronary heart disease and stroke: the Rotterdam Study.</a> Circulation. 113, 657-663 (2006).</li><li>Laurent, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stiffness+is+an+independent+predictor+of+all-cause+and+cardiovascular+mortality+in+hypertensive+patients.">Aortic stiffness is an independent predictor of all-cause and cardiovascular mortality in hypertensive patients.</a> Hypertension. 37, 1236-1241 (2001).</li><li>Fung, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biomechanics: Mechanical Properties of Living Tissues. , (1993).</li><li>Shadwick, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+design+in+arteries.">Mechanical design in arteries.</a> J Exp Biol. 202, 3305-3313 (1999).</li><li>Gasser, T. C., Ogden, R. W., Holzapfel, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperelastic+modelling+of+arterial+layers+with+distributed+collagen+fibre+orientations.">Hyperelastic modelling of arterial layers with distributed collagen fibre orientations.</a> Journal of The Royal Society Interface. 3, 15-35 (2006).</li><li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms,+Pathophysiology,+and+Therapy+of+Arterial+Stiffness.">Mechanisms, Pathophysiology, and Therapy of Arterial Stiffness.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 25, 932-943 (2005).</li><li>Jung, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+tissue+transglutaminase+activity+contributes+to+central+vascular+stiffness+in+eNOS+knockout+mice.">Increased tissue transglutaminase activity contributes to central vascular stiffness in eNOS knockout mice.</a> Am. J. Physiol.-Heart Circul. Physiol. 305, 803-810 (2013).</li><li>Santhanam, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+S-Nitrosylation+of+Tissue+Transglutaminase+Contributes+to+Age-Related+Increases+in+Vascular+Stiffness.">Decreased S-Nitrosylation of Tissue Transglutaminase Contributes to Age-Related Increases in Vascular Stiffness.</a> Circ. Res. 107, 117-243 (2010).</li><li>Fitch, R. M., Vergona, R., Sullivan, M. E., Wang, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+synthase+inhibition+increases+aortic+stiffness+measured+by+pulse+wave+velocity+in+rats.">Nitric oxide synthase inhibition increases aortic stiffness measured by pulse wave velocity in rats.</a> Cardiovasc. Res. 51, 351-358 (2001).</li><li>Bergel, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+static+elastic+properties+of+the+arterial+wall.">The static elastic properties of the arterial wall.</a> The Journal of Physiology. 156, 445-457 (1961).</li><li>Leloup, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applanation+Tonometry+in+Mice:+A+Novel+Noninvasive+Technique+to+Assess+Pulse+Wave+Velocity+and+Arterial+Stiffness.">Applanation Tonometry in Mice: A Novel Noninvasive Technique to Assess Pulse Wave Velocity and Arterial Stiffness.</a> Hypertension. 21, 21 (2014).</li><li>Morrison, T. M., Choi, G., Zarins, C. K., Taylor, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circumferential+and+longitudinal+cyclic+strain+of+the+human+thoracic+aorta:+age-related+changes.">Circumferential and longitudinal cyclic strain of the human thoracic aorta: age-related changes.</a> J Vasc Surg. 49, 1029-1036 (2009).</li><li>Butlin, M., Hammond, A., Lindesay, G., Viegas, K., Avolio, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+use+of+vasoactive+agents+in+characterising+aortic+stiffness+in+rats:+testing+the+assumptions.">In vitro and in vivo use of vasoactive agents in characterising aortic stiffness in rats: testing the assumptions.</a> Hypertens. 30, 42 (2012).</li></ol>

יש לי המחברים אין לחשוף.

במדידות קוטר בכמה צעדים של לחץ על פני טווח רחב של ערכי לחץ היא הכרחית לאפיון מדויק של יחסי לחץ-קוטר. גבולות הלחץ העליונים ותחתונים שיכול להיגרם פרמקולוגית עשויים להשתנות מקבוצת הניסוי, אך בטווח האידיאלי הוא סביב 25 mm Hg 125 מ&quot;מ Hg דיאסטולי ו -50 מ&quot;מ כספית לסיסטולי Hg 200 מ&quot;מ. מנות של 360 מיקרוגרם / קילוגרם / דקת PE ו -240 מיקרוגרם / קילוגרם / דקת SNP בדרך כלל לעורר את גבולות טווח הלחץ. עם זאת, מינונים של PE ניתן להגדיל עד 480 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה וSNP 360 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה כדי לוודא שהגבולות כבר הגיעו. ריכוזי עבודה של PE וSNP יכולים להיות ירידה להשיג מרווחי לחץ עדינים. כקוטר ישתנה עם לחץ באב עורקים, וישכנע אותם ערכי לחץ בין בעלי חיים וקבוצות ניסוי הוא לא חשוב. ורידים ועורקים cannulation יכולים להתבצע במקומות אחרים עם אותו outcomes. cannulation וריד הזנב יכול להיות מאתגר בגלל גודלו הקטן של וריד הזנב. יתר על כן, וריד הזנב אינו גלוי בקלות בעכברים בצבע כהה. וריד הירך ניתן cannulated כחלופה. מסלול זה עשוי להיות קל יותר מאז וריד הירך הוא נגיש יותר. להכנסת קטטר לחץ, חוץ מעורק הירך, יכול להיות מוכנס הצנתר דרך הראש. עורק הירך עדיף על העורק הראשי, עם זאת, כי באזור החזה נותר בשלמותה להדמית אולטרסאונד. cannulation עורק הירך יכול להיות קשה יותר, כי עורק הירך הוא קטן יותר. שימוש בקטטר F 1.2 והחדרת קטטר בעורק הירך הפרוקסימלית מתחת לחלל הבטן תקל על תהליך cannulation. הצבת כמה טיפות סוכן vasodilating כמו לידוקאין של על עורק הירך או באמצעות צנתר היכרויות גם יכול לעזור להגדיל את הכלי כדי להקל על החדרת צנתר. קטטר הלחץ צריך להיות מטופלים ומשמשעל פי הוראות היצרן. מיקום של הצנתר בתוך אב העורקים אינו צריך להיות עקבי בין בעלי החיים כירידה בלחץ בתוך אב העורקים היא חסרת משמעות. עם זאת, הצבת קטטר באב העורקים בבטן יכולה להיות טובה יותר כדי למזער את ההפרעה להדמית אולטרסאונד של אב העורקים החזי. מחשבים מרכזיים אולטרסאונד מסוימים יכולים להקליט לחץ בזמן אמת עם עקבות M-mode, ובכך נותן מדידת לחץ לכל קוטר שנמדד על M-mode. למרבה הצער, בגלל המיקום שבו הקוטר נמדד הוא לא באותו מיקום כמו שבו לחץ נרשם, פיגור קיים בין הלחץ שנרשם בקטטר והלחץ בפועל באב העורקים עולים. כתוצאה מכך, רק מרבי ומדידות קוטר מינימליות יכולים לשמש לניתוח נתונים. המגבלה העיקרית של שיטה זו היא חוסר הוודאות במדידה שהוצגה על ידי אב העורקים הסטה פנימה והחוצה of מטוס אולטרא-סאונד במהלך מחזור הלב. השגיאה הציג Motion היא משותפת לכל מחקרי ההדמיה מבוססת, כולל MRI ו- CT. אסטרטגיות פיצוי כוללות שימוש בתכונות אנטומיים להעביר את מסגרת התייחסות לתנועה 18 ומיושמים במהלך עיבוד הנתונים. כתוכנת פיצוי תנועה היא לא זמינה, החוקר צריך להיות ערני לגבי התאמת המיקום של החללית כדי לעקוב אחר השינוי במיקומו של אב העורקים כעליית לחץ דם ומקטין. כמו כן יש לקחת מדידות קוטר דרך המרכז של אב העורקים. עם זאת, קביעה אם מיקום הקלטת M-mode עובר דרך המרכז יכולה להיות קשה לשפוט על תמונת אולטרסאונד, במיוחד עם עמדות אב העורקים משתנות. חוסר הוודאות שהוצגה על ידי מגבלות אלה באו לידי ביטוי במידת הפיזור בנתונים, כפי שניתן לראות באיור 6. קבלת תמונה של החתך במקום ציר אורך של ascendiאב העורקים ng יכול להיות פתרון. עם זאת, קבלת השקפה זו יכולה לפעמים להיות מאתגרת יותר והעקבות M-מצב וכתוצאה מכך יכולות להיות פחות ברורות. היקף החתך מתמונת B-mode ניתן היה למדוד במקום קוטר מתמונת M-המצב. עם זאת, קביעה כאשר היקף מקסימאלי ומינימאלי הושג יהיה מוגבל על ידי מסגרת שיעור B-המצב ועלול להיות קשה יותר לשפוט מאשר על M-mode. ביצוע מדידות מרובות של עלילת לחץ-קוטר והגדלת גודל קבוצת ניסוי יכול לשפר את דיוק הנתונים. ניתן לאסוף נתונים בלחץ-קוטר בכמה מוקדים לאורך החזה. פרוטוקול זה יבוצע ראשון עם החללית שהונחה על מיקום אחד בחזה. אב העורקים היו אז להיות דמיינו עם הבדיקה מונחת על מיקום אחר והפרוטוקול חוזר ונשנה. סוכני vasoactive משמשים כדי לווסת את לחץ דם עלולים להשפיע על musc חלק אב העורקיםטון le, אשר בתורו ישפיע על נוקשות. עם זאת, מניפולציה של לחץ באב עורקים על ידי חזרת ורידים הוכח לייצר שינויים דומים בPWV נמדד פולשני כמניפולציה תרופתית בחולדות. ממצאים אלה מראים כי עירוי של תרופות vasoactive לפעול בעיקר בעורקי התנגדות ההיקפיים ואינו משפיע על שרירים טון חלק אב העורקים 19 באופן משמעותי. פרוטוקול זה יכול להתבצע בחולדות עם כמה שינויים קלים. החזה מגולח לפני החלת קרם מקריח. X ½ &quot;קטטר 27 G זמין מסחרי משמש לעירוי תרופה. מינוני התרופה המשמשים ללווסת את לחץ באב עורקים הם 40, 80, ו -120 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה של PE ו- 40, 80, ו -120 מיקרוגרם / קילוגרם / דקה של SNP. מלבד אב העורקים עולים, הבדלים אזוריים בנוקשות אב העורקים ניתן לקבוע בפרוטוקול זה. נוקשות אזוריות נמדדו על ידי גישה זו תהיה מדויקות יותר מאשר על ידי PWV כמדידות arדואר נלקח ממקום אחד בניגוד לשני מקומות לPWV. עם זאת, אזורים לאורך אב העורקים שניתן למדוד עם טכניקה זו מוגבלים לאלה שניתן דמיינו על ידי אולטרסאונד. מודולוס אלסטיות גם יכול להיות מחושב מהנתונים שנאספו על ידי בשיטה זו אם ניתן להשיג מדידת עובי דופן. מדויק במדידת vivo של אב העורקים העכבר הוא מוגבל על ידי גבולות הרזולוציה של טכנולוגיית אולטרסאונד הנוכחית. שיפור עתיד של טכנולוגיית אולטרא-סאונד יכול לעשות במדידה ריאלי יותר vivo עובי קיר. כחלופה, ניתן לבצע מדידות עובי vivo לשעבר. myography לחץ יספק את המדידות מדויקות ביותר, כי העובי ניתן למדוד בכל תוספת לחץ.

נוקשות של אב העורקים גדלו היא סימן היכר של מחלת לב וכלי דם. הזדקנות 1, 2 עישון, סוכרת 3, היפרליפידמיה 4, וגורמי סיכון אחרים למחלת לב וכלי דם הוכחו להגדיל את הנוקשות של אב העורקים. מחקרים אפידמיולוגיים הראו נוסף נוקשות של אב העורקים כמנבא חזק עצמאי של תחילת מחלת לב כלילית ושבץ, כמו גם את התרחשותם של אירועי לב וכלי דם ותמותה 5-8. בשל חשיבות הבריאות הקלינית וציבורית של קשיחות אב העורקים גדלו, מחקר נוכחי מתמקד בהבנת המנגנונים שבבסיס ההתפתחות וההתקדמות של קשיחות כלי דם. עניין רב ולכן קיים בפיתוח אמצעים מדויקים של קשיחות כלי דם במודלים ניסיוניים של מחלת לב וכלי דם. הקשיחות של חומר יכולה להיות מאופיינת על ידי יחסי מתח מתח שלה ולכמת כמו mod אלסטיUlus. חומר אלסטי ליניארי מעווה הפיך והלחץ שלה מגדיל באופן יחסי למתח. אב העורקים והעורקים הגדולים הם גופים אלסטיים קוי: כאשר נמתחו, הנוקשות של העורק לא יישארו קבועות אך מגדילה את מידת הנפיחות. הליניאריות בתכונות המכנית של עורקים גדולים זאת בשל המאפיינים השונים של נוקשות אלמנטי נושאת עומס, כלומר קולגן ואלסטין, המהווים את קיר הכלי. אלסטין הוא להרחבה מאוד עם מודולוס אלסטיות של 0.6 MPa. לשם השוואה, קולגן הוא מאוד נוקשה עם מודולוס אלסטיות של 1 9 GPA. הנוקשות הראשוניות הוצגו על ידי אב העורקים בערכי מתח נמוכים מיוחסות לאלסטין תוך הקשיחות הגבוהה הוצגה בערכי מתח גבוהים היא עקב קולגן. עומס מועבר מאלסטין קולגן ככלי distends ואזור זה של עומס העברת המקום שבו פועלת מערכת כלי הדם. לכן, בלחצים פיסיולוגיים, נוקשות עורקיםתלוי בתרומה של קולגן ואלסטין ו -10. ההפצה והכיוון של אלסטין וקולגן להשתנות לפי שכבה בתוך הדפנות העורקים. בתקשורת, אלסטין, קולגן, ותאי שריר חלק הם ארוזים לתוך סלילים הדוקים כי הם שכבות מעגליות. הסדר זה מאפשר את העורק להתנגד עומסים גבוהים בכיוון ההיקפי. Adventitia הוא בעיקר קולגן אלסטין עם קטן ואת סיבי הקולגן מאורגנים בצורה דמוית רשת. סיבי קולגן אלה הם גליים במצב בלתי מוטעם וליישר את עם עלייה בעומס. עליות נוקשות כסיבי קולגן ליישר את, ובכך למנוע את העורק ממתיחת יתר ופקיעה. בגלל הארגון המבני והכיוון שונה של סיבי קולגן, עורקים הם איזוטרופי: הנוקשות הציגו תלויות באם הכלי נמתח longitudinally או circumferentially 11 בvivo stiffnes.ים הוא אפוא שילוב של הקשיחות והאורך ההיקפי של אב העורקים. נוקשות עורקים בדרך כלל לכמת in vivo כמהירות גל ציות או דופק (PWV). עמידת עורקים מוגדרת כC = ΔD / ΔP בי ΔD הוא שינוי בקוטר ΔP הוא השינוי המקביל בלחץ. ערכים נמוכים יותר של ציות מצביעים כלי נוקשה. תאימות מחושבת ממערכת יחסי לחץ-הממד של העורק ולכן מדידה ישירה של קשיחות. כנוקשות מופצת אינן אחידות בכלי הדם 12, ציות צריך להימדד באותו מקום דומה / בכל נושא כדי לערוך השוואות משמעותיות בין קבוצות ניסוי. ההבדל בין הציות ומודולוס אלסטיות הוא שמודולוס אלסטיות הוא מנורמל לממדים של החומר. תאימות לכן משקפת קשיחות מבנית, ואילו נ&quot;צ מודולוס אלסטיותlects קשיחות חומר. עם הזדקנות, עליות עובי דפנות עורקים ואלסטין / יחס קולגן יורד, כך גם קשיחות מבנית וחומר קשיחות גדולות יותר. בהשוואה לעמידה, PWV הוא אמצעי עקיף של עורקים נוקשות. PWV היא המהירות שבה דופק לחץ נוסע לאורך אורכו של עורק ומושפע מהמאפיינים של קיר הכלי. משוואת Moens-Korteweg משמשת למודל היחסים בין PWV ומודולוס אלסטיות: PWV 2 (r ρ 2) h / = E כאשר E הוא מודולוס אלסטיות מצטבר, h הוא עובי קיר, ρ הוא צמיגות דם, וr הוא רדיוס כלי . ערך גבוה יותר ולכן עולה PWV כלי נוקשה. ציות ומודולוס אלסטיות ניתן למדוד באופן ניסיוני לשעבר vivo על קטע נכרת של כלי שיט. לקביעת התאמה, מגזר הכלי הוא רכוב על myograph לחץ 13,14. לחץ בתוך הכלי הוא גדל צעד חכם והדואר וכתוצאה משינוי בקוטר הוא איתר באמצעות מיקרוסקופ וידאו. תאימות נקבעה מנתוני לחץ-הקוטר. מודולוס אלסטיות מצטבר ניתן למדוד על ידי בדיקות מתיחה. נתונים צעד חכם וכוח-עקירה בניסויים אלה, הכלי הוא נקרע לגזרים נאספו עד הפסקות טבעת ספינה. ניתן לחשב ערכי לחץ ומתח וזממו כדי לקבוע מודולוס אלסטיות מצטבר. vivo לשעבר גישות אלה יכולים לשמש כדי להעריך את השינויים בנכסים פסיביים המשפיעים על קשיחות. In vivo, בנוסף לקיר תוכן, קשיחות כלי דם מושפעת באופן דינמי על ידי טונוס שרירים חלק ו13,15,16 לחץ דם. PWV היא השיטה הנפוצה ביותר למדידה בנוקשות אב העורקים vivo במודלים ניסיוניים. ניתן לקבוע PWV noninvasively באמצעות אולטרסאונד דופלר או applanation tonometry 17. דופק לחץ נמדד בשני מקומות נפרדים והזמן הנדרש להדופק לעבור את המרחק הוא מהירות הגל הדופק. בגלל PWV נמדד לאורך של אב העורקים, זה ערך ממוצע של קשיחות. עורקים גדולים הם לא לינארית אלסטי, כך קשיחות ולכן PWV ישתנה עם לחץ דם. ערך גבוה יותר PWV לכן יכול לנבוע מקשיחות מוגברת או לחץ גבוה. ערכי PWV לכן חייבים להיות מנורמלים ללחץ דם לגזור מסקנות לגבי הנוקשות של כלי השיט. שיטות מדידה המשלבות את ההשפעה של לחץ דם עם התכונות פסיביות של קיר כלי דם ואת ההשפעות של מתווכי vasoactive המשנות את הטון יניב מדד רלוונטי מבחינה פיזיולוגית של עורקים נוקשות. גישה זו מיושמת על ידי מדידת PWV פולשני באמצעות צנתר עם ​​שני חיישני לחץ מופרדים במרחק קבוע 13. קטטר לחץ הכפול זה מוכנס לתוך הסמים אב העורקים וvasoactive, כגון phenylephrine או nitroprusside נתרן, הם חדורים לוריד דרךצנתר ורידים להעלות ולחץ דם נמוך. פרוטוקול זה מתאר שיטה לקביעת נוקשות של אב העורקים בvivo ממערכת יחסי לחץ-הממד שלה במודל של עכברים. גישה זו מציעה מספר יתרונות על פני מדידת PWV פולשנית. מדדי נוקשות, כגון עמידה, ניתן לחשב את נתוני לחץ-ממד שנאספו על ידי הליך זה. יתר על כן, טכניקה זו מאפשרת למדידת קשיחות אב העורקים המקומית בגלל קשיחות נמדדת ממקום אחד. גישה זו שימושית במיוחד במדידה עולה נוקשות אב העורקים כאורך הקצר של אזור זה הופך את מדידת PWV קשה להשיג. עניין מחקרי קיים במיוחד באב העורקים עולים כי התכונות מכאניות שלה להשפיע על זלוף של הזרימה כלילית ותגובת הלב לבעיות בתפקוד כלי דם. כדי למדוד את קשר לחץ בקוטר של אב העורקים בvivo </eמ &#39;&gt;, האאורטה עולה היא מדמיין וקוטרו נמדד על ידי ההדמיה אולטרה סאונד. לחץ דם של אב העורקים נמדד פולשני עם קטטר לחץ. לחץ דם משתנה באופן הדרגתי על ידי עירוי תוך ורידי של תרופות vasoactive. Phenylephrine מכווץ את כלי דם ומשמש להעלאת לחץ באב עורקים. nitroprusside נתרן מרחיב כלי דם ומשמש להורדת לחץ באב עורקים. קטרי אב העורקים סיסטולי ודיאסטולי ולחצים של אב העורקים מקבילים נמדדים עבור כל תוספת לחץ. תאימות ניתן לחשב מנתוני לחץ-הקוטר שנאספו.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="878">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:197px;">Company</td>
			<td style="width:141px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:239px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Equipment</td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">High-resolution ultrasound machine</td>
			<td style="width:197px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:141px;">Vevo2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">13-24 MHz transducer</td>
			<td style="width:197px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:141px;">MS250</td>
			<td>Used for imaging rats</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">22-55 MHz transducer</td>
			<td style="width:197px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:141px;">MS550D</td>
			<td>Used for imaging mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Imaging Station</td>
			<td style="width:197px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:141px;">Imagine Station 1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">1.2F Pressure catheter</td>
			<td style="width:197px;">Transonic</td>
			<td style="width:141px;">FTH-1211B-0018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">SP200 pressure control unit</td>
			<td style="width:197px;">Transonic</td>
			<td style="width:141px;">FFS-095-DP01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:303px;">Standard Infusion Only Harvard Pump 11 Plus syringe pump</td>
			<td style="width:197px;">Harvard Apparatus</td>
			<td align="right" style="width:141px;">702208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Isoflurane vaporizer</td>
			<td style="width:197px;">VetEquip</td>
			<td align="right" style="width:141px;">911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Induction chamber</td>
			<td style="width:197px;">VetEquip</td>
			<td align="right" style="width:141px;">941443</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">100% O2</td>
			<td style="width:197px;">Airgas</td>
			<td style="width:141px;">OX USP200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:303px;">Single Stage Brass 0-50 psi General Purpose Cylinder Regulator CGA540</td>
			<td style="width:197px;">Airgas</td>
			<td style="width:141px;">Y11215B540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Stereo Boom Stand Microscope</td>
			<td style="width:197px;">National Optical</td>
			<td style="width:141px;">420-BMSQ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Fiber optic illuminator &#38; light pipe</td>
			<td style="width:197px;">Cole Palmer</td>
			<td style="width:141px;">EW-41500-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Supplies</td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">30G x 1/2&#34; BD PrecisionGlide Needle</td>
			<td style="width:197px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:141px;">305106</td>
			<td>For tail vein cannulation in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Polyethylene Tubing PE10</td>
			<td style="width:197px;">Becton Dickinson</td>
			<td align="right" style="width:141px;">427401</td>
			<td>For tail vein cannulation in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">27Gx1/2&#34; Surfloe winged infusion set</td>
			<td style="width:197px;">Terumo</td>
			<td style="width:141px;">SV*27EL</td>
			<td>For tail vein cannulation in rats</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Signa Gel Electrode Gel</td>
			<td style="width:197px;">Parker</td>
			<td style="width:141px;">15-25</td>
			<td>Use for ECG recording</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Aquasonic Clear Ultrasound Gel</td>
			<td style="width:197px;">Parker</td>
			<td style="width:141px;">03-08</td>
			<td>Use for ultrasound</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">1mL Sub-Q Syringes, 26G x 5/8&#34;</td>
			<td style="width:197px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:141px;">309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Nair</td>
			<td style="width:197px;">Nair</td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td>Depilatory cream</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Histoacryl</td>
			<td style="width:197px;">TissueSeal</td>
			<td style="width:141px;">TS1050071FP</td>
			<td>Tissue glue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Braided Silk Suture 6-0</td>
			<td style="width:197px;">Teleflex</td>
			<td style="width:141px;">104-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Dumostar P55 fine forceps</td>
			<td style="width:197px;">Roboz</td>
			<td style="width:141px;">RS-4984</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Microscissors</td>
			<td style="width:197px;">WPI</td>
			<td style="width:141px;">501839</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Fine scissors</td>
			<td style="width:197px;">FST</td>
			<td style="width:141px;">14060-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Medium forceps</td>
			<td style="width:197px;">Ted Pella</td>
			<td align="right" style="width:141px;">5665</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Hemostatic forceps</td>
			<td style="width:197px;">Roboz</td>
			<td style="width:141px;">RS-7131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Non-sterile cotton gauze sponge</td>
			<td style="width:197px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:141px;">22-362-178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Cotton tipped applicators</td>
			<td style="width:197px;">Oritan</td>
			<td style="width:141px;">803-WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Label tape</td>
			<td style="width:197px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:141px;">15-901-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Drugs</td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Sodium chloride</td>
			<td style="width:197px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:141px;">S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">R-Phenylephrine hydrochloride</td>
			<td style="width:197px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:141px;">P6126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Sodium nitroprusside dihydrate</td>
			<td style="width:197px;">Sigma Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:141px;">71778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;"></td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Software</td>
			<td style="width:197px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Prism</td>
			<td style="width:197px;">GraphPad</td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:303px;">Excel</td>
			<td style="width:197px;">Microsoft</td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring ascending aortic stiffness in vivo in mice using ultrasound

אנו מציגים פרוטוקול למדידה בנוקשות אב העורקים vivo בעכברים באמצעות ההדמיה אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה. קוטר אב העורקים נמדד על ידי אולטרסאונד ולחץ דם אב העורקים נמדד פולשני עם קטטר לחץ של מצב מוצק. לחץ דם עולה ואז הוריד בהדרגה על ידי עירוי תוך ורידי של תרופות phenylephrine vasoactive וnitroprusside נתרן. קוטר אב העורקים נמדד לכל שלב לחץ לאפיין את מערכת היחסים לחץ בקוטר של האאורטה עולה. מדדי נוקשות נובעים ממערכת יחסי לחץ-קוטר ניתן לחשב מהנתונים שנאספו. חישוב תאימות עורקים מתואר בפרוטוקול זה. טכניקה זו יכולה לשמש כדי לחקור מנגנוני נוקשות אב העורקים גדלו הקשורים למחלות לב וכלי דם והזדקנות. הטכניקה מייצרת מידה רלוונטית מבחינה פיזיולוגית של קשיחות לעומת לשעבר vivo גישות כי phהשפעות ysiological על נוקשות של אב העורקים משולבות במדידה. המגבלה העיקרית של שיטה זו היא טעות המדידה הציגה מהתנועה של אב העורקים במהלך מחזור הלב. תנועה זו יכולה להיות מתוגמלת על ידי התאמת המיקום של החללית עם תנועת אב העורקים, כמו גם ביצוע מדידות מרובות של יחסי לחץ-קוטר אב העורקים ולהרחיב את גודל קבוצת הניסוי.

תמונת אורך של אב העורקים חדר ועולה השמאלי הוא נתפס על B-מצב, כפי שמוצגת באיור 1. לחלופין, ניתן לקבל תמונת אורך של רק אב העורקים, כמו באיור 2. התנועה של קיר אב העורקים בלב מחזור מופיע כשני קווים לבנים על M-mode, כפי שמוצג באיור 3. לומן של אב העורקים הוא האזור שבין השורות. לחץ באב עורקים הוא מווסת על ידי עירוי של תרופות vasoactive. PE מעלה את הלחץ באב העורקים, כפי שמוצג באיור 4 א, ​​וSNP מוריד את הלחץ, כפי שמוצג באיור 4. M-mode נרשם כאשר מישורי לחץ דם, 1 דקות לאחר תחילת העירוי. לחץ אב העורקים משתנה בהדרגה באמצעות שינוי המינון של התרופה מנוהלת, כפי שמוצג באיור 5. מינון של תרופה נמצא בשליטה באמצעות התעריף של עירוי. כל מינוני התרופה נמצאים במיקרוגרם / קילוגרם / דקה. קטרים ​​מרביים ומזעריים נמדדים על tהוא M-mode, שמוצג באיור 3. קטרים ​​אלה מתאים לסיסטולי ודיאסטולי לחצי אב העורקים שנרשמו על ידי קטטר הלחץ. ערכי סיסטולי ודיאסטולי קוטר ולחץ של שלושה מחזורי לב נמדדים בתחילת מחקר ולכל מנת PE וSNP. סטיית התקן בין שלוש מדידות קוטר במינון תרופה אחת נעה בין 0.01 מ&quot;מ ל0.04 מ&quot;מ. קוטר אב העורקים ניתן להתוות נגד לחץ אב העורקים המקביל שלה כדי להמחיש את קשר לחץ-קוטר, כפי שמוצג באיור 6 א. ערכי לחץ-קוטר אלה משמשים לחישוב תאימות אב העורקים. עמידת עורקים מחושבת על ידי = (Sys D - קוטר D) C / (sys P - dia P) (1) שבו sys D ו- D הוא קוטר קטרי סיסטולי ודיאסטולי וsys P וdia P<html> לחצים סיסטולי ודיאסטולי. ציות ומתכוון לחץ אב העורקים (MAP) מחושב בתחילת מחקר ולכל מנת PE וSNP. תאימות זממה נגד MAP כדי להדגים את הלחץ-התלות של קשיחות. בגלל ההתנהגות אלסטית קוי של אב העורקים, עמידה יורדת עם עליית MAP, כפי שניתן לראות באיור 6. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig1highres.jpg" /> איור 1:. צפה באורך של האאורטה עולה על B-מצב מדידות קוטר לקוחים מתמונת אורך של האאורטה עולה עוזבת את החדר השמאלי. LV: חדר השמאלי; הרשות הפלסטינית: עורק ריאה; AA: עולה אב העורקים. ויזואליזציה של עורק הריאה תלויה במיקום הבדיקה. קוטר אב העורקים נמדד דיסטלי לשסתום אב העורקים. תדירות הבדיקה משמשת ללכידת תמונה זו היא 40 מגה-הרץ. page = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig2highres.jpg" /> איור 2:. צפה בחלופי של האאורטה עולה על B-מצב האאורטה עולה בהשתתפות בולטת יותר וקירות חדר ולב השמאלי הם פחות ברורים. AA: אב העורקים עולים; LV: חדר שמאלי. תדירות הבדיקה משמשת להקלטת תמונה זו היא 40 מגה-הרץ. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig3highres.jpg" /> איור 3:. אב העורקים דמיינו על M-mode קוטר אבי העורקים נמדד מתמונת M-המצב. התנועה של קיר אב העורקים מופיעה כשני קווים גליים. החלל בין שני הקווים הוא לומן של אב העורקים. קטרי אב העורקים סיסטולי ודיאסטולי של שלושה מחזורי לב נמדדים על פי M-mode. בתמונה זו, לחץ באב עורקים שנרשמו על ידי קטטר הלחץ, אות ECG, ומחזור הנשימה מוצגים באדום, ירוק, צהוב ועל M-mode. הבדיקה frequency משמש להקלטת תמונה זו היא 40 מגה-הרץ ומהירות סריקת הרכישה היא 1,200 הרץ. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig4highres.jpg" /> איור 4:. שינוי לחץ באב עורקים בהדרגה לחץ אבי העורקים משתנה באופן הדרגתי על ידי המינון של תרופה הרוויה. מינון תרופה הוא מווסת על ידי קצב העירוי. כל המינונים נמצאים במיקרוגרם / קילוגרם / דקה. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig5highres.jpg" /> איור 5:. לחץ ויסות לחץ באב עורקים בתרופות vasoactive אבי העורקים הוא גדל עם עירוי של phenylephrine המכווץ כלי הדם (PE) וירד עם עירוי של nitroprusside נתרן vasodilator (SNP). מישורי לחץ אב העורקים 1 דקות לאחר תחילת עירוי התרופה. M-מצב של קוטר אב העורקים נרשם ברמה. (א) מראה העלייה בלחץ אב העורקיםעם עירוי PE / קילוגרם / דקה 360 מיקרוגרם. (ב) מציג את הירידה בלחץ אב העורקים עם 240 מיקרוגרם / קילוגרם / עירוי דקות SNP. זמן העירוי החל והזמן M-mode נרשם מסומנים על העקבות. &#160; לחץ אב העורקים משתנה באופן הדרגתי על ידי המינון של תרופה הרוויה. מינון תרופה הוא מווסת על ידי קצב העירוי. כל המינונים נמצאים במיקרוגרם / קילוגרם / דקה. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/52200/52200fig6highres.jpg" /> איור 6: קוטר לעומת לחץ ועמידה מול מתכוון חלקות לחץ אב העורקים קוטר אבי העורקים ניתן להתוות נגד לחץ אב העורקים המקביל שלה כדי להראות את קשר לחץ-קוטר ().. תאימות ניתן לחשב עבור כל תוספת לחץ וזממה נגד הלחץ הממוצע של אב העורקים (MAP) כדי להראות את התלות בלחץ של נוקשות של אב העורקים (B).

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound at JoVE.com

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We describe a technique for measuring aortic stiffness from its pressure-diameter relationship in vivo in mice. Aortic diameter is recorded by ultrasound and aortic pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is changed incrementally and the resulting diameter is measured.

מדידה עולה אבי העורקים נוקשים<em&gt; In vivo</em&gt; בעכברים באמצעות אולטראסאונד

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound ...

measuring-ascending-aortic-stiffness-in-vivo-in-mice-using-ultrasound

Research

JoVE Journal

Medicine

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

15.9K Views.  Johns Hopkins University. We describe a technique for measuring aortic stiffness from its pressure-diameter relationship in vivo in mice. Aortic diameter is recorded by ultrasound and aortic pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is changed incrementally and the resulting diameter is measured.

Video: Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

בF-MRI 19 vivo למעקב סלולרי

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Ultrasound-guided Transthoracic Intramyocardial Injection in Mice

Murine models of cardiovascular disease are important for investigating pathophysiological mechanisms and exploring potential regenerative therapies. Experiments involving myocardial injection are currently performed by direct surgical access through a thoracotomy. While convenient when performed at the time of another experimental manipulation such as coronary artery ligation, the need for an invasive procedure for intramyocardial delivery limits potential experimental designs. With ever improving ultrasound resolution and advanced noninvasive imaging modalities, it is now feasible to routinely perform ultrasound-guided, percutaneous intramyocardial injection. This modality efficiently and reliably delivers agents to a targeted region of myocardium. Advantages of this technique include the avoidance of surgical morbidity, the facility to target regions of myocardium selectively under ultrasound guidance, and the opportunity to deliver injectate to the myocardium at multiple, predetermined time intervals. With practiced technique, complications from intramyocardial injection are rare, and mice quickly return to normal activity on recovery from anesthetic. Following the steps outlined in this protocol, the operator with basic echocardiography experience can quickly become competent in this versatile, minimally invasive technique.

Echocardiography-guided percutaneous intramyocardial injection represents an efficient, reliable, and targetable modality for the delivery of gene transfer agents or cells into the murine heart. Following the steps outlined in this protocol, the operator can quickly become competent in this versatile, minimally invasive technique.

הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים

Murine models of cardiovascular disease are important for investigating pathophysiological mechanisms and exploring potential regenerative therapies. ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals. This article introduces a standard protocol used to induce aortic aneurysms via subcutaneous infusion of angiotensin II (AngII) from implanted osmotic pumps. This protocol includes calculation of AngII amount and dissolution, osmotic pump filling, implantation of osmotic pumps subcutaneously, observation after pump implantation, and harvest of aortas to visualize aortic aneurysms in mice. Subcutaneous infusion of AngII through osmotic pumps following this protocol is a reliable and reproducible technique to induce both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice. Infusion durations range from a few days to several months based on the purpose of the study. AngII 1,000 ng/kg/min is sufficient to provide maximal effects on abdominal aortic aneurysmal formation in male hypercholesterolemic mouse models such as apolipoprotein E deficient or low-density lipoprotein receptor deficient mice. Incidence of abdominal aortic aneurysms induced by AngII infusion via osmotic pumps is 5 - 10 times lower in female hypercholesterolemic mice and also lower in both genders of normocholesterolemic mice. In contrast, AngII-induced thoracic aortic aneurysms in mice are not hypercholesterolemia or gender-dependent. Importantly, multiple features of this mouse model recapitulate those of human aortic aneurysms.

Subcutaneous implantation of osmotic pumps provides a convenient approach for prolonged and consistent delivery of compounds. This approach has been used extensively to study both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice.

תת עורית אנגיוטנסין II עירוי באמצעות אוסמוטי משאבות גורם אבי העורקים מפרצת בעכברים

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

חסך בתאי עכבר מן xenografts גידול האנושי משפר משמעותי ניתוח במורד זרם של תאי יעד

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Ultrasound-based Pulse Wave Velocity Evaluation in Mice

Arterial stiffness can be evaluated by calculating pulse wave velocity (PWV), i.e., the speed with which the pulse wave travels in a conduit vessel. This parameter is being increasingly investigated in small rodent models in which it is used for assessing alterations in vascular function related to particular genotypes/treatments or for characterizing cardiovascular disease progression. This protocol describes an image processing algorithm which leads to non-invasive arterial PWV measurement in mice using ultrasound (US) images only. The proposed technique has been used to assess abdominal aorta PWV in mice and evaluate its age-associated changes.
Abdominal aorta US scans are obtained from mice under gaseous anesthesia using a specific US device equipped with high-frequency US probes. B-mode and Pulse-Wave Doppler (PW-Doppler) images are analyzed in order to obtain diameter and mean velocity instantaneous values, respectively. For this purpose, edge detection and contour tracking techniques are employed. The single-beat mean diameter and velocity waveforms are time aligned and combined in order to achieve the diameter-velocity (lnD-V) loop. PWV values are obtained from the slope of the linear part of the loop, which corresponds to the early systolic phase.
With the present approach, anatomical and functional information about the mouse abdominal aorta can be non-invasively achieved. Requiring the processing of US images only, it may represent a useful tool for the non-invasive characterization of different arterial sites in the mouse in terms of elastic properties. The application of the present technique can be easily extended to other vascular districts, such as the carotid artery, thus providing the possibility to obtain a multi-site arterial stiffness assessment.

Arterial stiffness represents a key factor in cardiovascular disease and pulse wave velocity (PWV) can be considered as a surrogate index for arterial stiffness. This protocol describes an image processing algorithm for calculating PWV in mice based on ultrasound image processing that is applicable at different arterial sites.

אולטראסאונד מבוסס הערכה מהירה גל דופק של עכברים

Arterial stiffness can be evaluated by calculating pulse wave velocity (PWV), i.e., the speed with which the pulse wave travels in a conduit vessel. This ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

פולשנית רוחבי אבי העורקים התכווצות עכברים

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to perform a partial thoracotomy to visualize the transverse aortic arch. However, the surgical trauma caused by the thoracotomy in open-chest models changes the respiratory physiology as the ribs are dissected and left unattached after chest closure. To prevent this, we established a minimally invasive, closed chest approach via lateral thoracotomy. Herein we approach the aortic arch via the 2nd intercostal space without entering the chest cavities, leaving the mouse with a less traumatic injury to recover from. We perform this operation using standard laboratory settings for open chest TAC procedures with equal survival rates. Apart from maintaining physiological breathing patterns due to the closed chest approach, the mice seem to benefit by showing rapid recovery, as the less invasive technique appears to facilitate a fast healing process and to reduce immune response after trauma.

Here, we present a protocol of Transverse Aortic constriction (TAC) via a lateral thoracotomy. This technique is a minimally invasive, closed chest surgical procedure aiming to simulate pressure overload and heart failure in mice utilizing standard TAC laboratory settings.

דגם סגור-החזה לזירוז רוחבי. התרחבות אבי העורקים בעכברים

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated with an increased survival rate and greater quality of patient&#8217;s life when compared to conventional dialysis. Regrettably, transplantology suffers from a lack of reliable methods for organ quality assessment. Standard diagnostic techniques are limited to macroscopic appearance inspection or invasive tissue biopsy, which do not provide comprehensive information about the graft. The proposed protocol aims to introduce solid phase microextraction (SPME) as an ideal analytical method for comprehensive metabolomics and lipidomic analysis of all low molecular compounds present in kidneys allocated for transplantation. The small size of the SPME probe enables performance of a chemical biopsy, which enables extraction of metabolites directly from the organ without any tissue collection. The minimum invasiveness of the method permits execution of multiple analyses over time: directly after organ harvesting, during its preservation, and immediately after revascularization at the recipient&#8217;s body. It is hypothesized that the combination of this novel sampling method with a high-resolution mass spectrometer will allow for discrimination of a set of characteristic compounds that could serve as biological markers of graft quality and indicators of possible development of organ dysfunction.

The protocol presents utilization of the chemical biopsy approach followed by comprehensive metabolomic and lipidomic analysis for quality assessment of kidney grafts allocated for transplantation.

שימוש בביופסיה כימית להערכת איכות השתל

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...