Name: investigations on the ga(iii) complex of eob-dtpa and its 68ga radiolabeled analogue
Uploaded: 2016-08-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 22 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Investigations on the GaIII Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue at JoVE.com

The authors have no acknowledgements.

1. הכנת EOB-DTPA ואת Ga [EOB-DTPA] זהירות: יש להתייעץ כל גיליונות נתוני בטיחות חומרים רלוונטיים (MSDS) של ממיסים אורגניים בשימוש, חומצות alkalines לפני השימוש. ביצוע כל הצעדים במנדף ולהשתמש בציוד מגן אישי (משקפי מגן, כפפות, חלוק מעבדה). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בידוד של EOB-DTPA מחומצה gadoxetic <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים 3 מ&quot;ל של 0.25 M פתרון בזריקות חומצה gadoxetic לתוך בקבוק. הוספת 500 מ&quot;ג (5.6 מילימול) של חומצה אוקסלית לפתרון הזז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ערבוב במשך שעה 1, לסנן את ההשעיה דרך frit באמצעות לחץ מופחת. שטפו את שלוש פעמים שאריות עם 3 מ&quot;ל מים, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבב את filtrates המימי ולצייד את הפתרון עם אלקטרודת pH. להוסיף 12 M חומצה הידרוכלורית אל התסנין עד pH הוא כ -0.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הממס vacuo להניב שאריות צבע. אחסן תחת גז אינרטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטפו את השאריות ביסודיות (לפחות שלושהפעמים) עם אתיל אצטט להסיר את עודף חומצה אוקסלית. יבש את שאריות האור בריק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Redissolve שאריות 2 מ&quot;ל מים בטמפרטורת החדר ולאחר מכן לקרר את פתרון באמבט קרח. מבלי להסיר את באמבט הקרח, להוסיף 0.5 dropwise פתרון סודיום הידרוקסיד מימייה M עד להיווצרות הוא ציין מוצק ודביק חסר צבע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המים על ידי decantation. שטפו את פי שני מוצק עם 1 מ&quot;ל של מים קרים. ייבש את מוצק vacuo להניב שבר המוצר הראשון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד חלק המוצר השני מן שברים בשילוב של מים יצק באמצעות כרומטוגרפיה בעמודה (סיליקה, מתנול / מים 4/1). 24 הסר את הממס האור בריק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם כן השיג את מוצק אינו לבן טהור, redissolve זה ב 1 מ&quot;ל של מים, מוסיפים 10 מ&quot;ל של אתנול ולאחר מכן 10 מ&quot;ל של אתר diethyl כדי לזרז את המוצר. סינון דרך frit באמצעות לחץ מופחת ויבש vacuo. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לְשַׁלֵבהן שברים מוצקים של EOB-DTPA ולבצע ספקטרוסקופיות תמ&quot;ג, 25 ספקטרומטריה 26 ובסיסי 27 ניתוחים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סינתזה של Ga [EOB-DTPA] זהירות: חנות מוצק Ga (III) כלוריד תחת אווירה יבש אינרטי, מאז במגע עם אוויר, לחות או ריקבון גריז מתרחש, וכתוצאה מכך אדי מאכל היווצרות של זיהומים צהוב, חום או שחור. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כן פתרון 0.11 M מניות על ידי המסת 1.94 גרם (11.0 mmol) של Ga (III) הכלוריד 100 מ&quot;ל מים. לדלל 1 מ&quot;ל של 25% פתרון אמוניה מימית עם 4 מ&quot;ל מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 80 מ&quot;ג (0.15 מילימול) של EOB-DTPA בבקבוק 10 מ&quot;ל מים. ואם צריך מחממים הממס להשיג פירוק מוחלט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף 1.4 מ&quot;ל (0.15 מילימול) של הפתרון כלוריד המניות Ga (III). לצייד את הבקבוק עם בוחש ו-אלקטרודה pH. הוסף dropwise פתרון אמוניה מימית מדוללת עד ה- pH של התמיסה הוא כ 4.1. מערבבים ב roטמפרטורת om למשך 30 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הממס האור בריק. מניח את השאריות בבקבוק, מצויד stillhead עם צוואר בצד מרכזי ומקביל. לצייד את הצוואר המרכזי באצבע קירור ואת הצוואר בצד עם לשקע משאבת ואקום </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחמם את השאריות בלחץ מופחת (125 ° C, 0.6 mbar). מעת לעת להסיר אמוניום כלוריד מעודנת (נראה כמו ציפוי לבן של משטח הזכוכית) מאצבע הקירור ועדיין הראש, כמו גם מן החלקים העליונים של הבקבוק עם מטלית רטובה מעט. משך התהליך עד אין היווצרות גלויה של סובלימציה חדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להסיר עקבות סופיות של אמוניום כלוריד לשטוף את השאריות שלוש פעמים עם 0.5 מיליליטר של מתנול חם, בהתאמה. יבש את שאריות צבע האור בריק. בצע ספקטרוסקופיות תמ&quot;ג, 25 26 ספקטרומטריה ובסיסית 27 ניתוחים. </li></ol></li></ol> 2. נוהל סימון כללי זהירות: כל לשעברperiments כולל קשר ישיר או עקיף עם חומרים רדיואקטיביים חייבת להתבצע על ידי אדם מיומן בלבד. אנא להשתמש בציוד מיגון מתאים. איסוף כל פסולת רדיואקטיבית בנפרד ולאחסן ולהיפטר בהתאם לתקנות תקפות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Elution של הגנרטור הערה: 40 MCI 68 Ge / 68 Ga גנרטור עם נוקליד אמא כפותות תחמוצת על סיליקה dodecyl-3,4,5-trihydroxybenzoate היה בשימוש. Elution וטיהור יכול להתבצע באופן ידני או, כפי שהיה במקרה בהליך זה, כתהליך אוטומטי משולב באמצעות משאבת peristaltic ויחידת מנפק. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכינו פתרונות של 5.5 M, 1.0 M ו- 0.05 חומצה הידרוכלורית M. כן פתרון של 5.0 M נתרן כלורי המכיל 25 μl של 5.5 חומצה הידרוכלורית M לכל מיליליטר. הכן פתרון חיץ של pH 4.6 ידי שילוב 4.1 נתרן אצטט גרם, 1 מ&quot;ל HCl (30%) ו -2.5 חומצה אצטית קרחונית מ&quot;ל דילול תערובת עם מים 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> preCondition PS-H + מחסנית ידי שטיפתו לאט עם 1 מ&quot;ל של 1.0 M חומצה הידרוכלורית ובהמשך 5 מ&quot;ל מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Elute בעמודה סיליקה של הגנרטור עם 4 מ&quot;ל 0.05 M HCl. 12 טען את 68 Ga eluate על מחסנית PS-H +. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רוקן את המחסנית עם 5 מ&quot;ל של מים ולאחר מכן לייבש אותו עם 5 מ&quot;ל של אוויר. Elute 68 Ga ממחסנית עם 1 מ&quot;ל 5.0 M פתרון נתרן כלורי acidified. 28 </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיוג של EOB-DTPA עם 68 Ga <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 1 מ&quot;ג (1.9 μmol) של EOB-DTPA ב 1 מ&quot;ל מים. מפתרון זה לקחת 100 μl (0.19 μmol) לדלל אותם עם 9.9 מ&quot;ל מים כדי להכין 19 מיקרומטר (10 מיקרוגרם / מ&quot;ל) פתרון המניות של EOB-DTPA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר 50 μl (שווה 22-29 MBq) של תמיסה המכילה 68 Ga ולשים לתוך בקבוקון. הוסף 50 μl (0.5 מיקרוגרם) של פתרון המניות 19 מ&quot;מ של EOB-DTPA ו -300 μl of חיץ להעלות את ה- pH ל 4.0. Shake בקצרה דגירה הפתרון בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות. הסרת aliquot של 1-5 μl ולשים HPLC או ניתוח TLC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע ניתוח HPLC רדיו על היפוך פאזות (RP) טור C18 29 השתמש בשלב הנייד הבא:. א &#39;- מים / חומצת trifluoroacetic (99.9% / 0.1%), ב&#39; - אצטוניטריל / חומצת trifluoroacetic (99.9% / 0.1%), שיפוע : 06 דק &#39;80% A → A 0% (0.5 מ&quot;ל / דקה), 610 0% דק (0.5 mL / min). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבע את עוצמות השיא של אותות הרדיו HPLC כאזור תחת עקומה. חישוב התשואה תיוג כמו טוהר radiochemical (RCP) של נותב כדלקמן: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (א Ga Ga + A-EOB-DTPA) ∙ 100% Ga-EOB-DTPA: שטח מתחת עקומה של 68 Ga [EOB-DTPA] Ga: שטח מתחת עקומה של חינם 68 Ga </li></ol></li></ol> יעילות תיוג 3. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את הליכי תיוג כמו לתארד בסעיף 2. השתמש מגוון עקבי של התחלת פעילות של 68 Ga eluate, למשל, 22-29 MBq (40-140 μl, תלוי את הרעננות של eluate). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף את הכמות הנדרשת של פתרון חיץ כדי להתאים את ה- pH ל 3.8-4.0 (40-190 μl, תלוי בנפח של 68 Ga eluate). להוסיף את הכמות הנדרשת של פתרון המניות ליגנד (10-70 μl של פתרון 19 מ&quot;מ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים את הסכומים הדרושים של מים כדי להתאים את ההיקף הכולל של כל בדיקה תיוג ל -1.75 מ&quot;ל. מערבבים היטב ולתת המדגם לעמוד במשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. ביצוע ניתוח HPLC כמתואר בסעיף 2 לקבוע את תשואת התיוג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את הליכי תיוג עם כמויות של ליגנד בין 0.1 מיקרוגרם ו -0.7 מיקרוגרם בצעדים של 0.1 מיקרוגרם. בצע ניסויים triplicates עבור כל ריכוז ליגנד. חישוב התשואה הממוצעת וסטיית תקן. </li></ol> 4. במבחנה יציבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> p הכלליrocedure והכנות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים טבלית בופר פוספט (PBS) ב 200 מ&quot;ל של מים ללא יונים להכין פתרון מניות PBS עם ריכוז פוספט של 10 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע תיוג של 22-29 MBq 68 Ga עם 0.5 μl של פתרון המניות EOB-DTPA, כמפורט בסעיף 2. בהתאם לנפח של 68 eluate Ga, להתאים את כמות חיץ, כמתואר בסעיף 3. משוך דגימות של פתרון תיוג המכיל 6-12 MBq של נותב לבצע מדידות יציבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע ניתוח רדיו TLC על צלחות אלומיניום מצופות ג&#39;ל סיליקה 80 מ&quot;מ באמצעות 0.1 נתרן ציטרט מימית M כמו eluent ולנתח את הצלחות עם סורק רדיואקטיביות TLC. 30 קביעת העוצמות של אותות TLC כאזור תחת עקומה. חשב את RCP של נותב כדלקמן: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (א Ga-חינם + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-קולואידים) ∙ 100% Ga-EOB-DTהרש&quot;פ: שטח מתחת עקומה של 68 Ga [EOB-DTPA] Ga-חינם: שטח מתחת עקומה של חינם 68 Ga Ga-colloidal: שטח מתחת עקומה של קולואידים 68 Ga </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב RCP t / RCP 0 עבור כל נקודת זמן. מגרש את RCP הסטנדרטי ובכך לעומת פרש שעות מאז דק &#39;נקודת מצא t = 0. T RCP = RCP של 68 Ga [EOB-DTPA] בזמן t נקודת זמן. RCP 0 = RCP של 68 Ga [EOB-DTPA] בזמן t = 0 דקות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יציבות בופר פוספט (א) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עד 65 μl של פתרון תיוג להוסיף 150 μl של פתרון המניות PBS ו 60 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. מערבבים היטב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( &quot;נקודת מוצא&quot;). מיד לאחסן הפתרון באינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC ב לייצגative מועדים לפי שעון מעל 3 שעות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יציבות כלפי עודף של apo -transferrin PBS (B) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 120 μl של פתרון תיוג להוסיף 50 μl של פתרון המניות PBS ו 430 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. הוסף 40 μl של פתרון של apo -transferrin (25 מ&quot;ג / מ&quot;ל). מערבבים היטב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( &quot;נקודת מוצא&quot;). מיד לאחסן הפתרון באינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC בנקודות נציג זמן מעל 3 שעות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יציבות בסרום אדם (C) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 500 μl של נסיוב אדם להוסיף 25 μl של פתרון תיוג ו -45 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) להעלות את ה- pH ל 7.4. מערבבים היטב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת aliquot של 1-5 μl לבצע ניתוח TLC ( &quot;נקודת מוצא&quot;). מיד לאחסן הפתרון בתוך incuבטור ב 37 מעלות צלזיוס ולהסיר aliquots לבצע ניתוח TLC בנקודות נציג זמן מעל 3 שעות. </li></ol></li></ol> קביעת 5. מקדם הפצת LogD <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את הליכי תיוג כמפורט בסעיף 2. 50 μl של פתרון תיוג להוסיף 20 μl של פתרון המניות PBS ו -170 μl של פתרון נתרן הידרוקסידי (0.1 M) כדי להעלות את ה- pH ל 7.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשוך עד 200 μl מאותו פתרון והכניס אותו לתוך פלסטיק V-בקבוקון. הוסף 200 μl של octanol n-. סגור את בקבוקון מערבולת למשך 2 דקות. ואז צנטריפוגות מדגם ב 1,600 XG במשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר triplicates של 40 μl משלב n -octanol ואת השלב מהימי כל ולשים אותם בתוך בקבוקוני V נפרדים. היזהר שלא לערבב את השכבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדוד את הפעילות של כל דגימה בתוך דלפק היטב גמא למשך 30 שניות. עבור כל דגימה מייד לחזור על המדידה פעמים ממנו לחשב את t Ᾱ הפעילות הממוצע </sub&gt; בספירה לדקה (CPM). יש לרשום את t כך זכו Ᾱ, W1, Ᾱ t, t W2 ו Ᾱ, W3 (פעילויות בדגימות מימית) ו Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (פעילויות octanol n-) יחד עם בהתאמה זמן נקודת t נחישותם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את נקודת הזמן של המדידה של המדגם האחרון כמו t 0. לקבוע ולפרט Δt בדקות ידי חישוב Δt = tt 0. בצע תיקון ריקבון של t Ᾱ, לפי הנוסחה הבאה: Ᾱ 0 = t Ᾱ · 2 (Δt / 68 דק &#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב Ᾱ 0, W כממוצע של Ᾱ 0, W1, 0 Ᾱ, W2 ו Ᾱ 0, W3 וכן Ᾱ 0, O כממוצע של Ᾱ 0, O1, 0 Ᾱ, O2 ו Ᾱ 0, O3. חישוב logD לפי הנוסחה הבאה: logD = יומן [(Ᾱ <sub&gt; 0, O · 40 מיקרוגרם) / (Ᾱ 0, W · 33 מיקרוגרם)]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו את הניסוי כולו ב triplicates ולחשב את ממוצע logD יחד עם סטיית התקן שלה. </li></ol>

<ol>
	<li>Weinmann, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+lipophilic+gadolinium+chelate+as+a+tissue-specific+contrast+medium+for+MRI.">A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI.</a> Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).</li><li>Stroszczynski, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aktueller+Stand+der+MRT-Diagnostik+mit+leberspezifischen+Kontrastmitteln.">Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln.</a> Radiologe. 44, 1185 (2004).</li><li>Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primovist,+Eovist+-+what+to+expect.">Primovist, Eovist - what to expect.</a> J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).</li><li>Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MR+Imaging+in+Patients+with+Suspected+Liver+Metastases:+Value+of+Liver-specific+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA.">MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA.</a> Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).</li><li>Leonhardt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Uptake+of+the+Magnetic+Resonance+Imaging+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA:+Role+of+Human+Organic+Anion+Transporters.">Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters.</a> Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).</li><li>Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinating+Radiometals+of+Copper,+Gallium,+Indium,+Yttrium,+and+Zirconium+for+PET+and+SPECT+Imaging+of+Disease.">Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease.</a> J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).</li><li>Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Imaging+with+PET.">Molecular Imaging with PET.</a> Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).</li><li>Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiometals+for+Combined+Imaging+and+Therapy.">Radiometals for Combined Imaging and Therapy.</a> Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).</li><li>Henze, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+Imaging+of+Somatostatin+Receptors+Using+[68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide:+First+Results+in+Patients+with+Meningiomas.">PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas.</a> J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).</li><li>Hofmann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biokinetics+and+imaging+with+the+somatostatin+receptor+PET+radioligand+68Ga-DOTATOC:+preliminary+data.">Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data.</a> Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).</li><li>Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorine-18:+a+new+isotope+for+bone+scanning.">Fluorine-18: a new isotope for bone scanning.</a> J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).</li><li>Green, M. A., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gallium+Radiopharmaceutical+Chemistry.">Gallium Radiopharmaceutical Chemistry.</a> Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).</li><li>R&#246;sch, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Past,+present+and+future+of+68Ge/68Ga+generators.">Past, present and future of 68Ge/68Ga generators.</a> Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).</li><li>Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+coordination+chemistry+in+the+development+of+target-specific+radiopharmaceuticals.">The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals.</a> Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).</li><li>Haubner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+(68)Ga-labelled+DTPA+galactosyl+human+serum+albumin+for+liver+function+imaging.">Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging.</a> Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).</li><li>Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asialoglycoprotein+Receptor-Targeted+Radiopharmaceuticals+for+Measurement+of+Liver+Function.">Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function.</a> Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).</li><li>Chauhan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga+based+probe+for+Alzheimer's+disease:+synthesis+and+preclinical+evaluation+of+homodimeric+chalcone+in+&#946;-amyloid+imaging.">68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in &#946;-amyloid imaging.</a> Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).</li><li>Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+evaluation+on+the+effect+of+metal+ion+impurities+on+complexation+of+generator+eluted+68Ga+with+different+bifunctional+chelators.">Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators.</a> Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).</li><li>Clevette, D. J., Orvig, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+ligands+of+differing+denticity+and+basicity+for+the+in+vivo+chelation+of+aluminum+and+gallium.">Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium.</a> Polyhedron. 9, 151-161 (1990).</li><li>Prinsen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+evaluation+of+a+68Ga+labeled+pamoic+acid+derivative+for+in+vivo+visualization+of+necrosis+using+positron+emission+tomography.">Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography.</a> Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).</li><li>Vogl, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+tumors:+comparison+of+MR+imaging+with+Gd-EOB-DTPA+and+Gd-DTPA.">Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA.</a> Radiology. 200, 59-67 (1996).</li><li>Reimer, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+clinical+evaluation+of+Gd-EOB-DTPA:+dose,+safety+aspects,+and+pulse+sequence.">Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence.</a> Radiology. , 177-183 (1996).</li><li>Ba-Ssalamah, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRT+der+Leber.">MRT der Leber.</a> Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).</li><li>Scott, R. P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Journal of Chromatography Library. 22A, A137-A160 (1983).</li><li>Reichenbaecher, M., Popp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , (2007).</li><li>Gross, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mass Spectrometry: A Textbook. , (2004).</li><li>Ma, T. S., Rittner, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Modern Organic Elemental Analysis. , (1979).</li><li>Mueller, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+NaCl+Based+68Ga+Concentration+and+Labeling+Procedure+for+Rapid+Synthesis+of+68Ga+Radiopharmaceuticals+in+High+Radiochemical+Purity.">Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity.</a> Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).</li><li>Roberts, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radio-column+chromatography.">Radio-column chromatography.</a> Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).</li><li>Roberts, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radio-thin-layer+chromatography.">Radio-thin-layer chromatography.</a> Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).</li><li>Green, M. A., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gallium+radiopharmaceutical+chemistry.">Gallium radiopharmaceutical chemistry.</a> Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).</li><li>Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone-seeking+TRAP+conjugates:+surprising+observations+and+their+implications+on+the+development+of+gallium-68-labeled+bisphosphonates.">Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates.</a> EJNMMI Res. 2, 13 (2012).</li><li>Schmitt-Willich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+Physicochemical+Characterization+of+a+New+Gadolinium+Chelate:+The+Liver-Specific+Magnetic+Resonance+Imaging+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA.">Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA.</a> Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).</li><li>Zhernosekov, K., Nikula, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga+generator+for+positron+emission+tomography.">68Ga generator for positron emission tomography.</a> , (2012).</li><li>Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+is+68Ga+Labeling+of+Macrocyclic+Chelators+Influenced+by+Metal+Ion+Contaminants+in+68Ge/68Ga+Generator+Eluates?.">How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates?.</a> ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).</li><li>Baur, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis,+Radiolabelling+and+In+Vitro+Characterization+of+the+Gallium-68-,+Yttrium-90-+and+Lutetium-177-Labelled+PSMA+Ligand,+CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep.">Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep.</a> Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).</li><li>Boros, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RGD+conjugates+of+the+H2dedpa+scaffold:+synthesis,+labeling+and+imaging+with+68Ga.">RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga.</a> Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).</li><li>Beck, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Hematology. , (1998).</li><li>Patel, V., Morrissey, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Practical and Professional Clinical Skills. , (2001).</li><li>Bartke, A., Constanti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Basic Endocrinology. , (1998).</li><li>Bernstein, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Therapeutic+Activity+for+Gallium.">Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium.</a> Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).</li><li>Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=67Ga+Binding+to+Human+Serum+Proteins+and+Tumor+Components.">67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components.</a> Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).</li><li>Dumont, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+64Cu-+and+68Ga-Labeled+RGD+conjugates+show+improved+PET+imaging+of+&#945;v&#946;3+integrin+expression+and+facile+radiosynthesis+[Erratum+to+document+cited+in+CA156:116856.">Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of &#945;v&#946;3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856.</a> J. Nucl. Med. 52, 1498 (2011).</li><li>Pohle, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga-NODAGA-RGD+is+a+suitable+substitute+for+18F-Galacto-RGD+and+can+be+produced+with+high+specific+activity+in+a+cGMP/GRP+compliant+automated+process.">68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process.</a> Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).</li><li>Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Be+spoilt+for+choice+with+radiolabelled+RGD+peptides:+Preclinical+evaluation+of+68+Ga-TRAP(RGD)3.">Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3.</a> Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

EOB-DTPA נגיש באמצעות סינתזה רבה שלב 33 אבל יכול באותה מידה להיות מבודד חומר ניגוד זמין המכיל חומצת gadoxetic. לשם כך, יון המרכזי אלוקים (III) ניתן זירז עם עודף של חומצה אוקסלית. לאחר הסרת ה (III) אוקסלט וחומצה אוקסלית ליגנד יכול להיות מבודד על ידי משקעים במים קרים ב- pH 1.5. עם זאת, על מנת לשפר את התשואות עמודה כרומטוגרפיה של תסנין יכול להתבצע במקום או כהליך מעקב. אחת מהשיטות מניב ליגנד טהור אנליטית ב סך התשואות של 70% (איורים 1-3, טבלה 1). מצאנו כי על מנת לבודד Ga [EOB-DTPA] התאמת pH עם פתרון האמוניה יתרון לעומת השימוש נתרן הידרוקסידי, מאז אמוניום כלוריד תוצר לוואי ניתן להסיר שאריות מאוד הידרופילי באמצעות סובלימציה. תחת התנאים הנ&quot;ל תהליך זה מתרחש איטיly. מאז כמויות זניחות של כלוריד היו עדיין לזיהוי לאחר חמישה ימים, מלח הנותרים נשטף החוצה עם מתנול. למרות התוצאות נוהל עבודה-אפ זה אובדן חלקי של Ga [EOB-DTPA], המוצר הושג בטהרה אנליטי עם תשואה כוללת של 46% (איורים 4-6, טבלה 1). עבור הבידוד של שניהם EOB-DTPA ואת Ga שלה (III) המורכב, שימוש כרומטוגרפיה שלב התהפך צריך להיחשב שיטה חלופית של טיהור, במיוחד מאז הפירוק של ג&#39;ל סיליקה צפוי בעת שימוש בממסים קוטביים מאוד. תהליך התיוג של EOB-DTPA נדרש שימוש מאוד טהור ממיסים, כימיקלים וציוד ללא מתכת כדי למנוע את נוכחותו של יונים של מתכות מתחרה, בשל 68 Ga להיות נוכח כמויות nanomolar (2 MBq של 68 Ga במדגם 1.75 מ&quot;ל שווה ריכוז נוקליד של 0.14 ננומטר). תיוג של EOB-DTPA 68 Ga מתרחש ב- pH 3.8-4.0 תוך חמש דקותאוטי בטמפרטורת החדר. חקירות על 68 יעילויות Ga-התיוג דורשות קביעת תשואת התיוג תוך שמירה על pH תנאי תגובה, הטמפרטורה וזמן תגובה וכן התחלת פעילות של 68 Ga קבוע או במגוון מוצדק. עבור כל נקודת נתונים (כלומר, ריכוז ליגנד) הניסוי צריכה להתבצע לפחות שלוש פעמים כדי לספק ברמת ביטחון סבירה, שכן ריכוזי הן של ליגנד ו -68 Ga נמצאות ברמות נמוכות מאוד והתשואה תיוג ולכן רגישים סטיות קלות אפילו של תנאי תגובה. לדוגמה, כפי הגילאים eluate 68 Ga, aliquots של הגדלת נפח צריך להיות מסוגר לספק פעילות פתיחה קבועה, ובכך הדורשים כרכים גדל והולך של חיץ. יתר על כן, הזדקנות תוצאות eluate בהגדלת ריכוזים של Zn 68 מוצר הדעיכה, שבעצמו עלול לפעול כמתחרה 68 Ga, ובכך להשפיע באופן שלילי labelinיעילות גרם. 13,34,35 כמעט תיוג כמותי של 22-29 MBq 68 Ga מושגת בתנאים הנ&quot;ל עם כמויות של EOB-DTPA ≥ 0.7 מיקרוגרם (איור 9), עם תוכן חינם 68 Ga ≤ 2% וכ -5 % של ההווה קולואידים 68 Ga בדגימות. בעוד HPLC בתנאי הפרדה הבסיס מעולה של חינם 68 Ga Ga ו -68 [EOB-DTPA], שהוא אינו מתאים לאיתור קולואידים 68 Ga. לפיכך בחרנו TLC לקבוע את RCP במהלך מדידות יציבות, שבו הכימות של transferrin או חלבון נכנס 68 Ga נדרש. מצאנו הפרדת בסיס מקובלת למטרה זו (איור 10); עם זאת, השימוש בשיטות סינון כרומטוגרפיה או הדרת גודל 15,36 להסיר שברי קולואידים, ואחריו ניתוח HPLC, עלולים להיחשב חלופות. מתחם Ga 68 מפגין במיל חזקention על צלחות TLC (ו R = 0.3) אם המדגם הוא למשוך ממנה ישירות מפתרון תיוג בניגוד דגימות ב- pH פיזיולוגי (ו R = 0.5). אנו מציעים התבוננות זו עשויה להיות מוסברת על ידי מדינות protonation אחרות של המתחם. בשנת קביעות ויציבות חוץ גופייה של 68 קליעים נותבים Ga מבוצעות בדרך כלל ב PBS 15,17 או מערכות חיץ אלטרנטיבה מחקו את pH הפיזיולוגי 37, וכן פתרונות המכילים apo- transferrin 37, המהווה את המתחרה העיקרית 68 Ga בדם, או 15,17 נסיוב אדם. בניסויים שלנו תוספת של פתרון הידרוקסיד 0.1 M נתרן כדי PBS נדרשה להתאים את ה- pH של דגימות ל -7.4. לא יכולנו לטעון כי ריכוז פוספט משפיע על קצב הפירוק, מאז ניסויים יציבים בפתרונות של משתנה ריכוז פוספט (0.8 מ&quot;מ ו 5.5 מ&quot;מ (א)) ניב הלא reproduתוצאות cible. עם זאת, מצאנו כי B פתרון, המכיל apo -transferrin (1.6 מ&quot;ג / מ&quot;ל, אשר נמצא בטווח של תוכן פלזמה נורמלית 38) ו -0.8 פוספט מ&quot;מ (דם אדם בדרך כלל מפגין רמה פוספט של 0.8-1.5 מ&quot;מ 39,40 מקביל), גרם פירוק בשיעור לזה הנצפה בסרום אדם (C). בפתרונות AC, לאחר 185 דקות התוכן של קולואידים 68 Ga עלה בכ 24%, בעוד שהתוכן של חינם 68 Ga עלה ב 11% בתמיסה, 17% B פתרון ו -27% ב- C פתרון (לוח 2 ). העובדה כי 68 Ga נוצר על ידי פירוק נותב קיימת בעיקר כמו 68 Ga חינם בניגוד קולואיד או הנכנס חלבון 68 Ga ב B ו- C יכול להיות בגלל רווית transferrin או וזהוב איטיים שיעורי מחייב transferrin. <sup&gt; 41 היציבות הכוללת נמוכות והנצפות (איור 11) של 68 Ga [EOB-DTPA] ניתן להשוות קליעים נותבים שמציעים chelators נגזר DTPA דומה. 15,16,18 בדרך כלל, מידע על העורקים מוקדם שלב זלוף ורידים של הכבד הם שנרכשו על ידי ביצוע סריקות MRI בתוך 3 הדקות הראשונות 4,21 שלאחר מתן הקב&quot;ה [EOB-DTPA], בעוד שנוכחות hepatocyte מזוהה בשלב מתעכב 20 דקות 3,4,23 עד כמה שעות לאחר ההזרקה 21,22. לאחר 20 דקות בסרום אדם 93% של 68 Ga [EOB-DTPA] נותרו על כנן. כצפוי, יחס אות לרעש עד אז היה הידרדר בשל כמויות גדלות והולכות של 68 Ga-transferrin, אשר שוהה קולטנים transferrin להביע פלזמה רקמות, כמו גם בחינם 68 gallate Ga. 41,42 לניבוי חלוקת רקמות קליעים נותבים n- octanol / מי מחיצה מקדמי להתחברמקדמי P או הפצה logD ניתן לקבוע יחס של ריכוזי פעילות בשני השלבים. על פי הגדרה, פרמטר logD אינו מבחינה בין מספר מינים הנמצאים בתווך, מה שהופך אותו מתאים הניסויים שלנו בשל האפשרות של מדינות protonation שונות של נותב וכן הפירוק שלה בשלב המימי. כדי לקבוע logD ידי מיצוי המדיום המימי בדרך כלל נאגר עם PBS לחקות את תנאי דם. 17,43-45 מסיבות הנ&quot;ל השתמשנו מדולל PBS, מפגין ריכוז פוספט של 0.8 מ&quot;מ ו- pH הפיזיולוגי. לאחר מיצוי עם n -octanol צנטריפוגה, הסרת מספר aliquots מאותו שלב מאפשר לאי דיוקים שנגרמו על ידי pipetting להצטמצם. בשל ריכוזי פעילות נמוכים מאוד octanol n- אחד צריך להיות זהיר, כדי למנוע זיהום צולב עם השלב המימי ולהבטיח העברה כמוני לתוך בקבוקון נפרד. distribמקדמי ution נקבע על ידי הליך זה היו לשחזור, ובעוד הם מאפשרים הערכה גסה של lipophilicity, השוואה ישירה logP של הקב&quot;ה [EOB-DTPA] אינו אפשרי. בשל הספציפיות של הקב&quot;ה [EOB-DTPA] וכתוצאה מכך לא בעיקר lipophilicity אלא ניסויים נוספים ספיגת כיס שלה במקצועות או תאים חיים יהיה צורך לספק מידע נרחב יותר על biodistribution כמו גם יציבות in vivo של 68 Ga [EOB -DTPA]. בסך הכל, יישום כסוכן הדמיה עבור זלוף שלב כיס מוקדם שאפשר להעלות על הדעת.

חומצת Gadoxetic, שם נפוצה למתחם ה (III) של ליגנד EOB-DTPA 1, היא חומר ניגוד תדיר הדמיה בתהודה מגנטית כיס (MRI). 2,3 בשל הספיגה הספציפית שלה על ידי hepatocytes הכבד אחוז הגבוה של הפרשת כיס הוא מאפשר הלוקליזציה של נגעי מוקדים וגידולים בכבדים. 2-5 עם זאת, הגבלות מסוימות של טכניקת MRI (למשל, רעילות של חומר הניגוד, תחולה מוגבלת בחולים עם שתלים קלסטרופוביה או מתכת) קוראים לשים כלי אבחון אלטרנטיביים . טומוגרפיה פוזיטרונים (PET) היא שיטת הדמיה מולקולרית, שבה כמות קטנה של חומר רדיואקטיבי (נותב) מנוהלת, שעליו ההפצה שלה בגוף נרשמה על ידי סורק PET. PET 6 הוא שיטה דינמית המאפשרת גבוה במרחב ובזמן הרזולוציה של תמונות כמו גם כימות של תוצאות, מבלילהתמודד עם תופעות הלוואי של חומר ניגוד MRI. ערך אינפורמטיבי של מידע מטבולית המתקבל ניתן להגדיל עוד יותר על ידי שילוב עם נתונים אנטומיים המתקבלים בשיטות הדמיה נוספות, כמו רוב מושגת בדרך כלל על ידי הדמיה היברידית עם טומוגרפיה ממוחשבת (CT) ב סורקי PET / CT. המבנה הכימי של נותב מתאים PET חייב לכלול איזוטופ רדיואקטיבי המשמש פולט פוזיטרון. יש פוזיטרונים תוחלת חיים קצרה מאז הם כמעט מייד להשמיד עם אלקטרונים של הפגזים האטומים של רקמה הסובבת. על ידי השמדת שני פוטונים גמא 511 keV עם בכיוון ההפוך של התנועה נפלטים, הנרשמות על ידי סורק PET. 7,8 כדי לגבש נותב, nuclides PET עשוי להיות מחויב קוולנטית מולקולה, כפי שנהוג ב 2-deoxy- 2- [18 F] fluoroglucose (FDG), נותב PET בצורה המקיפה ביותר בשימוש. 7 עם זאת, נוקליד עלול גם ליצור קשרים קואורדינטיבית כדי הליגנדים אחד או כמה (למשל, [68 Ga] 9,10 -DOTATOC) או להיות מיושם גם מלחים אורגניים מומסים (למשל, [18 F] נתרן פלואוריד 11). בסך הכל, את המבנה של נותב קריטי, מאחר שהוא קובע את ההתנהגות biodistribution, מטבוליזם והפרשה שלה. נוקליד PET מתאים צריך לשלב מאפיינים נוחים כמו אנרגית פוזיטרונים נוחה וזמין כמו גם זמן מחצית חיים נאותים לחקירה המיועדת. נוקליד 68 Ga נעשה כוח חיוני בתחום PET בשני העשורים האחרונים. 12,13 זאת בעיקר בשל זמינותו באמצעות מערכת גנרטור, אשר מאפשרת תיוג באתר באופן עצמאי מהסביבות של הציקלוטרון. בשנת גנרטור, האמא נוקליד 68 Ge נספג על עמודה שממנה נוקליד הבת 68 Ga הוא eluted ובהמשך שכותרתו אל chelator מתאים. 6,14 מאז 68 נוקליד Ga קיים בתור trivalקטיון ent בדיוק כמו אלוקים (III) 10,13, chelating EOB-DTPA עם 68 Ga במקום תניב קומפלקס עם אותו מטען שלילי הכולל כחומצה gadoxetic. בהתאם לכך, 68 כי נותבה Ga יכולה להשתלב סגוליות כבדות מאפיין דומות עם התאמותיו הדמית PET. למרות חומצת gadoxetic נרכשה ו מנוהלת כמו מלח disodium, בהקשר הבא נתייחס אליו כאל אלוקים [EOB-DTPA] וכדי במתחם שאינו רדיואקטיבי Ga (III) כמו Ga [EOB-DTPA], או 68 Ga [ EOB-DTPA] במקרה של רכיב רדיואקטיבי למען הנוחות. כדי להעריך את התאמתם כמו קליעים נותבים עבור PET, מתחמי מתכת רדיואקטיבית צריכים להיבדק בהרחבה במבחנה, in vivo או ניסויי vivo לשעבר ראשון. כדי לקבוע את התאמתו של בעיה רפואית בהתאמה, מאפיינים נותבו שונים כמו התנהגות biodistribution ופרופיל סיקול, יציבות, סגולי איברי תא או tissuדואר ספיגת צריך להיחקר. בשל האופי שלהם לא פולשנית, קביעות במבחנה מבוצעות לרוב לפני ניסויי in vivo. זה להניח שגילויי DTPA ונגזרותיו הם ההתאמה מוגבלת chelators עבור 68 Ga בשל קומפלקסים אלה חסר אדישות קינטית, וכתוצאה מכך ריקבון מהיר וזהובה כאשר מנוהל in vivo. 14-20 זו נגרמת בעיקר על ידי apo- transferrin מתנהג כמו מתחרה עבור 68 Ga בפלסמה. אף על פי כן, חקרנו נותב חדש זו בדבר היישום האפשרי שלה בתחום הדמית כיס, שבו מידע אבחון עשוי להינתן בתוך דקות לאחר הזרקה 3,4,21-23, ובכך לא בהכרח הדורשים יציבות נותב לטווח ארוך. לשם כך אנחנו מבודדים EOB-DTPA מחומצה gadoxetic ובתחילה ביצע את complexation עם Ga טבעי (III), אשר קיים כפי תערובת של שני איזוטופים יציבים, 69 Ga ו -71 </sup&gt; Ga. המתחם ובכך השיג שמש כסטנדרט שאינו רדיואקטיביים עבור קלאציה הבא של 68 Ga. השתמשנו הוקם שיטות ובמקביל הערכנו התאמתו לקביעת יעילות 68 Galabeling של EOB-DTPA ולחקור את lipophilicity של נותב החדש 68 Ga ויציבותה מדיה שונה.

<table><tbody><tr><td>primovist</td><td>Bayer</td><td>-</td><td>0.25 M</td></tr><tr><td>gallium(III) chloride</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>450898</td><td></td></tr><tr><td>water (deionized)</td><td>-</td><td>-</td><td>tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH</td></tr><tr><td>hydrochloric acid 12 M</td><td>VWR</td><td>20252.29</td><td></td></tr><tr><td>sodium hydroxide</td><td>Polskie Odczynniki Chemiczne S.A.</td><td>810925429</td><td></td></tr><tr><td>oxalic acid</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>75688</td><td></td></tr><tr><td>ethyl acetate</td><td>Brenntag GmbH</td><td>10010447</td><td></td></tr><tr><td>silica gel</td><td>Merck KGaA</td><td>1.10832.9025</td><td>Geduran Si 60 0.063-0.2&amp;nbsp;mm</td></tr><tr><td>TLC silica gel 60 F254</td><td>Merck KGaA</td><td>1.16834.0001</td><td></td></tr><tr><td>methanol</td><td>VWR</td><td>20903.55</td><td></td></tr><tr><td>ethanol</td><td>Brenntag GmbH</td><td>10018366</td><td></td></tr><tr><td>eiethylether</td><td>VWR</td><td>23807.468</td><td>stored over KOH plates</td></tr><tr><td>ammonia solution (25%)</td><td>VWR</td><td>1133.1</td><td></td></tr><tr><td>pH electrode</td><td>VWR</td><td>662-1657</td><td></td></tr><tr><td>stirring and heating unit</td><td>Heidolph</td><td>505-20000-00</td><td></td></tr><tr><td>pump</td><td>Ilmvac GmbH</td><td>322002</td><td></td></tr><tr><td>frit</td><td>-</td><td>custom design</td><td></td></tr><tr><td>NMR spectrometer</td><td>Bruker Coorporation</td><td>-</td><td>Ultra Shield 400</td></tr><tr><td>mass spectrometer</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>elemental analyser</td><td>Hekatech GmbH Analysentechnik</td><td>-</td><td>EuroVector EA 3000 CHNS</td></tr><tr><td>deuterated water D&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>euriso-top</td><td>D214</td><td>99.90% D</td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Material/Equipment required for labeling procedures&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;sup&gt;68&lt;/sup&gt;Ge/&lt;sup&gt;68&lt;/sup&gt;Ga generator</td><td>ITG Isotope Technologies Garching GmbH</td><td>A150</td><td></td></tr><tr><td>pump and dispenser system</td><td>Scintomics GmbH</td><td>-</td><td>Variosystem</td></tr><tr><td>hydrochloric acid 30% (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00318.1000</td><td></td></tr><tr><td>water (ultrapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.01262.1000</td><td></td></tr><tr><td>sodium chloride (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.06406.0500</td><td></td></tr><tr><td>sodium acetate (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.06264.0050</td><td></td></tr><tr><td>glacial acetic acid (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00066.0250</td><td></td></tr><tr><td>sodium citrate dihydrate</td><td>VEB Laborchemie Apolda</td><td>10782</td><td>&gt;98.5%</td></tr><tr><td>PS-H&lt;sup&gt;+&lt;/sup&gt; Cartridge (S)</td><td>Macherey-Nagel</td><td>731867</td><td>Chromafix</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;apo&lt;/em&gt;-Transferrin</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>T2036</td><td></td></tr><tr><td>PBS buffer (tablets)</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>79382</td><td></td></tr><tr><td>human serum</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>H4522</td><td>from human male AB plasma</td></tr><tr><td>flasks, columns, &lt;em&gt;etc.&lt;/em&gt;</td><td></td><td>custom design</td><td></td></tr><tr><td>pH electrode</td><td>Knick Elektronische Messger&amp;auml;te GmbH &amp;amp; Co. KG</td><td>765-Set</td><td></td></tr><tr><td>binary pump (HPLC)</td><td>Hewlett-Packard</td><td>G1312A (HP 1100)</td><td></td></tr><tr><td>UV Vis detector (HPLC)</td><td>Hewlett-Packard</td><td>G1315A (HP 1100)</td><td></td></tr><tr><td>radioactive detector (HPLC)</td><td>EGRC Berthold</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HPLC C-18-PFP column</td><td>Advanced Chromatography Technologies Ltd.</td><td>ACE-1110-1503/A100528</td><td></td></tr><tr><td>HPLC glass vials</td><td>GTG Glastechnik Graefenroda GmbH</td><td>8004-HP-H/i3&amp;micro;</td><td></td></tr><tr><td>pipette</td><td>Eppendorf</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>plastic vials</td><td>Sarstedt AG &amp;amp; Co.</td><td>6542.007</td><td></td></tr><tr><td>plastic vials</td><td>Greiner Bio-One International GmbH</td><td>717201</td><td></td></tr><tr><td>activimeter</td><td>MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH</td><td>-</td><td>Isomed 2010</td></tr><tr><td>tweezers</td><td></td><td>custom design</td><td></td></tr><tr><td>incubator</td><td>Heraeus Instruments GmbH</td><td>51008815</td><td></td></tr><tr><td>vortex mixer</td><td>Fisons</td><td>-</td><td>Whirlimixer</td></tr><tr><td>centrifuge</td><td>Heraeus Instruments GmbH</td><td>75003360</td><td></td></tr><tr><td>gamma well counter</td><td>MED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH</td><td>-</td><td>Isomed 2100</td></tr><tr><td>water for chromatography</td><td>Merck KGaA</td><td>1.15333.2500</td><td></td></tr><tr><td>acetonitrile for chromatography</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00030.2500</td><td></td></tr><tr><td>trifluoroacetic acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>91707</td><td></td></tr><tr><td>TLC radioactivity scanner</td><td>raytest Isotopenmessger&amp;auml;te GmbH</td><td>B00003875</td><td>equipped with beta plastic detector</td></tr></tbody></table>

investigations on the ga(iii) complex of eob-dtpa and its 68ga radiolabeled analogue

אנו להדגים שיטה לבידוד של EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-טריס (carboxymethyl) -4- (ethoxybenzyl) חומצה -undecanedioic) מ שלה אלוקים (III) מורכבים ופרוטוקולים הכנת שאינם רדיואקטיביים, כלומר, טבעי Ga (III) כמו גם רדיואקטיבי 68 Ga מורכב הרומן שלה. ליגנד כמו גם Ga (III) מורכבים התאפיינו תהודה מגנטית גרעינית (NMR) ספקטרוסקופיה, ספקטרומטריית מסה ניתוח יסודי. 68 Ga הושג על ידי שיטה elution תקן מגנרטור Ga 68 Ge / 68. ניסויים להעריך את היעילות 68 Ga-תיוג של EOB-DTPA ב- pH 3.8-4.0 בוצעו. טכניקות ניתוח הוקמה רדיו TLC (כרומטוגרפיה בשכבה דקה) ו HPLC רדיו (כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים) שימשו כדי לקבוע את טוהר radiochemical של נותב. כתוצאה החקירה הראשונה של 68 Ga קליעים נותבים &#39;lipophilicity הפצת octanol / מים n-מקדם n של 68 Ga מינים נוכחים פתרון pH 7.4 נקבע על פי שיטת חילוץ. מדידות יציבות במבחנה של נותב באמצעי תקשורת השונה ב- pH הפיזיולוגי בוצעו, חושף תעריפים שונים של ריקבון.

ליגנד EOB-DTPA ואת Ga שאינו רדיואקטיבי (III) מורכבים נותחו באמצעות 1 H ו- 13 C {1} H ספקטרוסקופיה NMR, ספקטרומטריית מסה ניתוח יסודי. התוצאות המפורטות בטבלה 1 ו מתואר איורים 1-6 לאמת את הטוהר של חומרים. Elution של הגנרטור 68 Ge / 68 Ga הניבו פתרונות של 400-600 MBq 68 Ga. תוצאות הליך תיוג המתוארות ההיווצרות של Ga 68 נותב הרצוי [EOB-DTPA], הצביעו כפי שיא הרדיו HPLC מפגין זמן שמירה של 2.8 דק &#39;(איור 7). השוואה עם זמן השמירה של התקן Ga [EOB-DTPA] ב גלאי UV-VIS ב 220 ננומטר (2.7 דק &#39;, איור 8) מאשרת תיוג מוצלח. 68 Ga מתואמים הוא זוהה כמו שיא רדיו ב 2.1 דקות (איור7). 68 יעילות Ga-התיוג של איו-BDTPA נחקרו על ידי קביעת תשואת התיוג כפונקציה של הריכוז ליגנד באמצעות HPLC (איור 9). התשואות נקבעו בשלושה עותקים וסטיות תקן חושבו. בהתאם pH ואת הריכוז של אניונים נוכח פתרון, ללא תיאום או אי שכותרתו 68 Ga עשויה להתקיים מינים שונים, למשל, gallates או הידרוקסיד מסיס. 31 המונח הכוללני &quot;חינם 68 Ga&quot; 32 משמש לכל אי שכותרתו מינים בתמיסה למעט הידרוקסיד, אשר בדרך כלל, המכונה &quot;קולואידים 68 Ga&quot;. בתנאי הניתוח תארו, חינם 68 Ga נע עם חזית הממס (ו R = 1.0) על צלחת TLC. קולואיד 68 Ga לא ניתן לאתר באמצעות HPLC, בעוד על צלחת TLC נראה כפעילותבראשית הצירים (R f = 0). הכרומתוגרמה נציג צלחת TLC נתחה עם סורק רדיואקטיביות TLC מוצגת באיור 10. נותבו מפגין התנהגות שמירה שונה, תלוי אם מדגם של פתרון תיוג (pH 3.8-4.0, f R = 0.3) או מדגם של פיסיולוגי (ו R = 0.5) pH נותח. כדי לחקור את היציבות של נותב, שכותרתו טרי 68 Ga [EOB-DTPA] התווסף דגימות של pH פיזיולוגי, המכיל מדולל PBS (ריכוז פוספט 5.5 מ&quot;מ, א), עודף של apo- transferrin (1.6 מ&quot;ג / מ&quot;ל ב מדולל PBS עם ריכוז פוספט של 0.8 מ&quot;מ, ב &#39;) בסרום (C האדם), בהתאמה. במשך הזמן, את הטוהר radiochemical (t RCP) של נותב בדגימות נקבע באמצעות TLC. אחוז נותב שמורים היה מחושב כיחס בין RCP t בנקודות הזמן בהתאמה RCP 0 בנקודת ההתחלה (טבלה 2). זה היה הכרחי בשל פתרונות התיוג המכילים נותב ברמות שונות ומגוונות של 0 RCP (93-96%). ובכך אחוז מתוקנן של נותב שלם מתואר כפונקציה של זמן באיור 11. לקביעת דגימות מימית logD של נותב בתמיסה מדוללת PBS היו מוכנים. הדגימות היו מעורבים עם octanol n-, centrifuged ובהמשך aliquots הוסרו כדי לקבוע את ריכוז הפעילות בשני שלבים. ערכי פעילות והחישוב הבא של logD מהם מתוארים בטבלה 3. שווי logD הממוצע הוא 3.54 ± 0.08. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig1.jpg" /> איור 1. 1 ספקטרום H-NMR של EOB-DTPA. &lt;<html> / strong&gt; הספקטרום נרשם D 2 O ב- ​​400.1 MHz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig2.jpg" /> איור 2. 13 C {1} H ספקטרום -NMR של EOB-DTPA. הספקטרום נרשם D 2 O ב- ​​100.6 MHz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig3.jpg" /> איור 3. MS של EOB-DTPA (יינון electrospray (ESI), מתנול, מצב שלילי).54334fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig4.jpg" /> איור 4. 1 ספקטרום H-NMR של Ga [EOB-DTPA]. הספקטרום נרשם D 2 O ב- ​​400.1 MHz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig5.jpg" /> איור 5. 13 C {1} H ספקטרום -NMR של Ga [EOB-DTPA]. הספקטרום נרשם D 2 O ב- ​​100.6 MHz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ אותה</a><html> דואר כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig6.jpg" /> איור 6. MS של Ga [EOB-DTPA] (ESI, מתנול, מצב שלילי), יחד עם תיאור מפורט של דפוס איזוטופ של השיא המולקולרי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig7.jpg" /> איור 7. הכרומתוגרמה הנציג HPLC של מדגם של 68 Ga [EOB-DTPA] המכיל בחלקים מתואם 68 Ga, כפי שנרשם על ידי גלאי הרדיואקטיביות. המתואם 68 Ga מפגין זמן שמירה של 2.1 דקות, בעוד נותב מזוהה ב -2.8 דקות .Target = &quot;_ blank&quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig8.jpg" /> איור 8. הכרומתוגרמה הנציג HPLC של החומר הסטנדרטי Ga [EOB-DTPA], כפי שזוהה על באפיק מול UV ב 220 ננומטר. שעת השמירה של ההתקן הקר היא 2.7 דקות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של זה דמות.</a> <img alt="איור 9" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig9.jpg" /> תיאור איור 9. של 68 יעילות Ga-תיוג של EOB-DTPA. תשואת התיוג כפי שנקבע באמצעות HPLC זמם כפונקציה של הריכוז של EOB-DTPA (22-29 פעילות החל MBq, pH 3.8-4.0, 5 דקות, RT). סטיית התקן מתואר על ידי מוטות שגיאה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig9large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 10" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig10.jpg" /> נציג איור 10. הכרומתוגרמה TLC חושף מינים 68 Ga שונים. מדגם של 68 Ga [EOB-DTPA] ב PBS בדילול (ריכוז פוספט 5.5 מ&quot;מ, pH = 7.4) נותח לאחר 110 דקות של דגירה. הפצה למופת של קולואידים 68 Ga (R f = 0), 68 Ga [EOB-DTPA] (ו R = 0.5) וחופשי 68 Ga (R f = 1.0) על צלחת 70 מ&quot;מ TLC כפי שזוהו על ידי סורק רדיואקטיביות TLC הוא מוצג. ספירה היא ריקבון תיקן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig10large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גדול</a>גרסה של נתון זה. <img alt="איור 11" src="/files/ftp_upload/54334/54334fig11.jpg" /> איור 11. קביעות יציבות של 68 Ga [EOB-DTPA] מדיה שונה. תיקן מתנוונים, אחוז מתוקנן של נותב שלם כפי שנקבעו באמצעות TLC, מתוארות כפונקציה של זמן. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54334/54334fig11large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו .</a> <img alt="שולחן 1" src="/files/ftp_upload/54334/54334table1.jpg" /> תוצאות טבלת 1. ספקטרוסקופיות NMR, MS וניתוחי יסודות בצעו עבור EOB-DTPA ואת Ga [EOB-DTPA]. עוצמות שיא יחסית MS ניתנים%, הקצאה לשיאים ניתנות בסוגריים מרובעים. ערכי CHN יסודות היו Calcu<html> lated עבור C 23 H 33 N 3 O 11 · H 2 O (EOB-DTPA) ו- (NH 4) 0.75 H 1.25 [C 23 H 28 גן 3 O 11] · 2H 2 O (Ga [EOB-DTPA]). <img alt="טבלה 2" src="/files/ftp_upload/54334/54334table2.jpg" /> נחישות יציבות טבלת 2. 68 Ga [EOB-DTPA] מדיה שונה. המפלגה הקומוניסטית הרומנית של 68 Ga [EOB-DTPA] במדיה A, B ו- C נקבעה באמצעות TLC בנקודות זמן נתון. רכב הדגימות ניתן אחוזי% של נותב / חינם 68 Ga / קולואידים 68 Ga. אחוז נותב שלמים הוא טופל כמו יחס של RCP t / RCP 0. RCP 0 הוא RCP בהתאמה של נותב ב t = 0 דקות. ss = &quot;jove_content&quot; FO: keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="טבלה 3" src="/files/ftp_upload/54334/54334table3.jpg" /> . קביעת לוח 3. של logD Decay תיקן ערכים אלפא 0, X של שלושה aliquots (x = 1, 2, 3) יוסר כל שלב (W: מימית, O: n -octanol) של מדגם. כל הפעילויות ניתנות לדקה. LogD מחושבת כמפורט בסעיף 5 לפרוטוקול. הניסוי חזר על עצמו פעמים.

Watch this Scientific Journal Video about Investigations on the GaIII Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue at JoVE.com

Investigations on the GaIII Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

הליך הבידוד של EOB-DTPA ואת complexation הבא עם Ga הטבעי (III) ו -68 Ga מוצגת במסמך זה, כמו גם ניתוח מעמיק של כל התרכובות והחקירות יעילות תיוג, היציבות במבחנה ומי octanol / n- מקדם חלוקה של מתחם רדיואקטיבי.

חקירות על קומפלקס Ga (III) של EOB-DTPA ו שלה<sup&gt; 68</sup&gt; Ga radiolabeled Analogue

We demonstrate a method for the isolation of EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris(carboxymethyl)-4-(ethoxybenzyl)-undecanedioic acid) from its Gd(III) ...

investigations-on-ga-iii-complex-eob-dtpa-its-68ga-radiolabeled

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Chemistry

Investigations on the Ga(III) Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

9.9K Views.  University Hospital Jena.  הליך הבידוד של EOB-DTPA ואת complexation הבא עם Ga הטבעי (III) ו -68 Ga מוצגת במסמך זה, כמו גם ניתוח מעמיק של כל התרכובות והחקירות יעילות תיוג, היציבות במבחנה ומי octanol / n- מקדם חלוקה של מתחם רדיואקטיבי. 

Video: Investigations on the GaIII Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

A Practical Guide for the Production and PET/CT Imaging of 68Ga-DOTATATE for Neuroendocrine Tumors in Daily Clinical Practice

Neuroendocrine tumors are a rare form of cancer that arise from neuroendocrine cells and can be present at almost any location throughout the body. Although heterogeneous in presentation, a common denominator among these tumors is the overexpression of somatostatin receptors. 68Ga-DOTATATE is a somatostatin analog labeled with the positron emitter gallium-68 (68Ga). For well-differentiated neuroendocrine tumors, 68Ga-DOTATATE positron emission tomography (PET)/computed tomography (CT) imaging is used for diagnosis, determination of disease burden, and therapy selection.
This protocol details the radiolabeling of 68Ga-DOTATATE, quality control, patient preparation, and subsequent PET/CT imaging. Radiolabeling of 68Ga-DOTATATE is performed with a fully automated labeling module coupled to a germanium-68 (68Ge)/68Ga generator. Quality control of the final product evaluates radiochemical purity with instant thin-layer chromatography and solid-phase chromatography, and pH prior to patient injection. Periodic quality control is performed to determine 68Ge breakthrough, sterility, and (4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES) content. Patient preparation includes patient instructions, a protocol for 68Ga-DOTATATE during treatment with somatostatin analogs, and intravenous administration of the radiopharmaceutical. For PET/CT imaging, the acquisition and reconstruction settings are described. For each step, radiation safety will be highlighted, as well as time constrictions due to the short half-life of 68Ga.
Fully automated in-house production and quality control of 68Ga-DOTATATE leads to very high success rates (95%) and produces two to four patient dosages per batch, depending on the yield of the generator. In conclusion, 68Ga-DOTATATE PET/CT imaging is a noninvasive and fast method of providing information on the tumor burden of neuroendocrine tumors (NETs) while also assisting in diagnosis and therapy selection.

A Practical Guide for the Production and PET/CT Imaging of 68Ga-DOTATATE for Neuroendocrine Tumors in Daily Clinical Practice

Well-differentiated neuroendocrine tumors overexpress somatostatin receptors which can be utilized for diagnostic imaging with the radiolabeled somatostatin analog 68Ga-DOTATATE. This protocol details the radiolabeling of 68Ga-DOTATATE, quality control, patient preparation, and subsequent PET/CT imaging. Radiation safety and time constrictions due to the short half-life of 68Ga are taken into account.

מדריך מעשי עבור ייצור ו- PET/CT הדמיה של 68Ga-DOTATATE עבור גידולים נוירואנדוקריניים הקלינית יומי

Neuroendocrine tumors are a rare form of cancer that arise from neuroendocrine cells and can be present at almost any location throughout the body. ...

Cancer Research

Preparation and In Vitro Characterization of Dendrimer-based Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging

Paramagnetic complexes of gadolinium(III) with acyclic or macrocyclic chelates are the most commonly used contrast agents (CAs) for magnetic resonance imaging (MRI). Their purpose is to enhance the relaxation rate of water protons in tissue, thus increasing the MR image contrast and the specificity of the MRI measurements. Current clinically approved contrast agents are low molecular weight molecules that are rapidly cleared from the body. The use of dendrimers as carriers of paramagnetic chelators can play an important role in the future development of more efficient MRI contrast agents. Specifically, the increase in local concentration of the paramagnetic species results in a higher signal contrast. Furthermore, this CA provides a longer tissue retention time due to its high molecular weight and size. Here, we demonstrate a convenient procedure for the preparation of macromolecular MRI contrast agents based on poly(amidoamine) (PAMAM) dendrimers with monomacrocyclic DOTA-type chelators (DOTA &#8211; 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate). The chelating unit was appended by exploiting the reactivity of the isothiocyanate (NCS) group towards the amine surface groups of the PAMAM dendrimer to form thiourea bridges. Dendrimeric products were purified and analyzed by means of nuclear magnetic resonance spectroscopy, mass spectrometry, and elemental analysis. Finally, high resolution MR images were recorded and the signal contrasts obtained from the prepared dendrimeric and the commercially available monomeric agents were compared.

Preparation and In Vitro Characterization of Dendrimer-based Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging

This protocol describes the preparation and characterization of a dendrimeric magnetic resonance imaging (MRI) contrast agent that carries cyclen-based macrocyclic chelates coordinating paramagnetic gadolinium ions. In a series of MRI experiments in vitro, this agent produced an amplified MRI signal when compared to the commercially available monomeric analogue.

הכנה<em&gt; במבחנה</em&gt; אפיון חומרי ניגוד מבוססי dendrimer עבור דימות תהודה מגנטית

Paramagnetic complexes of gadolinium(III) with acyclic or macrocyclic chelates are the most commonly used contrast agents (CAs) for magnetic resonance ...

Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry

Pre-targeting combined with bioorthogonal chemistry is emerging as an effective way to create new radiopharmaceuticals. Of the methods available, the inverse electron demand Diels-Alder (IEDDA) cycloaddition between a radiolabeled tetrazines and trans-cyclooctene (TCO) linked to a biomolecule has proven to be a highly effective bioorthogonal approach to imaging specific biological targets. Despite the fact that technetium-99m remains the most widely used isotope in diagnostic nuclear medicine, there is a scarcity of methods for preparing 99mTc-labeled tetrazines. Herein we report the preparation of a family of tridentate-chelate-tetrazine derivatives and their Tc(I) complexes. These hitherto unknown compounds were radiolabeled with 99mTc using a microwave-assisted method in 31% to 83% radiochemical yield. The products are stable in saline and PBS and react rapidly with TCO derivatives in vitro. Their in vivo pre-targeting abilities were demonstrated using a TCO-bisphosphonate (TCO-BP) derivative that localizes to regions of active bone metabolism or injury. In murine studies, the 99mTc-tetrazines showed high activity concentrations in knees and shoulder joints, which was not observed when experiments were performed in the absence of TCO-BP. The overall uptake in non-target organs and pharmacokinetics varied greatly depending on the nature of the linker and polarity of the chelate.

Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry

Here, we describe a protocol for radiolabeling and in vivo testing of tridentate 99mTc(I) chelate-tetrazine derivatives for pre-targeting and bioorthogonal chemistry.

הכנה והערכה של<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc שכותרתו Tridentate chelates לחינוך קדם-מיקוד שימוש Bioorthogonal לכימיה

Pre-targeting combined with bioorthogonal chemistry is emerging as an effective way to create new radiopharmaceuticals. Of the methods available, the ...

Harnessing the Bioorthogonal Inverse Electron Demand Diels-Alder Cycloaddition for Pretargeted PET Imaging

Due to their exquisite affinity and specificity, antibodies have become extremely promising vectors for the delivery of radioisotopes to cancer cells for PET imaging. However, the necessity of labeling antibodies with radionuclides with long physical half-lives often results in high background radiation dose rates to non-target tissues. In order to circumvent this issue, we have employed a pretargeted PET imaging strategy based on the inverse electron demand Diels-Alder cycloaddition reaction. The methodology decouples the antibody from the radioactivity and thus exploits the positive characteristics of antibodies, while eschewing their pharmacokinetic drawbacks. The system is composed of four steps: (1) the injection of a mAb-trans-cyclooctene (TCO) conjugate; (2) a localization time period during which the antibody accumulates in the tumor and clears from the blood; (3) the injection of the radiolabeled tetrazine; and (4) the in vivo click ligation of the components followed by the clearance of excess radioligand. In the example presented in the work at hand, a 64Cu-NOTA-labeled tetrazine radioligand and a trans-cyclooctene-conjugated humanized antibody (huA33) were successfully used to delineate SW1222 colorectal cancer tumors with high tumor-to-background contrast. Further, the pretargeting methodology produces high quality images at only a fraction of the radiation dose to non-target tissue created by radioimmunoconjugates directly labeled with 64Cu or 89Zr. Ultimately, the modularity of this protocol is one of its greatest assets, as the trans-cyclooctene moiety can be appended to any non-internalizing antibody, and the tetrazine can be attached to a wide variety of radioisotopes.

The bioorthogonal inverse electron demand Diels-Alder cycloaddition has been harnessed to create an effective and modular pretargeted PET imaging strategy for cancer. In this protocol, the steps of this methodology are described in the context of a model system employing the colorectal cancer targeted antibody huA33 and a 64Cu-labeled radioligand.

רתימת ביקוש Bioorthogonal הפוך אלקטרונים דילס-Alder cycloaddition לPretargeted PET הדמיה

Due to their exquisite affinity and specificity, antibodies have become extremely promising vectors for the delivery of radioisotopes to cancer cells for ...

Bioengineering

Development of a 68Gallium-Labeled D-Peptide PET Tracer for Imaging Programmed Death-Ligand 1 Expression

The development of immune checkpoint blockade therapy based on programmed cell death-protein 1 (PD-1)/programmed death-ligand 1 (PD-L1) has revolutionized cancer therapies in recent years. However, only a fraction of patients responds to PD-1/PD-L1 inhibitors, owing to the heterogeneous expression of PD-L1 in tumor cells. This heterogeneity presents a challenge in the precise detection of tumor cells by the commonly used immunohistochemistry (IHC) approach. This situation calls for better methods to stratify patients who will benefit from immune checkpoint blockade therapy, to improve treatment efficacy. Positron emission tomography (PET) enables real-time visualization of the whole-body PD-L1 expression in a noninvasive way. Therefore, there is a need for the development of radiolabeled tracers to detect PD-L1 distribution in tumors through PET imaging.
Compared to their L-counterparts, dextrorotary (D)-peptides have properties such as proteolytic resistance and remarkably prolonged metabolic half-lives. This study designed a new method to detect PD-L1 expression based on PET imaging of 68Ga-labeled PD-L1-targeted D-peptide, a D-dodecapeptide antagonist (DPA), in tumor-bearing mice. The results showed that the [68Ga]DPA can specifically bind to PD-L1-overexpressing tumors in vivo, and showed favorable stability as well as excellent imaging ability, suggesting that [68Ga]DPA-PET is a promising approach for the assessment of PD-L1 status in tumors.

Development of a 68Gallium-Labeled D-Peptide PET Tracer for Imaging Programmed Death-Ligand 1 Expression

This study developed a noninvasive and real-time method to evaluate the distribution of programmed death-ligand 1 in the whole body, based on positron emission tomographic imaging of [68Ga] D-dodecapeptide antagonist. This technique has advantages over conventional immunohistochemistry and improves the efficiency of identifying appropriate patients who will benefit from immune checkpoint blockade therapy.

פיתוח של 68גלייום מסומן D-פפטיד PET Tracer עבור הדמיה מתוכנת מוות-ליגנד 1 ביטוי

The development of immune checkpoint blockade therapy based on programmed cell death-protein 1 (PD-1)/programmed death-ligand 1 (PD-L1) has revolutionized ...

<meta charset="utf8"></head><body>רדיוסינתזה והדמיית PET/CT של 68ננו עם תווית Ga במודלים של Xenograft

Radiosynthesis, Quality Control, and Small Animal Positron Emission Tomography Imaging of 68Ga-Labelled Nano Molecules

Small animal Positron Emission Tomography (PET) and Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) imaging techniques are crucial in preclinical cancer research, necessitating meticulous attention to radiotracer synthesis, quality assurance, and in vivo injection protocols. This study presents a comprehensive workflow tailored to enhance the robustness and reproducibility of small animal PET experiments. The synthesis process in the radiochemistry laboratory using 68Ga is detailed, highlighting stringent quality control and assurance protocols for each radiotracer production. Parameters such as concentration, molar activity, pH, and purity are rigorously monitored, aligning with standards applicable to human studies. This methodology introduces streamlined syringe preparation and a custom-designed 30G cannula for precise intravenous injections into mice. Monitoring of animal health during scanning, including temperature and heart rate, ensures their well-being throughout the procedure. Dosages for PET and SPECT scans are predetermined to balance data acquisition with minimizing radiation exposure to animals and researchers. Similarly, CT scans employ pre-programmed settings to limit radiation exposure, especially pertinent in long-term studies assessing treatment effects. By optimizing these steps, the workflow aims to standardize procedures, reduce variability, and enhance the quality of small animal PET/SPECT/CT imaging. This resource provides valuable insights for researchers seeking to improve the accuracy and reliability of preclinical investigations in molecular imaging, ultimately advancing the field.

<meta charset="utf8"></head><body>רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של 68מולקולות ננו עם תווית Ga

This paper describes the radiosynthesis, formulation, quality control of a new radiolabeled probe (i.e., 68Ga-labeled nanobody NM-02), and its use for small animal PET/CT imaging in a xenograft model.

רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של 68מולקולות ננו עם תווית Ga

Small animal Positron Emission Tomography (PET) and Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) imaging techniques are crucial in preclinical ...

Automated Production of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn Synthesizer

An Automated Radiosynthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP inhibitors (FAPIs) have demonstrated uptake in various types of cancers, including breast, lung, prostate, pancreatic and colorectal cancer. FAPI-PET also possesses a practical advantage over FDG-PET as fasting and resting are not required. [68Ga]Ga-FAPI-46 exhibits enhanced pharmacokinetic properties, improved tumor retention, and higher contrast images than the earlier presented [68Ga]Ga-FAPI-02 and [68Ga]Ga-FAPI-04. Although a manual synthesis protocol for [68Ga]Ga-FAPI-46 was initially described, in recent years, automated methods using different commercial synthesizers have been reported.
In this work, we describe the development of the automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 using the iPHASE MultiSyn synthesizer for clinical applications. Initially, optimization of the reaction time and comparison of the performance of four different solid phase extraction (SPE) cartridges for final product purification were investigated. Then, the development and validation of the production of 0.6-1.7 GBq of [68Ga]Ga-FAPI-46 were conducted using these optimized parameters. The product was synthesized in 89.8 &#177; 4.8% decay corrected yield (n = 6) over 25 min. The final product met all recommended quality control specifications and was stable up to 3 h post synthesis.

This work describes the automated production of up to 1.7 GBq of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn synthesizer for PET imaging of fibroblast activation protein.

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP ...

Automated Preparation of [68Ga]Ga-3BP-3940 on a Synthesis Module for PET Imaging of the Tumor Microenvironment

A fast, efficient method has been developed on the GAIA synthesis module for automated gallium-68 radiolabeling of 3BP-3940, a molecular imaging probe targeting the fibroblast activation protein for positron emission tomography imaging of the tumor microenvironment. The reaction conditions involved acetate buffer (final concentration: 0.1 M), methionine as an anti-radiolysis agent (final concentration: 5.4 mg/mL), and 30 &#181;g of 3BP-3940, with heating for 8 min at 98 &#176;C. A final purification step on a C18 cartridge was necessary to obtain a radiolabeled product of high purity. In contrast, the generator-produced 68Ga was used directly without a concentration step on a cation exchange cartridge. The production of three validation batches confirmed the method&#39;s reliability, allowing the synthesis of [68Ga]Ga-3BP-3940 in 22.3 &#177; 0.6 min with high radiochemical purity (RCP), as determined by both radio-HPLC (99.1% &#177; 0.1%) and radio-TLC (99.2% &#177; 0.1%). The average radiochemical yield, based on RCP values measured by radio-HPLC, was 74.4% &#177; 3.3%. The stability of the radiolabeled product was demonstrated for up to 4 h after preparation. This protocol provides a reliable, rapid, and efficient methodology for the preparation of [68Ga]Ga-3BP-3940, which can easily be transposed to a clinical setting.

This research describes the automated process for [68Ga]Ga-3BP-3940 production with the GAIA V2 synthesizer, for PET imaging of fibroblast activation protein. The results of quality control tests performed on three test batches are also presented.

הכנה אוטומטית של [68Ga]Ga-3BP-3940 במודול סינתזה להדמיית PET של מיקרו-סביבת הגידול

A fast, efficient method has been developed on the GAIA synthesis module for automated gallium-68 radiolabeling of 3BP-3940, a molecular imaging probe ...

חקירות על קומפלקס Ga (III) של EOB-DTPA ו שלה

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

מדריך מעשי עבור ייצור ו- PET/CT הדמיה של ⁶⁸Ga-DOTATATE עבור גידולים נוירואנדוקריניים הקלינית יומי

הכנה

הכנה והערכה של

רתימת ביקוש Bioorthogonal הפוך אלקטרונים דילס-Alder cycloaddition לPretargeted PET הדמיה

פיתוח של ⁶⁸גלייום מסומן D-פפטיד PET Tracer עבור הדמיה מתוכנת מוות-ליגנד 1 ביטוי

רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של ⁶⁸מולקולות ננו עם תווית Ga

רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של ⁶⁸מולקולות ננו עם תווית Ga

רדיוסינתזה, בקרת איכות והדמיית טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים של בעלי חיים קטנים של ⁶⁸מולקולות ננו עם תווית Ga

An Automated Radiosynthesis of [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

הכנה אוטומטית של [⁶⁸Ga]Ga-3BP-3940 במודול סינתזה להדמיית PET של מיקרו-סביבת הגידול