עבודה זו נתמכה על ידי משרד המדע, הטכנולוגיה הלוהט על ידי מענק של המדען הראשי של משרד החקלאות (#16-16-0003).

1. לשתול חומר, תנאי הגידול
<ol><li>זרע זרע אחד טבק (לדבורי לסאמסון) לכל 5 ס"מ x 5 ס"מ סיר מלא בינונית בסיר רגיל. מניחים את הסירים על המגשים. לגדל את הצמחים בחדר גדילה בתנאים יום ארוך (16/8 h/כהה) בטמפרטורה קבועה של 23 מעלות צלזיוס. להשקיית עם מי ברז עד ניקוז המים מהסיר.</li>
	<li>לאחר ימים 50±5, להתחיל טיפולים Fe ההשקייה, לפי ריכוז המתאימים לניסוי. לדוגמה, השתמשנו מגוון של ריכוזי ברזל מ- 0 עד 6 מ מ, שיושלם על-ידי chelator מסיסים Fe (Fe EDDHA). להשקיית הצמחים עם הפתרון המתאים בכל יומיים (כדי למנוע התייבשות) 6-8 ימים.</li>
</ol>2. הכנת את העלים למדידה ברזל
הערות: כל החומרים כדי לשמש חייבים להיות נטולי ברזל כדי להפחית את הסיכון של זיהום ברזל. מכתש ועלי פעמיים עם 4% HCl פתרון יבש ונקי עם נייר סינון בכל פעם לפני השימוש. אם היא להשתמש בכל חומר, זה פעמיים עם 4% HCl פתרון יבש ונקי עם נייר סינון.
<ol><li>לנתק את העלים מן הגבעול בכתב יד, באמצעות כפפות (אל תשתמש כל ציוד מתכת). השתמש בערך 10 גרם של עלים (משקל טריים) עבור כל דגימה. נקה כל עלה עם כפול מים מזוקקים (DDW) באמצעות בקבוק ספריי. השלב זה חשוב למנוע זיהום Fe.</li>
	<li>לייבש את העלים על מגבת נייר, לשים אותם בשקית נייר. להעביר את שקיות נייר תנור בטמפרטורה קבועה של 80 מעלות צלזיוס במשך 2-3 ימים.</li>
	<li>כאשר יבש, למחוץ את העלים כדי אבקת באמצעות פצצות מרגמה, איחדו העברת צינורות פלסטיק סטרילית 15 מ"ל.</li>
</ol>3. שריפת העלים לאפר
הערות: השימוש של פתרון pH נמוך (קרוב ל 0) של HCl נועד להגביר את מסיסות ברזל. צמר סלעים משמש כדי למנוע בריחה את המבחנה במהלך שריפת הגזים.
<ol><li>שוקלים בקבוקון נצנוץ חדש, אטום בפטרת ללא המכסה. שים לב לערך או להגדיר את הערך אפס באמצעות לחצן טרה. להוסיף עלים יבשים כתוש (דוגמה) למבחנה.</li>
	<li>שוקל את הדגימה ואת מיכל ורשום את הערך. סגור את המבחנה עם צמר סלעים.</li>
	<li>שוקל 3 מבחנות נוספות מבלי להוסיף דוגמאות ורשום את הערכים שלהם. את שתי המבחנות ישמש כפקדי כדי להעריך את כמות צמר סלעים יכול שהובילו לכך כל עלייה קטנה במשקל לדוגמה.</li>
	<li>למקם את הבקבוקונים מדגם ושליטה תנור, להתחיל לצרוב באמצעות השלבים הבאים טמפרטורה: בטמפרטורת החדר, עלייה מהירה 425 ° C, ו, לבסוף, 425 מעלות צלזיוס למשך 4 שעות. בזמן הזה, שהעלים היבשים הפכו לאפר.</li>
	<li>ומצננים את דגימות עד כ 100 ° C. אבל לא מתחת לטמפרטורה זו על שני השלבים הבאים למנוע לחות, אשר יכול להשפיע על המשקל הסופי של המדגם. באמצעות כפפות כבדות, הסר את הדגימות בכבשן עם פינצטה, מחזיק את הצנצנת מבחינה חיצונית וגם מבחינה.</li>
	<li>מניחים את הבקבוקונים על משטח שטוח, להסיר את צמר סלעים ולסגור את הבקבוקונים בשלמותם המקורי שלהם.</li>
	<li>שוקל את הבקבוקונים שליטה 3 (ראה 3.3) ולחשב שלהם במשקל ממוצע. אם במשקל שווה או מעל 1% ממשקל האפר (ראה שלב 4.2), השתמש בערך זה כהערכה לשגיאת המדידה.</li>
</ol>4. מכינים את האפר למדידה ברזל
הערות: ריכוז הברזל הסופי במדגם הראשונית מחושבת המשקל של האפר מחולק נפח נוסף של HCl.
<ol><li>להכין פתרון HCl 1 מ' (4% HCl) על-ידי הוספת מ"ל של פתרון מניות של HCl 37% 87.5 מ ל DDW (בבקבוקון פלסטיק או זכוכית).</li>
	<li>שוקל צינור פלסטיק 15 מ"ל, שים לב לערך או להגדיר את הערך אפס באמצעות לחצן טרה. להעביר את האפר הצינור, שוקל, שים לב לערך. זהו המשקל אפר.</li>
	<li>הוסף 5 מ של 1 M HCl האפר. לסנן את האפר דרך מסנן מיקרומטר 22 ולהוסיף אוטם 5 נוספים של 1 M HCl דרך המסנן אותו.</li>
	<li>עוצמת הקול הסופי צריך להיות 10 מ"ל. שימו לב כי חלק מהפתרון יאבדו במסנן. הערה: הדגימות. אתה מוכן למדידה Fe FAAS או באמצעות פעולת השירות כחול פרוסי.</li>
	<li>הופכים את עקומת כיול עם ריכוז Fe נמדד לפי מסות אטומי ולפי השיטה כחול פרוסי (ראה איור 4) עבור כל מיני צמחים. לאחר מכן, ניתן למדוד ריכוז Fe בשיטה כחול פרוסי לבד.</li>
</ol>5. מדידת ריכוז Fe מאת FAAS
<ol><li>הסר 4 מ"ל כל מדגם למדידה מאת FAAS.</li>
	<li>לחלק את התוצאות שהתקבלו המדידה FAAS לפי המשקל של האפר. לחלק את הערך שהתקבל ב- 0.01 (כי האפר היו solubilized ב- 10 מ ל). הערך המתקבל הוא ריכוז הברזל לכל גרם אפר (ppm).</li>
</ol>6. הכנת את כחול פרוסי מכתים פתרון
<ol><li>להכין a 4% כחול פרוסי פתרון על-ידי הוספת 4 g K4Fe(CN)6 עד 100 מ"ל DDW ו מערבולת (אמצעי אחסון אחרים ו/או ריכוז יכול לשמש עבור דרישות שונות). יצוין, כי במחקר זה, פחות מרוכזים פתרון כחול פרוסי (20%) שדווחה בעבר14 היה בשימוש.</li>
	<li>לשמור את הפתרון בחושך ב 4 ° C עד השימוש. הפתרון הוא יציב במשך 6 חודשים כאשר הוא מאוחסן בתנאים.</li>
</ol>7. הפקת את עקומת כיול עבור השיטה כחול פרוסי באמצעות FAAS תוצאות
הערה: לחשב את ריכוז הברזל באפר באמצעות הנוסחה הבאה <img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/57408/57408eq1.jpg">משוואה 1 C: ריכוז, v: לדגום נפח, w: אפר משקל (g).
<ol><li>מערבבים 0.50 מ של פתרון כחול פרוסי, מ 0.50 ל 1 M HCl. זה ישמש הפתרון ריק.</li>
	<li>לערבב 0.5 מ של דגימה (האפר 4% HCl, כמתואר בסעיף 3) ו- 0.5 מ של פתרון כחול פרוסי (שלב 6.1) על ידי pipetting. המתן לפחות 1 דקה אך לא יותר מחמש דקות. לאחר 5 דקות, שקיעת הדגימות תתרחש.</li>
	<li>להעביר את התערובת cuvette ולמדוד OD-715 nm באמצעות ספקטרופוטומטרים. שים לב לערך.</li>
	<li>לחלק את הערך OD (שלב 7.3) לפי המשקל אפר (שלב 3.2) של המדגם. התוצאה מייצג OD לכל גרם אפר.</li>
	<li>להתוות את הרגרסיה הליניארית בין ריכוז הברזל המתקבל המדידות FAAS (ציר Y) ואת הערכים OD (ציר X). השתמש התוצאות המתקבלות שלבים 5.2 ו- 7.4. לחשב את נוסחת הרגרסיה, Y = + bX, כאשר Y מייצג ריכוז הברזל, מייצג ספיגת מצטלבים, b מייצג השיפוע ספיגת ו X מייצג OD.</li>
</ol>8. בשיטת כחול פרוסי לקביעת רמות הברזל בדגימות אחרים מאותו סוג הצמח?
הערות: מאז עקומת כיול כבר הוקמה עבור סוג זה של הצמח, ריכוז הברזל בדוגמיות חדש מאותו סוג הצמח ניתן ישירות לחשב באמצעות הנוסחה רגרסיה ליניארית.
<ol><li>בצע את השלבים בסעיפים 3 ו- 4, ואחריו צעדים 7.1 ל 7.4.</li>
	<li>חשב את ריכוז ברזל בתמיסה תוך שימוש בנוסחה המתקבל של רגרסיה ליניארית (שלב 7.5).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Kobayashi, T., Nishizawa, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+uptake,+translocation,+and+regulation+in+higher+plants.">Iron uptake, translocation, and regulation in higher plants.</a> Annual Review of Plant Biology. 63 (1), 131-152 (2012).</li><li>Bradley, J. M., Le Brun, N. E., Moore, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferritins:+Furnishing+proteins+with+iron.">Ferritins: Furnishing proteins with iron.</a> Journal of Biological Inorganic Chemistry. 21 (1), 13-28 (2012).</li><li>Zieli&#324;ska-Dawidziak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+ferritin+-+a+source+of+iron+to+prevent+its+deficiency.">Plant ferritin - a source of iron to prevent its deficiency.</a> Nutrients. 7 (2), 1184-1201 (2015).</li><li>Johnson, D. C., Dean, D. R., Smith, A. D., Johnson, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure,+function,+and+formation+of+biological+iron-sulfur+clusters.">Structure, function, and formation of biological iron-sulfur clusters.</a> Annual Review of Biochemistry. 74 (1), 247-281 (2015).</li><li>Guo, H., Barnard, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naturally+occurring+iron+oxide+nanoparticles:+morphology,+surface+chemistry+and+environmental+stability.">Naturally occurring iron oxide nanoparticles: morphology, surface chemistry and environmental stability.</a> Journal of Materials Chemistry A. 1 (1), 27-42 (2013).</li><li>Hem, J. D., Cropper, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemistry+of+iron+in+natural+water.">Chemistry of iron in natural water.</a> Report US Geological Survey. , 1-31 (1962).</li><li>Rout, G. R., Sahoo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+iron+in+plant+growth+and+metabolism.">Role of iron in plant growth and metabolism.</a> Reviews in Agricultural Science. 3, 1-24 (2015).</li><li>Speretto, R. A., Ricachenevsky, F. K., Stein, R. J., de Abreu Waldow, V., Fett, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+stress+in+plants+Dealing+with+deprivation+and+overload.">Iron stress in plants Dealing with deprivation and overload.</a> Plant Stress. 4, 57-69 (2010).</li><li>Tautkus, S., Steponeniene, L., Kazlauskas, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+iron+in+natural+and+mineral+waters+by+flame+atomic+absorption+spectrometry.">Determination of iron in natural and mineral waters by flame atomic absorption spectrometry.</a> Journal of the Serbian Chemical Society. 69 (5), 393-402 (2006).</li><li>Braunschweig, J., Bosch, J., Heister, K., Kuebeck, C., Meckenstock, R. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reevaluation+of+colorimetric+iron+determination+methods+commonly+used+in+geomicrobiology.">Reevaluation of colorimetric iron determination methods commonly used in geomicrobiology.</a> Journal of Microbiological Methods. 89 (1), 41-48 (2012).</li><li>PerkinElmer. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Atomic Spectroscopy - Guide to Selecting the Appropriate Technique and System. 16, (2011).</li><li>Wachasunder, S. D., Nafade, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision+and+accuracy+control+in+the+determination+of+heavy+metals+by+atomic+absorption+spectrometry.">Precision and accuracy control in the determination of heavy metals by atomic absorption spectrometry.</a> Science. 58, 517-528 (2001).</li><li>Woods, J. T., Mellon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thiocyanate+method+for+iron.+A+spectrophotometric+study.">Thiocyanate method for iron. A spectrophotometric study.</a> Industrial &amp; Engineering Chemistry Analytical Edition. 13 (8), 551-554 (1941).</li><li>Perls, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nachweis+von+Eisenoxyd+in+gewissen+Pigmenten.">Nachweis von Eisenoxyd in gewissen Pigmenten.</a> Virchows Archiv Fur Pathologische Anatomie Und Physiologie Und Fur Klinische Medizin. 39 (1), 42-48 (1867).</li><li>Connorton, J. M., Jones, E. R., Rodriguez-Ramiro, I., Fairweather-Tait, S., Uauy, C., Balk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altering+expression+of+a+vacuolar+iron+transporter+doubles+iron+content+in+white+wheat+flour.">Altering expression of a vacuolar iron transporter doubles iron content in white wheat flour.</a> bioRxiv. , 1-25 (2017).</li><li>de la Fuente, V., Rufo, L., Rodr&#237;guez, N., Franco, A., Amils, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+iron+localization+in+wild+plants+and+hydroponic+cultures+of+Imperata+cylindrica+(L.)+P.+Beauv.">Comparison of iron localization in wild plants and hydroponic cultures of Imperata cylindrica (L.) P. Beauv.</a> Plant Soil. 418 (1-2), 25-35 (2017).</li><li>Hsiao, P. Y., Cheng, C. P., Koh, K. W., Chan, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Arabidopsis+defensin+gene,+AtPDF1.1,+mediates+defence+against+Pectobacterium+carotovorum+subsp.+carotovorum+via+an+iron-withholding+defence+system.">The Arabidopsis defensin gene, AtPDF1.1, mediates defence against Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum via an iron-withholding defence system.</a> Science Reports. 7 (1), 1-14 (2017).</li><li>Johnson, D. B., Kanao, T., Hedrich, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redox+transformations+of+iron+at+extremely+low+pH:+Fundamental+and+applied+aspects.">Redox transformations of iron at extremely low pH: Fundamental and applied aspects.</a> Frontiers in Microbiology. 3, 1-13 (2012).</li><li>Stumm, W., Lee, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygenation+of+ferrous+iron.">Oxygenation of ferrous iron.</a> Industrial &amp; Engineering Chemistry. 53 (2), 143-146 (1961).</li><li>Jones, A. M., Griffin, P. J., Collins, R. N., Waite, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferrous+iron+oxidation+under+acidic+conditions+-+The+effect+of+ferric+oxide+surfaces.">Ferrous iron oxidation under acidic conditions - The effect of ferric oxide surfaces.</a> Geochimica et Cosmochimica Acta. 145, 1-12 (2014).</li><li>Hawkesworth, C. J., Kemp, A. I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+the+continental+crust.">Evolution of the continental crust.</a> Nature. 443 (7113), (2006).</li><li>Thompson, L. M., Louis, M., Troeh, F. R., Thompson, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Soils and soil fertility. , (1973).</li><li>Krueger, B. J., Grassian, V. H., Cowin, J. P., Laskin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneous+chemistry+of+individual+mineral+dust+particles+from+different+dust+source+regions:+The+importance+of+particle+mineralogy.">Heterogeneous chemistry of individual mineral dust particles from different dust source regions: The importance of particle mineralogy.</a> Atmospheric Environment. 38 (36), 6253-6261 (2004).</li><li>Bewick, V., Cheek, L., Ball, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistics+review+7:+Correlation+and+regression.">Statistics review 7: Correlation and regression.</a> Journal of Critical Care. 7 (6), 451-459 (2003).</li><li>Asuero, A. G., Sayago, A., Gonz&#225;lez, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+correlation+coefficient:+An+overview.">The correlation coefficient: An overview.</a> Critical Reviews in Analytical Chemistry. 36 (1), 41-59 (2006).</li><li>. Analytical Chemistry. Calibration Curves Available from: <a target="_blank" href="https://www.jove.com/science-education/10188/calibration-curves">https://www.jove.com/science-education/10188/calibration-curves</a> (2018)</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

מדידה ברזל ברקמות הצמח חשוב מאוד להעריך את ההשפעות של השקיה או תנאים סביבתיים אחרים. כאן, אנחנו תיאר שיטה קלה ומדויקת ערכי צבע מוחלטים למדידה תוכן Fe טבק העלים, אשר ניתן להתאים בקלות מיני צמחים ורקמות אחרות.
תוך אופטימיזציה של תנאי עבור פעולת ערכי צבע מוחלטים, השתמשנו pH נמוך ב...

הברזל (Fe) הוא micronutrient חשוב בכל היצורים החיים. בצמחים, זה micronutrient חיוני1 בגלל מעורבותה תהליכים בסיסיים, כגון נשימה, פוטוסינתזה, כלורופיל ביוסינטזה. הצטברות גבוהה של ברזל חינם יונים מזיק לשתול תאים עקב תגובות מוביל שחרור של רדיקלים חופשיים גורם סטרס חמצוני. כדי לשמור על הומאוסטזיס ברזל בתוך התא צמח, יונים המאוחסן וקואלות, מבודדות בתוך ferritins, חלבון הכלובים מעורבים ישירות הומאוסטזיס ברזל2 ומבנה האחסון העיקרי של ברזל בכל היצורים החיים. במקביל, אנמיה מחוסר ברזל משפיע על חלק ניכר של האוכלוסייה האנושית, וכתוצאה מכך הצורך הגובר צמח Fe biofortification. בשל תכונותיו הייחודיות של הצמח קשירת ברזל, העשרת מזון עם קשירת ברזל-ברזל מציע אסטרטגיה מבטיח להילחם בבעיה הזאת של תת-תזונה3.
יונים של ברזל הם בעיקר שנמצאו שתי חמצון מדינות, כלומר ברזלי (כלט Fe2 + או ברזל (II)), ferric (כ Fe3 + או ברזל (III)) טפסים. כמה צורות אחרות של ברזל, כגון ברזל אשכולות4, ניתן למצוא גם בתאים. Fe מאוחסן בתור תחמוצת ברזל בתוך התא, באופן טבעי צורות hematites (Fe2O3), ferryhidrites ((Fe3 +)2O3•0.5 H2O) תחת תנאים פיזיולוגיים5. והידרוקסידים שהוקמה ב תגובות אלו, במיוחד את הטופס ferric, יש מסיסות נמוכה מאוד. ברזל השמירה מושפע וכתוצאה מכך רמת ה-pH של התמיסה, במידה רבה במצב מוצק מעל pH 56.
בהתחשב המסיסות המסכן תגובתיות גבוהה של Fe, את ההעברה בין הצמח רקמות ואיברים חייב להיות מקושר עם מולקולות chelating מתאימים. יתר על כן, המדינות חמצון-חיזור בין צורות ומתכות ferric1 חייבים להיות מבוקרים. בתוך עלים, כ- 80% של הברזל הוא נמצא תאים פוטוסינתטיים, עקב שלה תפקידים חיוניים במערכת התחבורה אלקטרון, ביוסינטזה של cytochromes, כלורופיל, מולקולות אחרות heme, ואת היווצרות Fe-S אשכולות7. במקרה של ברזל עודף בתוך התא, העודף הוא translocated לתוך חלולית שבו המתכת מאוחסן בקשירת ברזל מולקולות8.
ניתן למדוד ברזל ברקמות הצמח על ידי מספר שיטות, כולל להבה בליעה אטומית ספקטרוסקופיה9 (FAAS) או מבחני ערכי צבע מוחלטים10, לשעבר להיות הרבה יותר מדויק מאשר לאחרון. FAAS היא טכניקה מאוד מדויקת המאפשר לנו לקבוע הרכב היסודות של מדגם על בסיס הפליטה האלקטרומגנטית של הרכיבים הבודדים. FAAS ממיר יונים מתכתיים למדינות אטומי מאת להבה-חימום של המדגם, המוביל עירור יון פליטה של גל מסוים יון נתון יחזור למצבו הקרקע. פליטת היונים שונה המופרדים באמצעות monochromator, זוהה על ידי חיישן הקליטה11. FAAS מגישה לכן ישירות לכמת ריכוזי ברזל. טכניקות אחרות המדגימה ברזל ברקמות ביולוגיות זמינים, אולם. מצמידים inductively פלזמה המוני ספקטרוסקופיה (ICP-MS)12 היא טכניקה מאוד מדוייק למדידת ברזל ויסודות קורט אחרים אבל העדר ציוד, גם FAAS וגם ICP-MS, היא בעיה נפוצה. מצד שני, ברזל המדידה על-ידי thiocyanate colorimetry13 חסר דיוק, לא יצליח לזהות וריאציות קטנות בין דגימות. כחול פרוסי מכתים14,15,16,17 היא שיטה עקיפה בהתבסס על התגובה של אשלגן ferric ferrocyanide (K4Fe(CN)6) עם קטיונים Fe, ייצור צבע כחול חזק, והוא משמש לזיהוי ברזל איכותי בסעיפים היסטולוגית של רקמות הגוף.
ברזל מתכתי (אפס-עמודים ולנטיין) הוא נדיר ליתוספירה. הצורה השלטת יוניים שאינם ומורכבת של ברזל בסביבת מוכתב בעיקר על ידי כמות החמצן בסביבה, עם ברזל ברזלי להיות יחסית שופע יותר בסביבות אנאוקסיים וברזל ferric predominating באתרים אירובי. זה באחרון גם הוא דומיננטי בסביבות מאוד חומצי, למרות הסוכנים סיבתי של ברזל ברזלי חמצון לעיתים קרובות נבדלים סביבה חומצית אנאוקסיים18. מתי ברזל solubilized ב 4% HCl (pH 0) בסביבה אירובית, החלק העיקרי של הברזל מדולל קיים כפי ferric הטופס (Fe3 +)19,20.
התגובות בין יונים Fe ו- K4Fe(CN)6 הן כדלקמן:
Fe3 +: FeCl3 + K-4-Fe(CN)-6 = KFe(III)Fe(II)(CN)6¯ + 3KCl
Fe2 +: 4 FeCl2 + 2 K-4-Fe(CN)-6 = Fe4(Fe(CN)6)2 + 8 אשלגן כלורי
במחקר הנוכחי, ביקשנו אם צביעת כחול פרוסי יכול להיות שימושי עבור מדידת רמות ברזל בתמיסה.
בתחילה, נוכל לאמת את המתאם בין ריכוז Fe בתמיסה המימית מכתים כחול פרוסי. ריכוז Fe (כפי FeCl2, FeCl3 או תערובת של 1:1 של השני) בתחום פתרונות מימית נמדדה על ידי ספקטרוסקופיה אטומית והן על ידי ספיגת (OD) לאחר תוספת של כחול פרוסי. איור 1 מציג את עקומות רגרסיה ליניארית למדידות מתקבל על ידי כל שיטה. הגענו למסקנה כי השיטה כחול פרוסי יכול לשמש עבור ניתוח כמותי של ברזל ריכוז בתמיסה.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57408/57408fig1.jpg"> איור 1: regressions ליניארי בין ריכוז Fe נמדדת FAAS ואת ספיגת האור (OD, 715 ננומטר) מתקבל על ידי שיטת כחול פרוסי. ריבועים כחול וקו מייצג הפתרון2 + Fe, ריבועים אדומים וקו הפתרון3 + Fe מייצגים את ריבועים שחורים וקו מייצג תערובת 1:1 בין Fe2 + ו Fe3 +. Regressions הבאים התקבלו: [Fe2 +] = 3 + 123 x OD, r = 0.996, R2 = 0.989; [Fe3 +] = 1 + 292 x OD, r = 0.999, R2 = 0.997; ו [Fe2 + 3 +] = 11 + 146 x OD, r = 0.983, R2 = 0.956. התורם2 + Fe FeCl2 , היה התורם Fe3 + FeCl3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57408/57408fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
להתאים את שיטת כחול פרוסי ערכי צבע מוחלטים לניתוח כמותי ברזל של רקמות הצמח, התוכן ברזל של האפר עלה טבק נמדדה על ידי להבה ספקטרום בליעה אטומית מכתים כחול פרוסי. היה מתאם טוב בין התוצאות של ידי שתי שיטות.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Potassium Hexacyanoferrate(II)</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>14459-95-1</td>
			<td>Reagent for the Pussian Blue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex Syringe Filter Unit, Vial Vent 0.22 &#956;m</td>
			<td>Millec</td>
			<td>SLGP033RS</td>
			<td>Filter used to filter the ashes + 4% HCl Solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scintillation Vials</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>03-337-4</td>
			<td>Used to keep the dry powdered plant material during the burning procedure.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Syringe 10 ml</td>
			<td>Medi-Plus</td>
			<td>1931</td>
			<td>Syringe used during the filtration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>231-595-7</td>
			<td>Used in the 4% HCl solution to dilute the ashes and clean the materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tobacco, Nicotiana tabacum cv. Samsun NN</td>
			<td>Obtained from Prof. Simon Barak and routinely used in the Zaccai Lab</td>
			<td>Barak S, Nejidat A, Heimer Y, Volokita M. Transcriptional and posttranscriptional regulation of the glycolate oxidase gene in tobacco seedlings. Plant Molecular Biology. 2001 Mar 1;45(4):399-407.</td>
			<td>Tobacco cultivar used in this protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Wool (Rock Wool)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>659997-17-3</td>
			<td>Used in the procedure of burning samples in the furnace.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a colorimetric method for measuring iron content in plants

ברזל, אחד של יסודות קורט החשוב ביותר אורגניזמים חיים, מעורב תהליכים בסיסיים, כגון נשימה, פוטוסינתזה. תוכן ברזל הוא נמוכות למדי בכל היצורים, בהיקף של צמחים כ- 0.009 אחוז משקל יבש. עד כה, באחת השיטות המדויקות ביותר למדידת ריכוז ברזל ברקמות הצמח הוא הלהבה ספקטרום בליעה אטומית. עם זאת, גישה זו הוא יקרה ועתירת ואינה דורשת ציוד ספציפי לא נפוץ למצוא צמח מעבדות. לכן, דרושה שיטה פשוטה אך מדויקת יכול לשמש באופן שגרתי. השיטה כחול פרוסי ערכי צבע מוחלטים משמש באופן קבוע ברזל איכותי מכתים בסעיפים היסטולוגית מהחי והצומח. במחקר זה, שינינו את כחול פרוסי שיטת מדידות כמותיים של ברזל טבק עלים. נוכל לאמת את הדיוק של שיטה זו באמצעות ספקטרוסקופיה אטומית והן כחול פרוסי מכתים כדי למדוד את התוכן ברזל הדגימות באותו ומצא רגרסיה ליניארית (R2 = 0.988) בין שני ההליכים. אנו מסיקים כי השיטה כחול פרוסי למדידה כמותית ברזל ברקמות הצמח הוא מדויק, פשוטה וזולה. עם זאת, הרגרסיה הליניארית המובאת כאן לא ייתכן המתאים עבור מינים אחרים של הצמח, בשל פוטנציאל אינטראקציות בין המדגם הכימית. הקמתה של עיקול רגרסיה ובכך צורך עבור מינים שונים.

כאשר פרוטוקול זה מתבצעת כהלכה, יכול לעשות קורלציה מצוינת בין התוצאות המתקבלות על-ידי השיטות ספקטרוסקופיה כחול פרוסי, אטומי. לכן, השיטה כחול פרוסי בקלות ניתן להשיג של מדידה מדויקת של ריכוז הברזל דגימות צמח, כפי שמשתקף בניסוי הבא.
צמחי הטבק ...

Watch this Scientific Journal Video about A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants at JoVE.com

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

שיטה ערכי צבע מוחלטים למדידת תכולת ברזל צמחים

אנו מציגים פרוטוקול פשוטה ואמינה למדידת תוכן ברזל ברקמות הצמח באמצעות השיטה כחול פרוסי ערכי צבע מוחלטים.

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

a-colorimetric-method-for-measuring-iron-content-in-plants

Research

JoVE Journal

Biochemistry

21.9K Views.  Ben-Gurion University of the Negev. אנו מציגים פרוטוקול פשוטה ואמינה למדידת תוכן ברזל ברקמות הצמח באמצעות השיטה כחול פרוסי ערכי צבע מוחלטים.

Video: A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

A Method for Measuring RNA N6-methyladenosine Modifications in Cells and Tissues

N6-Methyladenosine (m6A) modifications of RNA are diverse and ubiquitous amongst eukaryotes. They occur in mRNA, rRNA, tRNA, and microRNA. Recent studies have revealed that these reversible RNA modifications affect RNA splicing, translation, degradation, and localization. Multiple physiological processes, like circadian rhythms, stem cell pluripotency, fibrosis, triglyceride metabolism, and obesity are also controlled by m6A modifications. Immunoprecipitation/sequencing, mass spectrometry, and modified northern blotting are some of the methods commonly employed to measure m6A modifications. Herein, we present a northeastern blotting technique for measuring m6A modifications. The current protocol provides good size separation of RNA, better accommodation and standardization for various experimental designs, and clear delineation of m6A modifications in various sources of RNA. While m6A modifications are known to have a crucial impact on human physiology relating to circadian rhythms and obesity, their roles in other (patho)physiological states are unclear. Therefore, investigations on m6A modifications have immense possibility to provide key insights into molecular physiology.

A Method for Measuring RNA N6-methyladenosine Modifications in Cells and Tissues

A modified northern blotting method for measuring N6-methyladenosine (m6A) modifications in RNA is described. The current method can detect modifications in diverse RNAs and controls under various experimental designs.

שיטה למדידת RNA<em&gt; N</em<sup&gt; 6</sup&gt; שינויי -methyladenosine ב תאים ורקמות

N6-Methyladenosine (m6A) modifications of RNA are diverse and ubiquitous amongst eukaryotes. They occur in mRNA, rRNA, tRNA, and microRNA. Recent studies ...

A Method for Measuring Metabolism in Sorted Subpopulations of Complex Cell Communities Using Stable Isotope Tracing

Mammalian cell types exhibit specialized metabolism, and there is ample evidence that various co-existing cell types engage in metabolic cooperation. Moreover, even cultures of a single cell type may contain cells in distinct metabolic states, such as resting or cycling cells. Methods for measuring metabolic activities of such subpopulations are valuable tools for understanding cellular metabolism. Complex cell populations are most commonly separated using a cell sorter, and subpopulations isolated by this method can be analyzed by metabolomics methods. However, a problem with this approach is that the cell sorting procedure subjects cells to stresses that may distort their metabolism.
To overcome these issues, we reasoned that the mass isotopomer distributions (MIDs) of metabolites from cells cultured with stable isotope-labeled nutrients are likely to be more stable than absolute metabolite concentrations, because MIDs are formed over longer time scales and should be less affected by short-term exposure to cell sorting conditions. Here, we describe a method based on this principle, combining cell sorting with liquid chromatography-high resolution mass spectrometry (LC-HRMS). The procedure involves analyzing three types of samples: (1) metabolite extracts obtained directly from the complex population; (2) extracts of "mock sorted" cells passed through the cell sorter instrument without gating any specific population; and (3) extracts of the actual sorted populations. The mock sorted cells are compared against direct extraction to verify that MIDs are indeed not altered by the cell sorting procedure itself, prior to analyzing the actual sorted populations. We show example results from HeLa cells sorted according to cell cycle phase, revealing changes in nucleotide metabolism.

This article describes a method for studying cellular metabolism in complex communities of multiple cell types, using a combination of stable isotope tracing, cell sorting to isolate specific cell types, and mass spectrometry.

שיטה למדידת מטבוליזם ב ממוינות תת-אוכלוסיות של קהילות Cell מורכבות באמצעות איתור איזוטופ יציב

Mammalian cell types exhibit specialized metabolism, and there is ample evidence that various co-existing cell types engage in metabolic cooperation. ...

Multimer-PAGE: A Method for Capturing and Resolving Protein Complexes in Biological Samples

There are many well-developed methods for purifying and studying single proteins and peptides. However, most cellular functions are carried out by networks of interacting protein complexes, which are often difficult to investigate because their binding is non-covalent and easily perturbed by purification techniques. This work describes a method of stabilizing and separating native protein complexes from unmodified tissue using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. Tissue lysate is loaded onto a non-denaturing blue-native polyacrylamide gel, then an electric current is applied until the protein migrates a short distance into the gel. The gel strip containing the migrated protein is then excised and incubated with the amine-reactive cross-linking reagent dithiobis(succinimidyl propionate), which covalently stabilizes protein complexes. The gel strip containing cross-linked complexes is then cast into a sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel, and the complexes are separated completely. The method relies on techniques and materials familiar to most molecular biologists, meaning it is inexpensive and easy to learn. While it is limited in its ability to adequately separate extremely large complexes, and has not been universally successful, the method was able to capture a wide variety of well-studied complexes, and is likely applicable to many systems of interest.

A method for stabilizing and separating native protein complexes from unmodified tissue lysate using an amine-reactive protein cross-linker coupled to a novel two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) system is presented.

Multimer-עמוד: שיטה לכידת וחלבון פתרון מתחמי דגימות ביולוגיות

There are many well-developed methods for purifying and studying single proteins and peptides. However, most cellular functions are carried out by ...

Determination of the Glycogen Content in Cyanobacteria

Cyanobacteria accumulate glycogen as a major intracellular carbon and energy storage&#160;during photosynthesis. Recent developments in research have highlighted complex mechanisms of glycogen metabolism, including the diel cycle of biosynthesis and catabolism, redox regulation, and the involvement of non-coding RNA. At the same time, efforts are being made to redirect carbon from glycogen to desirable products in genetically engineered cyanobacteria to enhance product yields. Several methods are used to determine the glycogen contents in cyanobacteria, with variable accuracies and technical complexities. Here, we provide a detailed protocol for the reliable determination of the glycogen content in cyanobacteria that can be performed in a standard life science laboratory. The protocol entails the selective precipitation of glycogen from the cell lysate and the enzymatic depolymerization of glycogen to generate glucose monomers, which are detected by a glucose oxidase-peroxidase (GOD-POD) enzyme coupled assay. The method has been applied to Synechocystis sp. PCC 6803 and Synechococcus sp. PCC 7002, two model cyanobacterial species that are widely used in metabolic engineering. Moreover, the method successfully showed differences in the glycogen contents between the wildtype and mutants defective in regulatory elements or glycogen biosynthetic genes.

Here, we present a reliable and easy assay to measure the glycogen content in cyanobacterial cells. The procedure entails precipitation, selectable depolymerization, and the detection of glucose residues. This method is suitable for both wildtype and genetically engineered strains and can facilitate the metabolic engineering of cyanobacteria.

קביעת תוכן הגליקוגן בקיאנובקטריה

Cyanobacteria accumulate glycogen as a major intracellular carbon and energy storage&#160;during photosynthesis. Recent developments in research have ...

Structural Characterization of Mannan Cell Wall Polysaccharides in Plants Using PACE

Plant cell wall polysaccharides are notoriously difficult to analyze, and most methods require expensive equipment, skilled operators, and large amounts of purified material. Here, we describe a simple method for gaining detailed polysaccharide structural information, including resolution of structural isomers. For polysaccharide analysis by gel electrophoresis (PACE), plant cell wall material is hydrolyzed with glycosyl hydrolases specific to the polysaccharide of interest (e.g., mannanases for mannan). Large format polyacrylamide gels are then used to separate the released oligosaccharides, which have been fluorescently labeled. Gels can be visualized with a modified gel imaging system (see Table of Materials). The resulting oligosaccharide fingerprint can either be compared qualitatively or, with replication, quantitatively. Linkage and branching information can be established using additional glycosyl hydrolases (e.g., mannosidases and galactosidases). Whilst this protocol describes a method for analyzing glucomannan structure, it can be applied to any polysaccharide for which characterized glycosyl hydrolases exist. Alternatively, it can be used to characterize novel glycosyl hydrolases using defined polysaccharide substrates.

A protocol for the structural analysis of polysaccharides by gel electrophoresis (PACE), using mannan as an example, is described.

אפיון מבניים של מנן פוליסכרידים דופן התא בצמחים באמצעות קצב

Plant cell wall polysaccharides are notoriously difficult to analyze, and most methods require expensive equipment, skilled operators, and large amounts ...

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

Caenorhabditis elegans is a useful organism for testing chemical effects on physiology. Whole organism small molecule screens offer significant advantages for identifying biologically active chemical structures that can modify complex phenotypes such as lifespan. Described here is a simple protocol for producing hundreds of 96-well culture plates with fairly consistent numbers of C. elegans in each well. Next, we specified how to use these cultures to screen thousands of chemicals for effects on the lifespan of the nematode C. elegans. This protocol makes use of temperature sensitive sterile strains, agar plate conditions, and simple animal handling to facilitate the rapid and high throughput production of synchronized animal cultures for screening.

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

Here we describe a simple protocol for rapidly producing hundreds of nematode growth media agar, 96-well culture plates with consistent numbers of Caenorhhabditis elegans per well. These cultures are useful for the phenotypic screening of whole organisms. We focus here on using these cultures to screen chemicals for pro-longevity effects.

שיטה פשוטה להקרנה כימי תפוקה גבוהה ב Caenorhabditis Elegans

Caenorhabditis elegans is a useful organism for testing chemical effects on physiology. Whole organism small molecule screens offer significant advantages ...

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

This is a simple protocol for the quantitative determination of phycobiliprotein content in the model cyanobacterium Synechocystis. Phycobiliproteins are the most important components of phycobilisomes, the major light-harvesting antennae in cyanobacteria and several algae taxa. The phycobilisomes of Synechocystis contain two phycobiliproteins: phycocyanin and allophycocyanin. This protocol describes a simple, efficient, and reliable method for the quantitative determination of both phycocyanin and allophycocyanin in this model cyanobacterium. We compared several methods of phycobiliprotein extraction and spectrophotometric quantification. The extraction procedure as described in this protocol was also successfully applied to other cyanobacteria strains such as Cyanothece sp., Synechococcuselongatus, Spirulina sp., Arthrospira sp., and Nostoc sp., as well as to red algae Porphyridium cruentum. However, the extinction coefficients of specific phycobiliproteins from various taxa can differ and it is, therefore, recommended to validate the spectrophotometric quantification method for every single strain individually. The protocol requires little time and can be performed in any standard life science laboratory since it requires only standard equipment.

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Here, we present a protocol to quantitatively determine phycobiliprotein content in the cyanobacterium Synechocystis using a spectrophotometric method. The extraction procedure was also successfully applied to other cyanobacteria and algae strains; however, due to variations in pigment absorption spectra, it is necessary to test the spectrophotometric equations for each strain individually.

קביעת spectrophotometric תוכן Phycobiliprotein Cyanobacterium Synechocystis

This is a simple protocol for the quantitative determination of phycobiliprotein content in the model cyanobacterium Synechocystis. Phycobiliproteins are ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the progression of cancer, diabetes, neurodegeneration, and aging to name a few. For instance, changes in mitochondrial activity, the cell&#39;s metabolic powerhouse, have been characterized in many such diseases. Generally, the oxygen consumption rates of mitochondria were considered a reliable readout of mitochondrial activity and measurements in some of these studies were based on isolated mitochondria or cells. However, such conditions may not represent the complexity of a whole tissue. Recently, we have developed a novel method that enables the dynamic measurement of oxygen consumption rates from whole isolated fly heads. By utilizing this method, we have recorded lower oxygen consumption rates of the whole head segment in young versus aged flies. Secondly, we have discovered that lysine deacetylase inhibitors rapidly alter the oxygen consumption in the whole head. Our novel technique may therefore aid in uncovering new properties of various drugs, which may impact metabolic rates. Furthermore, our method may give a better understanding of metabolic behavior in an experimental setup that more closely resembles physiological states.

Measuring alterations in metabolic rates is central to understanding the progression of various diseases and aging. Here, we present a novel technique to measure whole head oxygen consumption that more closely resembles the physiological state and may aid in revealing novel drugs that modify mitochondrial activity.

מדידת ופרשנות חמצן קצב הצריכה כולה לטוס הראש מקטעים

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

Using High Content Imaging to Quantify Target Engagement in Adherent Cells

Quantitating the interaction of small molecules with their intended protein target is critical for drug development, target validation and chemical probe validation. Methods that measure this phenomenon without modification of the protein target or small molecule are particularly valuable though technically challenging. The cellular thermal shift assay (CETSA) is one technique to monitor target engagement in living cells. Here, we describe an adaptation of the original CETSA protocol, which allows for high throughput measurements while retaining subcellular localization at the single cell level. We believe this protocol offers important advances to the application of CETSA for in-depth characterization of compound-target interaction, especially in heterogeneous populations of cells.

Measurements of drug target engagement are central to effective drug development and chemical probe validation. Here, we detail a protocol for measuring drug-target engagement using high content imaging in a microplate-compatible adaption of the cellular thermal shift assay (CETSA).

באמצעות תוכן גבוהה הדמיה לכמת התחייבות היעד תאים חסיד

Quantitating the interaction of small molecules with their intended protein target is critical for drug development, target validation and chemical probe ...

A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster

Mitochondria play the most prominent roles in cellular metabolism by producing ATP through oxidative phosphorylation and regulating a variety of physiological processes. Mitochondrial dysfunction is a primary cause of a number of metabolic and neurodegenerative diseases. Intact mitochondria are critical for their proper functioning. The enzyme citrate synthase is localized in the mitochondrial matrix and thus can be used as a quantitative enzyme marker of intact mitochondrial mass. Given that many molecules and pathways that have important functions in mitochondria are highly conserved between humans and Drosophila, and that an array of powerful genetic tools are available in Drosophila, Drosophila serves as a good model system for studying mitochondrial function. Here, we present a protocol for fast and simple measurement of citrate synthase activity in tissue homogenate from adult flies without isolating mitochondria. This protocol is also suitable for measuring citrate synthase activity in larvae, cultured cells, and mammalian tissues.

A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster

We present a protocol for a colorimetric assay of citrate synthase activity for quantification of intact mitochondrial mass in Drosophila tissue homogenates.

שיטה ערכי צבע מוחלטים למדידת תכולת ברזל צמחים

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

שיטה למדידת RNA