במהלך השנים האחרונות, הנדסת כבד הפכה לנושא חם ברחבי העולם בשל הפוטנציאל של יצירת השתלות כבד מסוגל השתלה. עם זאת פונקציה לטווח ארוך קיימא והשתלת איברים מהונדסים הם עדיין חזון של העתיד. לאחרונה in-vivo הכבד אונה שפע הפך אסטרטגיה מבטיחה להתחיל הנדסת כבד.
היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי in-vivo מחדש פיגום כבד חלקי נתון שפע דם סקאטולוגי. זה מספק את הפיגום עם הטמפרטורה הנכונה, מספיק חמצן, חומרים מזינים וגורמי גדילה לעומת שפע vivo לשעבר עם מדיום תרבות מלאכותית. יתרון נוסף הוא כי הכבד הנותר שומר על תפקוד הכבד ובכך בעיקר מאפשר הישרדות לטווח ארוך.
עם זאת מודל שפע האונה הבודדת in-vivo הוא מאתגר מבחינה טכנית והישרדות לאחר הניתוח טרם הושגה. כאן אנו הולכים להציג מודל כירורגי אחר עם הישרדות לטווח ארוך כבסיס להנדסת אונה כבד יחידה in-vivo נוספת. לפני שנדגים את המודל הכירורגי, אנחנו רוצים לתת היכרות קצרה עם האנטומיה של כבד העכברוש.
כדי לבסס את מודל שפע האונה הכבדית הבודדת שלנו בחרנו את האונה השמאלית. זוהי אונת הכבד היחידה עם אספקת כלי דם וניקוז ברורים המאפשרים ליצור מעקף. זהו שחזור תלת מימדי של מערכת ורידים פורטל בחולדה.
ההתמקדות שלנו כאן היא על וריד הפורטל השמאלי אשר ישמש מאוחר יותר כמשטח הנוזלים. זהו שחזור תלת מימדי של מערכת הווריד בהירכיה בחולדה. כאן ההתמקדות שלנו היא על וריד הלחץ בצד שמאל אשר ישמש מאוחר יותר כשקע נוזלים.
איור זה של אנטומיה של כלי הדם בכבד מדגיש את נקודות הגישה של כלי הדם המשמשות למודל זלוק חלקי. אנימציה זו ממחישה את התוכנית של יצירת מודל זלוב האונה בצד שמאל של האונה השמאלית. על מנת להקים את המודל הכירורגי אנחנו הולכים ליצור מעקף מעגל בתוך האונה השמאלית.
לשם כך עלינו לחסום את כלי השיט הבאים את וריד הפורטל השמאלי, את עורק הלחץ השמאלי, את צינור המרה השמאלי, את וריד הפרוטלי החציוני השמאלי, את עורק הלחץ ואת צינור המרה, ואת וריד הירך השמאלי. אז אנחנו צריכים לחשוף את וריד השער השמאלי עם קטטר 24 גייג'. לאחר מכן וריד ההיפוך השמאלי הוא cannulated באמצעות קטטר 22 gage.
ואז הקטטר בווריד הפורטל השמאלי מחובר למשאבת תדלוק. גזה יבשה ממוקמת בשקע של הקטטר בווריד ההפטי השמאלי כדי לספוג נוזלי פסולת. בדרך זו מעקף נוצר.
ואז האונה האחורית השמאלית חדורה מלוחים heparinized בקצב זרימה של 0.5 מיליליטר לדקה. זלוח פיזיולוגי לאונה השמאלית בצדד משוחזר לאחר פתיחת הכלים החסומים. עכשיו מודל חליטה כירורגית הוקמה.
כל ההליכים שהוכחו בסרטון זה נבדקו ואושרו על ידי הרשויות המקומיות. שדה הפעולה של הבטן הוא חיטוי עם שלושה סיבובים של תמיסת יוד ואחריו שני סיבובים של 70% אלכוהול. גזה סטרילית מונחת על הבטן ומשאירה רק את שדה הניתוח חשוף.
חתך רוחבי נעשה על דופן הבטן של החולדה. תפר פרולן 4-0 משמש לתיקון תהליך xiphoid ולמשוך אותו לכיוון הראש. שני צידי דפנות הבטן העליונות נסוגים באמצעות שני ווים תת-צלאליים כדי להגיע לחשיפה מלאה של האיבר.
אז נוכל לראות את אונות הכבד. הנה האונה השמאלית בצד השני המשמשת לזליבה סלקטיבית. אנחנו מכסים את התריסום ואת המעי הדק בחלל הבטן עם גזה לחה לייבוש ביובי.
אנו חושפים את ההילום של הכבד על ידי הרמת האונות החציוניות עם גזה לחה. החולדה ממוקמת תחת מיקרוסקופ סטרילי. אנחנו לנתח את וריד השער השמאלי.
לאחר מכן אנו קוגדים את וריד הפרוטלי השמאלי עם תפר משי 6-0. עורק הירך השמאלי, צינור המרה השמאלי, כמו גם וריד הפורטל החציוני השמאלי, עורק הלחץ החציוני השמאלי, וצינור המרה החציוני השמאלי חסומים באמצעות מיקרו-מלחציים. אנחנו חוסמים את וריד הלחץ השמאלי עם מיקרו-מלחציים בבסיס האונה השמאלית.
כדי ליצור את ההקדמה הנוזלית, הגבעול של וריד הפורטל מנוקב עם קטטר 24 מחט גייג'. אבל הקטטר לא מוכנס. לאחר מכן אנו מסירים את המחט מהקטטר ומחברים את הקטטר למשאבת תדלוק.
כדי לגרש אוויר מהצינור ומהקטטר, אנו מזינים בתמיסת מלח הפרינית לדקה. לאחר מכן נכבה את המשאבה. הבא קטטר חינם מחט, אשר מחובר כעת למשאבת תדלוק, מוכנס לתוך וריד הפורטל השמאלי.
בדרך זו אנו למזער מניפולציות של כלי מסונן. הנה אזור חשוף של וריד הלחץ בצד שמאל אנחנו הולכים cannulate באופן דומה. ראשית אנו יוצרים חור ניקוז בווריד הלחץ בצד שמאל על ידי ניקור אותו עם קטטר 22 gage או 24 מחט gage מגורים.
אנו ממליצים כי קטטר הוא קצת יותר קטן מאשר כלי השיט. לאחר מכן אנו מתחילים לבלבל את האונה השמאלית עם מלוחים heparinized בקצב זרימה של 0.5 מיליליטר לדקה. נוזל הפסולת הזורם נספג בגאזה.
כדי למזער את הזיהום התוך-א-א-דו-מינאלי בנוזלי פסולת, אנו מכנסים מחדש את הקטטר ללא מחט לווריד כבד שמאלי. לכן וריד ההירד השמאלי הקנולי משמש כשקע נוזלים. אנחנו ממשיכים לזלזל האונה האחורית השמאלית עם מלוחים heparinized.
ניתן לראות נוזל מדמם נוטף מהשקע. החץ מציין כי האונה השמאלית הפכה צהובה במהלך זלולה עם מלוחים heparinized. בסוף זלוק הקטטרים נלקחים מתוך כלי הדם.
פתח הניקוז על וריד הלחץ בצד שמאל סגור עם תפר פולומיט יחיד 11-0. פתיחת המפרץ על וריד הפורטל השמאלי סגורה עם תפר פולומיט 11-0 גם כן. זלולה מחדש מתחילה עם זרימה אחורית מן vena קאווה suprahepatic לאחר הסרת המהדק על וריד הלחץ בצד שמאל.
חליטה פיזיולוגית משוחזרת עוד יותר לאחר הסרת המהדק מעורק הירך השמאלי צינור המרה, כמו גם את המבנים החציוניים השמאליים כלי הדם. תדלוק מלא מושגת לאחר פתיחה מחדש של וריד הפורטל השמאלי כפי שצוין על ידי שינוי צבע לאדום כהה. תדלוק של האונה השמאלית מאוחר יותר.
החץ הלבן בתמונה זו מצביע על כך שאונה הכבד היעד אכן היה מנוקב באופן סלקטיבי. כאן החצים הלבנים מראים כי האונות הנותרות, המייצגות כ -70% מהכבד שמרו על זיקוק פיזיולוגי לאורך כל ההליך. זלולה של האונה השמאלית.
כאן החץ האדום מציין כי האונה השמאלית בצד השני היא פיזיולוגית מחדש לאחר פתיחת מחדש את כלי הדם החסומים. החץ הכחול מראה כי האונה החציונית השמאלית ספגה קשהמיה. האונה הצידית השמאלית המרוסלת באופן סלקטיבי נבדקה בהיסטולוגית באמצעות כתמי H E.
איור א' מראה כי באונה הנגלית השמאלית לא ניתן לזהות תאי דם בסניף של וריד הפורטל והסינוסואידים. כצפוי תאים אדומים נראים בסניף של עורק הכבד. ב איור B, האונה הסוררת הנחותה משמשת כבקרה.
תאי דם נראים בבירור ואת הענפים של וריד הפרוטלי ועורק הכבד, כמו גם את הסינוסואידים. איור C מדגים כי באונה הנגלית השמאלית המפותלת אין תאי דם הנראים בווריד המרכזי. לעומת זאת, איור D מדגים כי בתאי הדם של האונה הנתעבת השליטה נראים בווריד המרכזי.
השגנו שיעור הישרדות של 100% בשבוע אחד ב-12 הליכים רצופים. השווינו את מודל חליטת האונה בכבד in-vivo שלנו עם המודל של פאן ועמיתיו. ההבדלים העיקריים במתודולוגיה ובתוצאות בין פאן לקבוצה שלנו הם: הם בחרו את האונה הנחותה הימנית בזמן שבחרנו באונה הצדדית השמאלית כאונה כבדית יעד; הם חסמו את vena cava ואת וריד הפורטל הראשי המובילים יתר לחץ דם בפורטל.
לעומת זאת שמרנו על חליטת פורטל של 70% מהכבד;הם הקריבו את החולדות באופן פעיל בעוד שקצב ההישרדות שלנו בשבוע אחד הוא 100% היתרונות של המודל הכירורגי החדשני שלנו הם: שזה מאתגר מבחינה טכנית אך ריאלי;ו שהוא נסבל היטב כפי שהוכח על ידי שיעור ההישרדות של 100%. עם זאת מגבלה אחת היא כי האונה החציונית השמאלית מתמשכת קשה עקב חסימה של וריד הפורטל. יישומים פוטנציאליים של הטכניקה שלנו כוללים:כי הוא יכול לשמש לטיפול באיברים חלקיים in-vivo על ידי זלוב עם תרופות;in-vivo איברים חלקי decellularization כמו resection כימי;in-vivo מערכת תרבות התא בהשוואה לשעבר vivo;והנדסת כבד in-vivo.
