지난 몇 년 동안, 간 공학 은 이식 가능 간 이식을 생성의 잠재력 으로 인해 전 세계적으로 화제가되고있다. 그러나 실행 가능한 장기 기능과 엔지니어링 장기의 이식은 여전히 미래의 비전입니다. 최근 생체 내 간 엽 풍부는 간 공학을 시작하는 유망한 전략이되고있다.
이 기술의 주요 장점은 생체 내 부분 간 비계가 비골혈액증을 받았다는 것입니다. 이것은 인공 배양 매체를 가진 전 생체 주입과 대조적으로 적당한 온도, 충분한 산소, 양분 및 성장 인자를 가진 발판을 제공합니다. 또 다른 장점은 남은 간이 간 기능을 유지하고 그로 주로 장기 생존을 허용한다는 것입니다.
그러나 생체 내 단일 로브 풍부유 모델은 기술적으로 도전적이며 수술 후 생존은 아직 달성되지 못했습니다. 여기에서 우리는 더 생체 내 단 단 엽 공학을 위한 기초로 장기 생존을 가진 또 다른 외과 모형을 제시할 것입니다. 수술 모델을 시연하기 전에 쥐 간 해부학에 대한 간략한 소개를 하고 싶습니다.
단일 간 엽 증혈 모델을 확립하기 위해 좌측 측삭 엽을 선택했습니다. 이것은 우회를 만들 수 있도록 뚜렷한 혈관 공급 및 배수와 유일한 간 엽입니다. 이것은 쥐의 포털 정맥 시스템의 3 차원 재구성입니다.
여기에 우리의 초점은 나중에 유체 입구 역할을 할 왼쪽 포털 정맥에 있습니다. 이것은 쥐에 있는 간 정맥 계통의 3D 재건입니다. 여기에서 우리의 초점은 나중에 액체 출구로 봉사할 좌측 측삭 정맥에 있습니다.
간 혈관 해부학의이 그림은 부분 관류 모델을 밖으로 사용하는 혈관 액세스 포인트를 강조한다. 이 애니메이션은 생체 내 왼쪽 측면 간 엽 관류 모델을 생성하는 방식을 보여줍니다. 수술 모델을 확립하기 위해 우리는 왼쪽 측면 엽 내에서 회로 우회를 생성할 것입니다.
이를 위해 우리는 왼쪽 포탈 정맥, 왼쪽 간 동맥, 왼쪽 담관, 왼쪽 중앙분리성 혈관, 간 동맥 및 담관, 그리고 좌측 측삭 정맥을 다음 혈관을 차단해야 합니다. 그런 다음 우리는 24 게이지 카테터로 왼쪽 포털 정맥을 캐너레이해야합니다. 그 후 좌측 측삭 정맥은 22 게이지 카테터를 사용하여 캔누징된다.
그런 다음 왼쪽 포털 정맥의 카테터는 관류 펌프에 연결됩니다. 건조 거즈는 폐액을 흡수하기 위해 좌측 간 정맥의 카테터 의 출구에 배치됩니다. 이렇게 하면 바이패스가 만들어집니다.
그런 다음 왼쪽 측면 엽은 분당 0.5 밀리리터의 유량에서 분리된 식염수와 함께 퍼집니다. 왼쪽 측면 엽에 대한 생리적 관류는 막힌 혈관을 재개한 후 복원됩니다. 이제 외과 관류 모델이 설립되었습니다.
이 비디오에서 입증 된 모든 절차는 지방 당국에 의해 평가되고 승인되었습니다. 복부의 수술장은 요오드 팅크의 3 라운드에 소독되고 70 %의 알코올의 두 라운드가 뒤따릅니다. 멸균 거즈는 복부에 배치되어 수술장만 노출됩니다.
쥐의 복벽에 는 횡절개가 만들어집니다. 4-0 프롤렌 봉합사는 xiphoid 과정을 수정하고 머리쪽으로 당기는 데 사용됩니다. 상부 복부 벽의 양면은 기관의 완전한 노출에 도달하기 위하여 2개의 서브코스트 후크를 사용하여 철회됩니다.
그런 다음 간 엽을 볼 수 있습니다. 다음은 선택적 관류에 사용되는 왼쪽 측면 엽입니다. 우리는 십이지장과 복강의 소장을 촉촉한 거즈로 덮어 건조함을 드러내습니다.
우리는 촉촉한 거즈로 중앙엽을 들어 올려 간 의 일루라움을 노출시다. 쥐는 멸균 현미경의 밑에 놓입니다. 우리는 왼쪽 포털 정맥을 해부합니다.
그런 다음 왼쪽 프로탈 정맥을 6-0 실크 봉합사로 리게이트합니다. 왼쪽 간 동맥, 좌측 담관, 왼쪽 중앙분리대, 좌중형 간 동맥 및 왼쪽 중앙담관은 마이크로 클램프를 사용하여 차단된다. 우리는 왼쪽 측면 엽의 바닥에 마이크로 클램프로 왼쪽 측면 간 정맥을 차단합니다.
유체 입구를 만들기 위해, 포털 정맥의 줄기는 24 게이지 바늘 주거 카테터로 구멍을 뚫었다. 그러나 카테터는 삽입되지 않습니다. 그런 다음 카테터에서 바늘을 제거하고 카테터를 관류 펌프에 연결합니다.
튜브와 카테터에서 공기를 배출하기 위해, 우리는 1 분 동안 헤파리니드 식염수로 퍼펙터. 그런 다음 펌프를 끕니다. 다음으로 지금 관류 펌프에 연결되는 바늘 없는 카테터는 좌측 포문 정맥에 삽입됩니다.
이런 식으로 우리는 캐너리 선박의 조작을 최소화합니다. 여기에 우리가 비슷한 방법으로 cannulate하려고 왼쪽 측면 간 정맥의 노출 된 영역입니다. 먼저 우리는 22 게이지 또는 24 게이지 바늘 주거 카테터로 구멍을 뚫음으로써 왼쪽 측면 간 정맥에 배수 구멍을 만듭니다.
카테터는 용기보다 약간 작습니다. 그런 다음 분당 0.5 밀리리터의 유량으로 분리된 식염수로 왼쪽 측면 엽을 인내하기 시작합니다. 흐르는 폐액은 거즈로 흡수됩니다.
폐액으로 복부 내 오염을 최소화하기 위해 바늘이 없는 카테터를 왼쪽 측면 간 정맥에 다시 삽입합니다. 따라서 수액 왼쪽 측면 간 정맥은 유체 출구 역할을한다. 우리는 왼쪽 측면 엽을 분리된 식염수로 계속 퍼프합니다.
피 묻은 액체는 콘센트에서 떨어지는 볼 수 있습니다. 화살표는 왼쪽 측면 엽이 분리된 식염수와 함께 관류 중에 노란색으로 변했음을 나타냅니다. 관류가 끝나면 카테터는 용기에서 꺼낸다.
좌측 측삭 정맥의 배수 개구부는 단일 11-0 질루나이트 봉합사로 닫힙을 메우고 있습니다. 왼쪽 포털 정맥의 입구 개구부도 11-0 의 추합봉으로 닫힙시다. 재관류는 좌측 측삭 정맥의 클램프를 제거한 후 수프라간 정맥 카바에서 역류로 시작됩니다.
생리적 관류는 왼쪽 간 동맥 및 담관뿐만 아니라 왼쪽 중앙 관 구조에서 클램프를 제거 한 후 더 복원됩니다. 진한 빨간색으로 색상 변경으로 표시된 대로 왼쪽 포털 정맥을 다시 열면 완전한 재관류가 달성됩니다. 왼쪽 뒤엽의 관류.
이 이미지의 흰색 화살표는 표적 간 엽이 실제로 선택적으로 침투했음을 나타냅니다. 여기서 백색 화살은 간의 대략 70%를 대표하는 나머지 엽이 전체 절차를 통해 생리적인 관류를 유지했다는 것을 보여줍니다. 왼쪽 측면 엽의 재관류.
여기서 적색 화살표는 왼쪽 측면 엽이 막힌 혈관을 다시 연 후 생리적으로 재발한다는 것을 나타낸다. 파란색 화살표는 왼쪽 중앙값 엽이 허혈을 지속한다는 것을 보여줍니다. 선택적으로 침투된 좌측 측삭 엽은 H E 염색을 사용하여 조직학적으로 검사되었다.
도 A는 전동된 좌측 엽에서 포문 정맥및 부비동의 가지에서 혈액 세포가 검출되지 않는다는 것을 보여준다. 예상대로 적혈구는 간 동맥의 지점에서 볼 수 있습니다. 그림 B에서 열등한 카우다테 로브는 제어 역할을 한다.
혈액 세포는 명확하게 볼 수 있으며, 비누소뿐만 아니라 프로 탈 정맥과 간 동맥의 가지. 도 C는 중앙 정맥에서 볼 수 있는 혈액 세포가 없는 퍼지좌 측면 엽에서 보여줍니다. 대조적으로, 도면 D는 대조군에서 열등한 카우다이로데이트 엽 혈액 세포가 중앙 정맥에서 볼 수 있음을 보여줍니다.
12회 연속 1주일 연속 생존율을 달성했습니다. 우리는 팬과 동료의 모델과 우리의 생체 내 간 엽 관류 모델을 비교했다. Pan과 우리 그룹 사이의 방법론과 결과의 주요 차이점은 다음과 같습니다 : 우리는 대상 간 엽으로 왼쪽 측면 엽을 선택하는 동안 오른쪽 열등엽을 선택; 그들은 포털 고혈압으로 이어지는 베나 카바와 주요 포털 정맥을 차단.
대조적으로 우리는 간 70%의 포털 관류를 유지했습니다;1주일 생존율은 100%인 반면, 쥐를 수술간 희생시켰습니다: 그것은 기술적으로 도전적이지만 실현 가능하다는 것입니다;그리고 100%의 생존율에 의해 입증된 바와 같이 잘 용납된다는 것입니다. 그러나 한 가지 제한은 포털 정맥의 막힘으로 인해 좌측 중앙값이 허혈을 지속한다는 것입니다. 우리의 기술의 잠재적인 응용 프로그램은 다음과 같습니다 :즉 약물과 관류에 의해 생체 내 부분 장기 치료에 사용할 수 있습니다;화학 절제술로 생체 내 부분 장기 탈세포화; 전 생체 내 간 공학에 비해 생체 내 세포 배양 시스템.
