Au cours des dernières années, l’ingénierie hépatique est devenue un sujet d’actualité dans le monde entier en raison de son potentiel de générer des greffes de foie capables de greffe. Toutefois, la fonction viable à long terme et la transplantation d’organes artificiels sont encore une vision de l’avenir. Récemment, la profusion in vivo du lobe du foie est devenue une stratégie prometteuse pour commencer l’ingénierie hépatique.
Un avantage majeur de cette technique est que l’échafaudage partiel in vivo de foie a soumis la profusion scatologique de sang. Ceci fournit à l’échafaudage la température appropriée, l’oxygène suffisant, les éléments nutritifs et les facteurs de croissance en contraste à la profusion ex vivo avec le milieu artificiel de culture. Un autre avantage est que le foie restant maintient la fonction hépatique et permet ainsi principalement la survie à long terme.
Cependant, le modèle in vivo de profusion de lobe unique est techniquement difficile et la survie postopératoire n’a pas encore été réalisée. Ici, nous allons présenter un autre modèle chirurgical avec la survie à long terme comme base pour d’autres in vivo ingénierie lobe du foie unique. Avant de démontrer le modèle chirurgical, nous aimerions donner une brève introduction à l’anatomie du foie de rat.
Pour établir notre modèle unique de profusion de lobe de foie nous avons choisi le lobe latéral gauche. C’est le seul lobe du foie avec un approvisionnement vasculaire distinct et le drainage permettant de créer un pontage. Il s’agit d’une reconstruction 3D du système veineux portail chez le rat.
Nous nous concentrons ici sur la veine du portail gauche qui servira plus tard d’entrée fluide. Il s’agit d’une reconstruction 3D du système veineux hépatique chez le rat. Ici, nous nous concentrons sur la veine hépatique latérale gauche qui servira plus tard de sortie fluide.
Cette illustration de l’anatomie vasculaire de foie accentue les points d’accès vasculaires utilisés pour dehors le modèle partiel de perfusion. Cette animation illustre le schéma de génération du modèle in vivo gauche de perfusion latérale de lobe de foie. Afin d’établir le modèle chirurgical, nous allons générer une déviation de circuit dans le lobe latéral gauche.
À cette fin nous devons bloquer les vaisseaux suivants la veine gauche de portail, l’artère hépatique gauche, le canal biliaire gauche, la veine protale médiane gauche, l’artère hépatique et le conduit biliaire, et la veine hépatique latérale gauche. Ensuite, nous devons cannuler la veine du portail gauche avec un cathéter de 24 gages. Ensuite, la veine hépatique latérale gauche est cannulée à l’aide d’un cathéter de 22 gages.
Ensuite, le cathéter dans la veine du portail gauche est relié à une pompe de perfusion. La gaze sèche est placée à la sortie du cathéter dans la veine hépatique latérale gauche pour absorber le liquide de déchets. De cette façon, un contournement est créé.
Puis le lobe latéral gauche perfusé avec saline héparinisée à un débit de 0,5 millilitres par minute. La perfusion physiologique au lobe latéral gauche est rétablie après la réouverture des vaisseaux bloqués. Maintenant, le modèle de perfusion chirurgicale est établi.
Toutes les procédures démontrées dans cette vidéo ont été évaluées et approuvées par les autorités locales. Le champ d’opération de l’abdomen est désinfecté avec trois tours de teinture d’iode suivis de deux tours de 70% d’alcool. La gaze stérile est placée sur l’abdomen, ne laissant que le champ d’opération exposé.
Une incision transversale est pratiquée sur la paroi abdominale du rat. Une suture prolène 4-0 est utilisée pour fixer le processus xiphoïde et le tirer vers la tête. Les deux côtés des parois abdominales supérieures sont rétractés à l’aide de deux crochets subcoastal pour atteindre la pleine exposition de l’organe.
Ensuite, nous pouvons voir les lobes du foie. Voici le lobe latéral gauche qui est utilisé pour la perfusion sélective. Nous couvrons le du duodénoum et l’intestin grêle dans la cavité abdominale avec la gaze humidifié à la sécheresse ovoïde.
Nous exposons le hilum du foie en soulevant les lobes médians avec de la gaze humidifié. Le rat est placé sous un microscope stérile. Nous disséquer la veine du portail gauche.
Nous avons ensuite ligate la veine protale gauche avec une suture de soie 6-0. L’artère hépatique gauche, le canal biliaire gauche, aussi bien que la veine médiane gauche de portail, l’artère hépatique médiane gauche, et le canal biliaire médian gauche sont bloqués utilisant des micro-pinces. Nous blocons la veine hépatique latérale gauche avec des micro-pinces à la base du lobe latéral gauche.
Pour créer l’entrée fluide, la tige de la veine portail est perforée d’un cathéter d’habitation à aiguille de 24 gages. Mais le cathéter n’est pas inséré. Nous enlevons ensuite l’aiguille du cathéter et connectons le cathéter à une pompe à perfusion.
Pour expulser l’air du tube et du cathéter, nous infusons avec de la solution saline héparinée pendant une minute. Nous éteigneons ensuite la pompe. Ensuite, le cathéter sans aiguille, qui est maintenant relié à la pompe de perfusion, est inséré dans la veine du portail gauche.
De cette façon, nous minimisons les manipulations du vaisseau cannulé. Voici une région exposée de la veine hépatique latérale gauche que nous allons cannuler de la même manière. D’abord nous créons un trou de drainage dans la veine hépatique latérale gauche en la ponctuant avec un cathéter d’habitation d’aiguille de 22 gages ou de 24 gages.
Nous recommandons que le cathéter soit légèrement plus petit que le navire. Nous commençons alors à parcourir le lobe latéral gauche avec saline héparinisée à un débit de 0,5 millilitres par minute. Le liquide de déchets qui coule est absorbé par la gaze.
Pour minimiser la contamination intraabdominale par le liquide usé, nous réinserons le cathéter sans aiguille dans la veine hépatique latérale gauche. Ainsi, la veine hépatique latérale gauche cannulée sert de sortie fluide. Nous continuons à perfuser le lobe latéral gauche avec la solution saline héparinisée.
Le liquide sanglant peut être vu dégoulinant de la sortie. La flèche indique que le lobe latéral gauche est devenu jaune pendant la perfusion avec la solution saline héparinisée. À la fin de la perfusion, les cathéters sont retirés des navires.
L’ouverture de drainage sur la veine hépatique latérale gauche est fermée avec une suture pollumite simple de 11-0. L’ouverture de l’entrée sur la veine du portail gauche est fermée avec une suture pollumite 11-0 ainsi. La perfusion de re commence par le retour du cava suprahépatique de vena après avoir enlevé la pince sur la veine hépatique latérale gauche.
La perfusion physiologique est encore restaurée après avoir enlevé la pince de l’artère hépatique gauche et du canal biliaire, ainsi que les structures vasculaires médianes gauches. La perfusion complète est réalisée après la réouverture de la veine du portail gauche, comme l’indique un changement de couleur en rouge foncé. Perfusion du lobe gauche plus tard.
La flèche blanche de cette image indique que le lobe du foie cible a en effet été perfusé sélectivement. Ici, les flèches blanches montrent que les lobes restants, qui représentent environ 70% du foie conservé perfusion physiologique tout au long de la procédure. Re perfusion du lobe latéral gauche.
Ici, la flèche rouge indique que le lobe latéral gauche est physiologiquement réinfusé après la réouverture des vaisseaux bloqués. La flèche bleue montre que le lobe médian gauche a soutenu l’ischémie. Le lobe latéral gauche sélectivement perfusé a été histologiquement examiné utilisant la coloration de H E.
La figure A montre que dans le lobe latéral gauche perfusé, aucune cellule sanguine n’est détectable dans la branche de la veine portail et les sinusoïdes. Comme prévu, les globules rouges sont visibles dans la branche de l’artère hépatique. Dans la figure B, le lobe caudate inférieur sert de contrôle.
Les cellules sanguines sont clairement visibles et les branches de la veine protale et de l’artère hépatique ainsi que les sinusoïdes. La figure C démontre que dans le lobe latéral gauche perfusé, il n’y a pas de cellules sanguines visibles dans la veine centrale. En revanche, la figure D démontre que dans le contrôle inférieur cellules sanguines du lobe caudate sont visibles dans la veine centrale.
Nous avons atteint un taux de survie de 100% sur une semaine dans 12 procédures consécutives. Nous avons comparé notre modèle in vivo de perfusion de lobe de foie avec le modèle de Pan et des collègues. Les principales différences dans la méthodologie et les résultats entre Pan et notre groupe sont: ils ont choisi le lobe inférieur droit tandis que nous avons choisi le lobe latéral gauche comme lobe du foie cible; ils ont bloqué vena cava et veine portail principal conduisant à l’hypertension portail.
En revanche, nous avons maintenu la perfusion portail de 70% du foie; ils ont sacrifié les rats interopératoirement tandis que notre taux de survie d’une semaine est de 100%Les avantages de notre nouveau modèle chirurgical sont: que c’est techniquement difficile mais faisable;et qu’il est bien toléré comme démontré par le taux de survie de 100%.. Cependant une limitation est que le lobe médian gauche a soutenu l’ischémie due au blocage de la veine de portail. Les applications potentielles de notre technique incluent : qui est peut être employée pour le traitement partiel in vivo d’organe par perfusion avec des drogues ;in-vivo la décellularisation partielle d’organe comme résection chimique ;système de culture cellulaire in vivo par rapport à l’ex-vivo;et l’ingénierie hépatique in vivo.
