פרוטוקול זה מאפשר לחקור כיצד המצב הפנימי או האישיות של דג זברה משפיעים על תגובת האוריינטציה לרמזים המגיעים מהסביבה כגון זרמי מים או שדות מגנטיים. טכניקה זו משמשת כדי לבחון כיצד הן גורמים פנימיים רמזים סביבתיים להשפיע על אוריינטציה זברה. עם זאת, זה יכול להיות מיושם גם על מגוון רחב של עיצובים ניסיוניים.
שיטה זו יכולה לספק תובנה על אקולוגיה התנהגותית של מחקר ביולוגיה חיישן. והוא מינים גמישים ולכן הוא מתאים לכל חיה ימית ששוחה באופן פעיל. אנו ממליצים כי, עם ביצוע הניסויים, אתה מכיר את ההתנהגות של החיה אתה מתכוון להשתמש ועם איך למזער את הלחץ של בעלי חיים.
לבחירת אישיות בזברה-דג אוספים דגים בודדים באמצעות מקור של 250 מיליליטר ברשת כדי להעביר אותם למיכל העברה ולהעביר את הדגים לצד האפל של מיכל בחירת האישיות. לאחר שעה אחת של התאקלמות לפתוח את דלת ההזזה ולאפשר לאנשים שאתה יוצא מהחור לחקור את הצד החיובי של הטנק במשך 10 דקות. בתום תקופת המחקר אוספים בעדינות את הדגים בשתי מכולות מופרדות, אוספים את הדגים הפרואקטיביים מהצד החיובי ולאחר חמש דקות נוספות את הדגים תגובתיים מהתיבה הכהה.
כדי להקים שדה מגנטי עם מניפולציה חד מימדית של השדה המגנטי, השאר את המנהרה פתוחה והתדליק את יחידת הכוח והמגנטומטר. הנח בדיקה מגנטית המחוברת לגז טסלה מטר בתוך המנהרה ולאמת את המתח הדרוש כדי לקבל את ערך השדה המגנטי שנבחר לאורך הציר הראשי של המנהרה. לאחר מכן נתק את הגשוש וחבר את מנהרת הזרימה למנגנוני השחייה.
כדי להגדיר שדה מגנטי עם מניפולציה תלת מימדית של השדה המגנטי, הפעל את המחשב, ממיר דיגיטלי לאנלוגי בנהגי סליל והגדר את השדה המגנטי הנבחר על צירי x, y, z. לאחר מכן מניחים את המנהרה במרכז סט זוגות הלמהולץ. כאשר השדה המגנטי שהבחירה הזו הוקמה, בחר דג אחד עד חמישה לבדיקה הראו-טקית.
מעבירים את הדגים במנהרה, מגדירים את קצב הזרימה במנהרה ל-4.5 ליטר לדקה ומדליקים את המשאבה. הקפד לסגור את שסתום השקע לפני שתרגיש את המנהרה עם מים ולהעביר את הדגים ולפתוח אותו לפני הגדרת הרצפה נכון. לאחר שבעלי החיים התאקלמו שם במנהרת השחייה במשך שעה, התחילו להקליט את התנהגות הדגים בתוך המנהרה ולהתחיל את הצעד בחוכמה בהגדלת קצב הזרימה על פי פרוטוקול הניסוי הנבחר.
אותה מנהרת שחייה עם סליל הוסר, ניתן להציב במרכז סט זוגות הלמהולץ. בסוף הניסוי rheotaxis, לצלם דגים בודדים בתא מטרי אמורפי ולפתוח את התמונות בתמונה J.Note המין של החיה. דגי זברה זכרים הם דקים ונוטים להיות צהבהב, בעוד הנקבות מעוגלים יותר נוטים להיות בצבעים כחול ולבן.
לאחר מכן, לחץ על נתח והגדר קנה מידה. כדי להגדיר את קנה המידה של התמונה בסנטימרים, באמצעות קנה המידה של המצלמה כהפניה ועם הכלי קו מקולק שנבחר, צייר קו מקץ האף אל הפנטקל המפוקל כדי למדוד את האורך הסטנדרטי או את קצה הזנב באורך הכולל. לאחר מכן לחץ על נתח ולמדוד ולתרשם את האורך ליניארי של החיה בסנטימרים.
כדי לעקוב אחר פעילות הזברה-דג בתוך המנהרה, פתח את תוכנת ניתוח הווידאו והמידול המתאימה. לחץ על קובץ, ייבוא ווידאו ולפתוח את אחד הסרטונים ולחץ על מערכת קואורדינטות כדי להגדיר את יחידות האורך לס"מ ויחידות הזמן, בשניות. לחץ על לתאם צירים ולהגדיר את מערכת הייחוס כדי לעקוב אחר המיקום של הדג לאורך זמן עם ציר x לאורך המנהרה, הגדרת המקור בפינה הנמוכה של הקיר בשקע המים.
לחץ על עקוב אחר חדש בכיול כדי להגדיר את קנה המידה ולעקוב אחר חדש בנקודה למסה, כדי להתחיל לעקוב אחר דג אחד בכל פעם. התקדם את הווידאו באופן ידני במחצית השנייה, חמישה מרווחי מסגרת ולסמן את הזמן והמיקום של החיה בכל סיבוב במעלה הזרם במורד הזרם ובכל סיבוב במורד הזרם במעלה הזרם. בסוף כל הפעלת מעקב בחר את ערכי X ושעה מהטבלה.
לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני על הנתונים ולחץ על העתק נתונים בדיוק מלא. לאחר מכן שמרו את ערכי הזמן וערכי x של כל מיקומי המפנה בקובץ גיליון אלקטרוני של תבנית. כדי לחשב את הזמן הכולל במעלה ובמורד הזרם, כמו גם את הערכים של האינדקס הראו-טקי ואת האחוזים עבור כל שלב שלם.
בניסוי מייצג זה, לאחר תקופת התאקלמות של שעה במנהרה כפי שהוכח, סרטון אחד בכל פעם הוקלט בזמן ששחה במנהרה בזרם המים הואץ עם עלייה צעדית בקצב הזרימה לשבעה שלבים. במהלך ניסויים אלה, השדה המגנטי נשלט בממד אחד. במהלך הזמן במעקב, התנאים של כל דג בכל קצב זרימה הודגשו וישמשו כנקודות התייחסות לחישוב המדד הראוטקי של כל דג בכל מהירות מלאה.
כאשר המדד הראו-טקי גבוה מ-50% ומצביע על כך שלבעל החיים הייתה תגובה ראוטקטית חיובית התואמת לשכיחות של שחייה במעלה הזרם, מדד ראוטקטי לא שונה באופן משמעותי מ-50% מצביע על היעדר תגובה ראוקטית. טרנספורמציה סימן קשת של ערכי אחוז מדד rheotactic הממוצע של כל חמשת הדגים בניסוי זה הראה עלייה סיגמואידית בערך המדד rheotactic כאשר מהירות המים עולה, המאפשר כימות של rheotaxis זברה באמצעות שיטה מתמטית פשוטה. מתוך עקומות אלה, ניתן לראות כי תחת שדות מגנטיים בכיוונים שונים, התגובה הראוקטית של דגים פרואקטיביים אינה מושפעת והתגובה של שתי קבוצות הניסוי מיוצגת על ידי אותה עקומה.
מצד שני, דגים תגובתיים משנים את האוריינטציה הראוקטית בהתאם לשדה המגנטי והתגובה מיוצגת על ידי עקומות שונות באופן משמעותי. זכור כי זהו ניסוי התנהגותי והתנהגות הדגים יכולה להיות מושפעת מלחץ. טיפול והעברת דגים יכול להיות מסובך.
אז, לאמן את עצמך לפני הניסויים. טכניקה מגנטית ריאוטית זו אפשרה לנו לחקור עוד יותר את השפעות האישיות על הרגישות המגנטית של דגי הזברה ועל בעלי החוליות הימיים האחרים חסרי החוליות.
