המנגנון שבבסיס CRPS I עדיין לא ברור. הקמת מודל בעלי חיים פרה-קליני המחקה את CRPS I תהיה חיונית לחקר המנגנונים שבבסיס CRPS I.The מודל ה- CPIP של החולדה מציג CRPS רבים שאני אוהב פשטות, הכוללים בצקת אחורית והיפרמיה בשלב המוקדם. לאחר הקמת המודל, ואחריו רגישות תרמית ומכנית מתמשכת.
התחל על ידי הרדמה כל החולדות עם נתרן פנוברביטל. ודא כי החולדות הם הרדמה כראוי על ידי צביטת כף הרגל האחורית שלהם או זנב עם מדפים. ומקום משחה וטרינרית על העיניים.
שמור את החולדה על כרית מחוממת 37 מעלות צלזיוס במהלך ההליך. לשמן את הכף האחורית הימנית ואת הקרסול עם גליצרול. ואז להחליק טבעת ניטריל 70 durometer O לתוך הצד הגדול יותר של צינור נקודה אחת חמישה מיליליטר עם כובע הצמד מנותק.
מכניסים בזהירות את הכף האחורית לתוך הצינור החלול עד שהוא מגיע לתחתית. החלק בהדרגה את טבעת O מהצינור אל הישנב הימני ליד מפרק הקרסול. ולהשאיר אותו שם במשך שלוש שעות.
החל את אותו טיפול על קבוצה מזויפת של חולדות, למעט עם טבעת O שבורה כי לא צריך לגרום איסקימיה. לאחר שלוש שעות, נתק את טבעת ה-O ונטר את החולדה עד שהיא תחזור להכרה מספקת כדי לשמור על שליטה בעצם החזה. אין למקם את החולדה בחברה של חולדות אחרות עד שהיא תתאושש לחלוטין מהרדמה.
מניחים את החולדה בתא פרספקס שקוף על רצפת רשת, ומתרגלים את החולדה לסביבה במשך 30 דקות לפני כל בדיקה התנהגותית. השתמש 2 פריי תריסים כדי לבדוק את החולדה עבור allodynia מכני. התחל את הבדיקה מן התסיסה האמצעית על ידי החלתו אנכית על פני השטח plantar באמצע של הכף האחורית.
החל כוח מתאים לכופף את התסיסה עד חמש שניות. נסיגה פתאומית של הכף נחשבת להתנהגות נוציפציבית. לנהל את בדיקת allodynia מכני בימים שלוש, שתיים, אחת, וכל יום אחר עד היום 13.
החל את שיטת הבדיקה למעלה למטה כדי לבדוק את הסף ואת שיטת דיקסון לחישוב סף הנסיגה 50 אחוז כפות רגליים. כדי לבדוק היפראלג'יה תרמית, השתמש בשיטת hargreaves על ידי כיוון ישיר של קרן האור הנפלטת מנורה של 50 וואט לכפות הרגליים האחוריות. למדוד את השהיית נסיגת הכף, הגדרת 20 שניות כמו סף ניתוק כדי למנוע פציעה מוגזמת.
חזור על כל מבחן שלוש פעמים במרווחים של חמש דקות עבור כל כפה אחורית, וקח את הממוצע כמו השהיית נסיגת הכפות. לנהל את בדיקת hyperalgesia תרמית בימים שלוש, שתיים, אחת, וכל יום אחר עד היום 13. כדי לבדוק את קפסאיצין המושרה התנהגות nocifensive חריפה, להכין את פתרון מלאי קפסאיצין 200 מילימולרית עם DMSO, ולדלל אותו עוד יותר אחד עד 1, 000 ב PBS להזרקה.
קפסאיצין הוא בריאגנט, אשר יכול לגרום לגירוי במפרקים לעור, לעיניים ולנשימה. חשוב ללבוש מסכה ומנוע בעת הכנת פתרון קפסאיצין. ואז להזריק 50 microliters של קפסאיצין או רכב לתוך הכף האחורית באמצעות מחט מד 30 מחובר מזרק מיליליטר אחד.
הקלט התנהגות nocifensive, כגון ליקוק, ננשך, או נרתע של הכף מוזרק באמצעות מצלמת וידאו במשך 10 דקות לאחר הזריקה. להעריך בצקת כף יד אחורית על ידי מדידת הגידול בקוטר הכפות ב 15 דקות, 24 שעות, 48 שעות, ו 72 שעות לאחר הקמת מודל. לאחר הנחת טבעת O על הקרסול, עור הכף האחורי ipsilateral הראה כיחלון, אינדיקציה של היפוקסיה רקמות.
לאחר חיתוך טבעת O, הכף החלה להתמלא בדם והראתה נפיחות חזקה, מה שמצביע על היפרמיה אינטנסיבית. הנפיחות פחתה בהדרגה וחזרה לשגרה 48 שעות לאחר ההליך. יום אחד לאחר הקמת המודל, הכף האחורית של קבוצת CPIP הציגה אלודיניה מכנית ברורה שנמשכה 13 ימים של מסגרת זמן התצפית.
הכף האחורית ההפוכית של קבוצת CPIP הציגה גם היפראלגזיה מכנית במשך 13 ימים. כאשר hyperalgesia תרמית נמדדה, כפות אחוריות דו-צדדיות של חולדות CPIP הפגינו השהיית נסיגה מופחתת באופן משמעותי בתגובה לגירויים תרמיים מזיקים, בהשוואה לחולדות הקבוצה המזויפות. ההיפר-אל-ג'יסיה התרמית של הכף האחורית של שבסילת Ipsilateral נמשכה עד סוף מסגרת זמן התצפית, ואילו ההיפר-אל-ג'סיה התרמית של הכף האחורית ההפוכות נמשכה שבעה ימים.
קבוצות sham ו- CPIP נבדקו להתנהגות nocifensive עם הזרקת קפסאיצין. כאשר הוזרק רכב, הקבוצה המזויפת הראתה תגובה לא חיובית קלה והקבוצה של CPIP הראתה תגובה גבוהה משמעותית. חשוב מכך, חולדות מדד המחירים לצרכן הראו תגובות גבוהות משמעותית להזרקת קפסאיצין מאשר הקבוצה המזויף, מה שמרמז כי חולדות CPIP להפגין תופעה דומה לחולים אנושיים עם CRPS I.By הליך זה, החולדות הם הרדמה לפני ובמהלך הקמת מודל.
מודל החולדות של CPIP המתואר בפרוטוקול זה שנקבע על ידי ארגון קשה ו- CRPS אנושי אני אוהב פשטות. משפחות של מודלים אלה, מנגנון נוסף על CRPS אני ניתן לחקור.
