פרוטוקול זה מתאר שיטה לא פולשנית לגרימת כאבי גב כרוניים בעכברים למשך עד 10 שבועות, אשר ניתן לבצע במהירות ובאמינות עם אימון מינימלי. ההיבט הקשה ביותר של טכניקה זו הוא לזהות כיצד מרגיש הזרקת רצועה לעומת הזרקת שריר. תחושת התנגדות במגע מעידה על הזרקת רצועות.
היעדר התנגדות פירושו שהמחט יכולה להיות בשריר או בחלל הבטן. כדי להתחיל, קח משטח שטוח סטרילי כדי למקם את העכבר. לאחר מכן, הניחו עמדת התאוששות של כרית חימום ליד מערך הניתוח כדי להעביר עכברים מיד לאחר ההזרקה.
לאחר מכן, להכין את urokinase מזרק המילטון. צייר את התמיסה מראש כדי למזער את הזמן שהעכבר מבלה תחת הרדמה. לאחר הרדמת העכבר, השתמש בשתי אצבעות כדי לאתר את מקטעי עמוד השדרה המותני ב- L2 ו- L3 מתחת לכלוב הצלעות ולאמת את אתר ההזרקה.
הניחו את קצה מזרק המילטון ליד עמוד השדרה. מקמו את המזרק בזווית של כ-45 מעלות לתוך הרצועה הצמודה לעצם. הכנס את קצה המחט בעדינות, אך בחוזקה, לתוך הרצועה, והזריק לאט עד שכל חמשת המיקרוליטרים הוזרקו.
הסר את המחט בעדינות ולאט. לאחר מכן, הניחו את העכבר בתחנת החזרת החום עד שהוא יתעורר ויהפוך לנייד. בדוק את העכברים במשך שעה לאחר הניתוח כדי להבטיח שכל התפקוד המוטורי הרגיל נמשך.
לאחר הניתוח, בדוק את המשקל ואת מקום ההזרקה של העכברים מדי יום במשך שבוע כדי למנוע זיהום או סיבוכים. לפני הבדיקה, העבירו כל בעל חיים לתא נפרד ושקוף על שולחן הבדיקה עם משטח עליון. לאחר מכן, עוררו את כרית כף הרגל עם חוט הלהט של פון פריי 3.61 שמעורר ארבעה גרם של כוח.
נסיגה ברגל של שלושה עד חמישה גירויים נחשבת לתגובה חיובית. כעת, יש למרוח את חוט הלהט החלש הבא בסדרה עד שהחיה תפסיק להגיב לגירוי המכני. השתמש בחוט הלהט הגבוה יותר עד לקבלת תגובה, ולאחר מכן חזור לחוט הלהט התחתון.
באמצעות אלגוריתם התאמת עקומות, חשב את סף המשיכה המכני, שהוא כמות הכוח המינימלית הדרושה כדי לעורר תגובה 50% מהזמן. כדי לבצע את מבחן Hargreaves, הניחו את העכברים בתאים על משטח זכוכית שחומם מלמטה על ידי פולט אינפרא אדום. מדוד את הזמן מהפעלת גירוי אור אינפרא אדום על כפו האחורית של העכבר ועד לנסיגה כהשהיית כף הרגל.
עבור מבחן הצלחת הקרה, הניחו את העכברים על מכשיר הצלחת הקרה מקורר למינוס תשע מעלות צלזיוס. רשום את הזמן שלוקח לעכבר להרים את רגלו לאחר שהונח על המכשיר כזמן ההשהיה למשוך את כף הרגל. כדי לבצע את מבחן החרדה, מקם כל בעל חיים בתיבת בדיקת העדפות המקום עם מעבר בין שני תאים.
תא מכשיר אחד צריך להיות מואר בהיר, בעוד הצד הנגדי צריך להישאר חשוך. באמצעות מחשב, עקוב אחר זמני התפוסה והמעברים של האור והחושך של בעל החיים במהלך בדיקה של 10 דקות. לאחר מכן, הניחו את המכרסמים לדוגמה או בעלי חיים תמימים על מבוך האפס, או השתמשו במבחן העדפת המקום הדו-תאי בהיר או כהה.
הערך את הזמן המושקע באזורים סגורים ופתוחים של המבוך באמצעות סטופר. עבור בדיקת דיכאון התזה סוכרוז, רססו תמיסת סוכרוז של 10% עד 30% על הקוד הגבי והניחו את התדירות, משך הזמן וההשהיה של הטיפוח למשך 10 דקות. כדי לבצע בדיקות עצמים חדשניות, יש להרגיל עכברים בנפרד לכלוב פלסטיק שקוף עם ראש פתוח למשך שעה.
הוסיפו שתי דמויות צעצוע זהות לפינות נגדיות של הכלוב למשך חמש דקות. התאקלמו את בעלי החיים ביום הניסוי למשך שעה, והניחו את שתי הדמויות הקטנות הזהות באותן תנוחות של הכלוב למשך חמש דקות לפני החזרתן לכלוב הביתי. לאחר מכן, החלף את אחת הדמויות המקוריות בחפץ חדשני שונה במובהק.
לאחר ארבע שעות, החזירו את העכברים לכלוב הבדיקה ותיעדו את הזמן שהוקדש לחקר החפצים. להערכת תפקוד מוטורי, בנו מנהרה מצינור מגבת נייר החתוך לאורכו בקצה אחד. יש לפתוח את המנהרה על פיסת נייר מדפסת נקייה.
החזיקו את העכברים בעדינות עד שהם רגועים. מרחו דיו הודי לא רעיל על כפות העכברים על ידי הכנסתן לבאר דיו, כרית חותמות או שימוש בצמר גפן. שחררו את העכברים בפתח המנהרה.
לאפשר להם לרוץ דרך המנהרה וללכוד אותם בסוף. הניקוד הדפסות כפות בהתבסס על אורך הצעד, רוחב הצעד ופריסת הבהונות. בדיקות רגישות יתר מכניות ותרמיות הראו כי עכברי כאבי גב כרוניים הגדילו באופן משמעותי את הרגישות המכאנית, החום והקור בהשוואה לבקרות הנאיביות.
ניתוח חרדה הראה כי הזמן הכולל שבילה בחדר האור של הקופסה המוארת והחשוכה ומספר אירועי הגידול היו נמוכים משמעותית בעכברים עם כאבי גב כרוניים, מה שמצביע על חרדה. במהלך מבחן Sucrose Splash, עכברים עם כאבי גב כרוניים הציגו זמן טיפוח נמוך יותר ואת מספר הטיפוח. עם זאת, משך הזמן לפני תחילת הטיפוח גדל באופן משמעותי.
אורך הצעד בין עכברים עם כאבי גב כרוניים לעכברים תמימים היה שונה באופן משמעותי. הדבר החשוב ביותר שיש לזכור בעת ניסיון הליך זה הוא שאתה מכוון לרצועות סביב עמוד השדרה, לא לשריר. מודל כאבי הגב הכרוניים מספק כלי אמין להערכת מגוון מחקרים חדשניים, פרמקולוגיים וטיפולים פוטנציאליים אחרים.
