הפרוטוקול שלנו מספק מודל רלוונטי קל, חסכוני, ניתן לשחזור וקליני לחוקרים בתחום ההיפרפלזיה האנטימלית הוורירית. הפרוטוקול שלנו מאוזן כלכלית, קלינית וטכנית. לכן, מומלץ מאוד עבור חוקרים שרוצים ליישם את התוצאות במבחנה שלהם על הגדרת in vivo.
אנו מאמינים כי ניתן ליישם את הפרוטוקול שלנו על מודל גדול יותר של בעלי חיים לפיתוח אסטרטגיות טיפול חדשות בלב איסכמי ומחלות גפיים נמוכות יותר. הפרוטוקול שלנו רלוונטי בעיקר לתחום ניתוחי הלב וכלי הדם. עם זאת, זה עשוי לשמש גם כדי לטפל בשינויים ניווניים פיסטולות arteriovenous בחולים עם מחלת כליות בשלב הסופי.
לאחר הרדמה מקומית, ניהול משכך כאבים אנטיביוטי מניעתי, לחטא את האתר הכירורגי עם 10%povidone-יוד. ולעשות חתך של 50 עד 60 מילימטר עם אזמל כירורגי באזור צוואר הרחם של הארנב הלבן היפני המותר. לנתח בבוטות את הרקמות התת עוריות ואת fascia לחשוף קטע 20 עד 30 מילימטר של וריד הצוואר.
ולהשתמש 4-0 תפרים משי כדי ligate כל הענפים של וריד חשוף. מניחים תפר משי 2-0 סביב הוורידים הצוואריים הפנימיים וחיצוניים ולעשות חתך מילימטר אחד בקיר הווריד של הצד הדיסטלי של הווריד. הכנס קטטר בלון 2 צרפתי מן החתך לכיוון הצד הפרוקסימלי של וריד.
ו ligate תפר משי 2-0 באתרים דיסטליים של ורידים הצוואר. לנפח את הבלון עם 200 microliters של אוויר. ולהשתמש בבלון כדי denude את האטימה של וריד שלוש פעמים עבור פילינג אנדותל.
לאחר המעבר השלישי, ligate הקצה הפרוקסימלי של וריד לחתוך את וריד באתר דיסטל. לאחר מכן הכנס קטטר תוך וריד 20 מד לתוך הווריד שנקטף מן הדיסטל לכיוון proximal, לחתוך את הווריד באתר proximal. כדי לחבל את העורק הראשי עם וריד הצוואר הקציר, לחשוף קטע 20 עד 30 מילימטר של עורק התולדות ipsilateral.
ולהפריד את העורק בזהירות מן הוריד והעצב הסמוכים. Ligate כל הענפים של וריד חשוף עם תפר משי 4-0. ולנהל דרך הווריד 200 יחידות בינלאומיות לקילוגרם של נתרן הפרין.
מהדקים את הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים של העורק עם מהדקי גומי כירורגיים. וחותכים את העורק בין המהדקים. להזריק מלוחים רגילים לתוך העורק הראשי חרוט proximally ו distally כדי להניף את העורק.
ולמקום את וריד הקציר ליד העורק כדי anastomose הכלי בצורה הפוכה מקצה לקצה. כדי anastomose הקצה הפרוקסימלי של וריד לקצה הדיסטלי של העורק, מניחים שני תפרים עוגן של 8-0 פוליפרופילן באתר ובאתר הנגדי. הוסף תפרים בצד העליון של קו האנטומיה בין תפרי העוגן.
הפוך את העורק ואת שתל וריד במהופך. ולהוסיף תפרים על החלק הנותר של קו האנטומיה. לאחר מכן, להסיר את קטטר תוך וריד מן הווריד ומהדק את שתל הווריד proximally.
תדהים את העורק הראשי בצורה חדה. ותבוננו אם שתל הווריד מתרחב בהדרגה. שימוש ב- 8-0 פוליפרופילן קטע תפרים, anastomose הקצה הדיסטלי של וריד לקצה הפרוקסימלי של העורק.
ולפענח את העורק כדי לבדוק אם יש דימום מאתרי האנטומיה. לבסוף, ligate העורק הראשי הפנימי עם תפר משי 4-0 כדי לדמות מצב נגר עניים כדי להקל על היפרפלזיה intimal. ואז לנקות את הפצע עם מלוחים.
סגור את החתך עם 3-0 פוליגלקטין 910 בשכבות. ולאפשר לארנב להחלים לחלוטין עם ניטור לפני החזרת החיה לכלוב הבית שלה. בתמונה מייצגת זו, היפרפלזיה אטימלית מוצלחת ב 2 שבועות לאחר ניתוח אינטרפוזיציה הווריד ניתן לראות.
כאן, ניתן לראות את ההשפעות הטיפוליות של מיקרו-רנ"א-145 פולין טעון (חומצה לקטית-שיתוף-גליקולית) על המורפולוגיה ההיפרפלזיה האטימלית. ואכן, טיפול במיקרו-רנים עמוסים בננו-חלקיקים פולי(חומצה לקטית-שיתוף-גליקולית) גורם להכרתה משמעותית של היפרפלזיה אינטית. בנוסף, immunostaining עבור Ki-67, סמן התפשטות התא, מגלה פחות תאים חיוביים Ki-67 בתוך הקבוצה microRNA-145 מטופלים המציין שינוי פנוטיפ בתאי שריר חלק כלי הדם מן המצב שגשוג לא בוגר למצב התכווצות בוגרת.
המטרה העיקרית של הפרוטוקול שלנו היא להשיג patency של השתל המושתל. חשוב גם לאשר כי השתל מתרחב לאחר declamping העורק הראשי.
