Наш протокол обеспечивает легкую, экономически эффективную, воспроизводимую и клиническую соответствующую модель для исследователей в области венозной интимальной гиперплазии. Наш протокол экономически, клинически и технически сбалансирован. Таким образом, настоятельно рекомендуется для исследователей, которые хотят применить свои результаты in vitro к настройке in vivo.
Мы считаем, что наш протокол может быть применен к более крупной модели животных для разработки новых стратегий лечения ишемических заболеваний сердца и нижних конечностей. Наш протокол в основном актуален для области сердечно-сосудистой хирургии. Тем не менее, он также может быть использован для решения дегенеративных изменений в артериовенозных свищах у пациентов с почечной болезнью конца стадии.
После местной анестезии и профилактического антибиотика обезболивающее применение, дезинфицировать хирургическое отделение с 10%povidone-йодом. И сделать разрез от 50 до 60 миллиметров с хирургическим скальпелем в шейном отделе обезболивающего самца японского белого кролика. Тупо вскрыть подкожные ткани и фасции подвергать от 20 до 30 миллиметров сегмента яремной вены.
И использовать 4-0 шелковых швов, чтобы ligate все ветви открытой вены. Поместите 2-0 шелковый шов вокруг внутренних и внешних яремных вен и сделать один миллиметр разрез в венозной стенке дистальной стороны вены. Вставьте 2-французский воздушный шар катетер от разреза к проксимальной стороне вены.
И ligate 2-0 шелковый шов на дистальных участках яремных вен. Надуть воздушный шар с 200 микролитров воздуха. И использовать воздушный шар, чтобы денудирование инима вены три раза для эндотелиального пилинга.
После третьего прохода, ligate проксимальный конец вены и вырезать вену на дистальной сайте. Затем вставьте 20 калибровочный внутривенный катетер в собранную вену от дистального до проксимального направления, и вырежьте вену в проксимальной участке. Чтобы вмешаться в сонную артерию с яремной вены урожая, подвергать от 20 до 30 миллиметров сегмента ипсилатеральной сонной артерии.
И отделить артерию тщательно от близлежащих вены и нерва. Ligate все ветви открытой вены с 4-0 шелковый шов. И внутривенно вводят 200 международных единиц на килограмм гепарина натрия.
Зажим проксимальных и дистальных концов артерии с хирургическими резиновыми зажимами. И перережьте артерию между зажимами. Вводить нормальный солевой раствор в проксимально и дистально протянутую артерию.
И поместите вены урожая вблизи артерии, чтобы анатомозы сосуда в обратном конце до конца моды. Для анатомозы проксимального конца вены к дистальной части артерии, поместите два якорных стежка 8-0 полипропилена на участке и противоположном участке. Добавить стежки верхней стороне линии анатомоза между якорными стежками.
Переверните артерию и трансплантат вены вверх дном. И добавить стежки на оставшейся части линии анатомоза. Затем удалите внутривенный катетер из вены и зажимаем пересадку вены проксимально.
Деклампс сонной артерии distally. И наблюдать ли вены трансплантата расширяется постепенно. Использование 8-0 полипропилен прервал швы, анастомозу дистального конца вены до проксимального конца артерии.
И декламы артерии, чтобы проверить на кровотечение из анастомоза сайтов. Наконец, ligate внутренней сонной артерии с 4-0 шелковый шов для имитации плохого состояния стока и для облегчения интимальной гиперплазии. Затем очистите рану солевым раствором.
Закройте разрез 3-0 полиглактином 910 слоями. И позволить кролику полностью восстановиться с мониторингом, прежде чем вернуть животное в свою домашнюю клетку. В этом репрезентативном изображении, успешная интимальная гиперплазия через 2 недели после венозной хирургии интерпозиции можно наблюдать.
Здесь можно наблюдать терапевтическое воздействие микроРНК-145 загруженных поли (молочно-когликоловой кислоты) на наночастицы на морфологию интимальной гиперплазии. Действительно, лечение микроРНК, загруженных поли (молочно-когликолевой кислотой)наночастицами, приводит к значительному затуханию интимальной гиперплазии. Кроме того, иммуностепенирование для Ki-67, маркера пролиферации клеток, показывает меньше Ki-67-положительных клеток в группе микроРНК-145, указывающей на изменение фенотипа в сосудистых гладких мышечных клетках от незрелого пролиферативного состояния до зрелого контрактильного состояния.
Основной целью нашего протокола является достижение проходимости имплантированного трансплантата. Важно также подтвердить, что трансплантат расширяется после деклампсирования сонной артерии.