Notre protocole fournit un modèle facile, rentable, reproductible et clinique pertinent pour les chercheurs dans le domaine de l’hyperplasie intimal veineuse. Notre protocole est économiquement, cliniquement et techniquement équilibré. Par conséquent, il est fortement recommandé pour les chercheurs qui veulent appliquer leurs résultats in vitro à un paramètre in vivo.
Nous croyons que notre protocole peut être appliqué à un modèle animal plus large pour le développement de nouvelles stratégies de traitement dans les maladies du cœur ischémique et des extrémités inférieures. Notre protocole est principalement pertinent dans le domaine de la chirurgie cardiovasculaire. Cependant, il peut également être employé pour adresser des changements dégénératifs dans les fistules artérioveineuses dans les patients présentant la maladie rénale de phase finale.
Après l’anesthésie locale, et l’administration analgésique antibiotique prophylactique, désinfectez le site chirurgical avec 10% povidone-iode. Et faire une incision de 50 à 60 millimètres avec un scalpel chirurgical dans la région cervicale du lapin blanc japonais mâle anesthésié. Disséquer brutalement les tissus sous-cutanés et le fascia pour exposer un segment de 20 à 30 millimètres de la veine jugulaire.
Et utilisez des sutures de soie 4-0 pour ligate toutes les branches de la veine exposée. Placez une suture de soie 2-0 autour des veines jugulaires internes et externes et faites une incision d’un millimètre dans la paroi veineuse du côté distal de la veine. Insérez un cathéter Français ballon de 2 Français de la coupe vers le côté proximal de la veine.
Et ligate la suture de soie 2-0 aux sites distal des veines jugulaires. Gonflez le ballon avec 200 microlitres d’air. Et utilisez le ballon pour denude l’intima de la veine trois fois pour l’exfoliation endothéliale.
Après le troisième passage, ligate l’extrémité proximale de la veine et couper la veine au site distal. Insérez ensuite un cathéter intraveineux de calibre 20 dans la veine récoltée du distal à la direction proximale, et coupez la veine au site proximal. Pour interposer l’artère carotide avec la veine jugulaire de récolte, exposez un segment de 20 à 30 millimètres de l’artère carotide ipsilateral.
Et séparez soigneusement l’artère de la veine et du nerf voisins. Ligate toutes les branches de la veine exposée avec suture de soie 4-0. Et administrer par voie intraveineuse 200 unités internationales par kilogramme d’héparine de sodium.
Serrez les extrémités proximales et distales de l’artère avec des pinces en caoutchouc chirurgicales. Et couper l’artère entre les pinces. Injecter de la solution saline normale dans l’artère carotide incisée de façon proximale et distally pour distendance de l’artère.
Et placez la veine de récolte près de l’artère pour anastomoser le navire d’une manière inversée de bout en bout. Pour anastomoser l’extrémité proximale de la veine jusqu’à l’extrémité distale de l’artère, placez deux points d’ancrage de 8-0 polypropylène sur le site et le site opposé. Ajouter les points du côté supérieur de la ligne d’anastomose entre les points d’ancrage.
Retournez l’artère et la greffe de veine à l’envers. Et ajouter des points sur la partie restante de la ligne d’anastomose. Ensuite, retirez le cathéter intraveineux de la veine et serrez la greffe veineuse de façon proximale.
Dégriffer l’artère carotide distally. Et observez si la greffe veineuse se dilate progressivement. Utilisation 8-0 polypropylène interrompu sutures, anastomose l’extrémité distale de la veine à l’extrémité proximale de l’artère.
Et dégriffer l’artère pour vérifier les saignements des sites d’anastomose. Enfin, ligate l’artère carotide interne avec une suture de soie 4-0 pour simuler un mauvais état de ruissellement et pour faciliter l’hyperplasie intimale. Ensuite, nettoyez la plaie avec de la solution saline.
Fermer l’incision avec 3-0 polyglactine 910 en couches. Et permettre au lapin de récupérer complètement avec surveillance avant de retourner l’animal dans sa cage d’origine. Dans cette image représentative, une hyperplasie intimal réussie à 2 semaines après chirurgie veineuse d’interposition peut être observée.
Ici, les effets thérapeutiques des nanoparticules poly(acide lactique-co-glycolique) chargées de microARN-145 sur la morphologie intimale d’hyperplasie peuvent être observés. En effet, le traitement par microARN chargés de nanoparticules poly(acide lactique-co-glycolique) entraîne une atténuation significative de l’hyperplasie intimale. En outre, l’immunostaining pour Ki-67, un marqueur prolifératif de cellules, révèle moins de cellules Ki-67-positives dans le groupe traité de microARN-145 indiquant un changement de phénotype dans les cellules vasculaires lisses de muscle de l’état prolifératif immature à l’état contractile mûr.
L’objectif principal de notre protocole est d’atteindre la patency de la greffe implantée. Il est également important de confirmer que la greffe se dilate après avoir dégriffé l’artère carotide.
