שיטה זעיר פולשנית להחדרת תרופות תוך-רחמיות במכרסמים יילודים לטיפול במחלות ריאה

פרוטוקול זה מדגים כי ניתן להחדיר חומר מחקרי לקנה הנשימה של גורי חולדות יילודים, בני חמישה ימים, על ידי הדמיה ישירה. שיטה זו משפרת את האמינות של מתן חומר מחקר או תרופה לתוך קנה הנשימה על ידי הדמיה ישירה. על ידי הימנעות מהזרקה לקנה הנשימה, שיטה זו מפחיתה את הכאב, וחשוב מכך, דימום לקנה הנשימה, ומאפשרת הישרדות משופרת.

פיתוח מיומנויות עדינות נדרש כדי לבצע פרוטוקול זה, כולל מיקום מתאים של החיה, שימוש נכון באוטוסקופ הפעלה כדי לדמיין את מיתרי הקול, ויעילות מתן לריאות. מי שידגימו את ההליך יהיו טארה סודהאדווי, פוסט-דוקטורנטית מהמעבדה שלי, ואליסון הא, סטודנטית לתואר שני. לפני תחילת הניסוי, אשרו את אובדן רפלקס הזנב והדוושה בגור חולדה מורדם בן חמישה ימים והשתמשו בסרט סימון מעבדה כדי לרסן את הגור במצב שכיבה על פלטפורמה שטוחה הנוטה ל-45 מעלות.

השתמש במלקחיים קהים כדי למשוך בעדינות את הלשון לצד אחד, ובעזרת ספקולום אוטוסקופ בקוטר שני מילימטרים, החזק בעדינות את הלשון במקומה כך שהגרון נראה לעין. באמצעות אוטוסקופ ההפעלה עם הספקולום בגודל הנכון, אתר את מיתרי הקול דרך העדשה המגדלת של האוטוסקופ. להחדרה תוך-תאית, טענו מזרק של מיליליטר אחד המצויד בקצה פיפטה בעל זווית ארוכה וטעינת ג'ל עם 0.9 סנטימטרים מעוקבים של אוויר, ואחריו 30 עד 50 מיקרוליטרים של חומר העניין.

כופפו את קצה הפיפטה לזווית של 30 מעלות והכניסו את קצה הפיפטה הטעון דרך הספקולום לכ-2 מילימטרים מעבר למיתרי הקול. לדחוף את הבוכנה של המזרק כדי לתת את החומר המעניין ואת האוויר דרך הספקולום לתוך מיתרי הקול. לאחר שכל החומר נמסר, הניחו את הגור על כרית חימום נוזלים משולבת של 38 מעלות צלזיוס עם ניטור עד לנשימה סדירה, לפני שתאחדו מחדש את הגור עם הסכר.

כדי להעריך את התפלגות החומר בתוך דגימת רקמת ריאה, נגבו את החזה והבטן של גורי החולדה המתים עם 70% אלכוהול אתיל והשתמשו בטכניקה סטרילית כדי להסיר את הריאות על פי פרוטוקולים סטנדרטיים להערכת הראייה שלהם. במחקר זה, היעילות של טכניקת ההחדרה התוך-קנה הנשימה הוערכה על ידי בדיקה חזותית של רקמת הריאה שנאספה מגור חולדה בן חמישה ימים שהוחדר לצבע כחול של אוונס. ההחדרה הייתה יעילה בכמעט 100%, שכן הצבע התפשט לריאה מיד עם מתן התרופה והתפזר על פני כל האונות של רקמת הריאה.

הצבע לא נצפה בתוך רקמות כלשהן מחוץ לריאות, מה שאישר את יכולתה של הטכניקה לשמש להעברה סלקטיבית של טיפול בעל עניין לריאות. הצבת החיה בתחילה בזווית הנכונה על פני משטח יציב חיונית להצלחת השלב הבא של הדמיית מיתרי הקול באמצעות אוטוסקופ ההפעלה.