כאן, פרוטוקול לסינתזה מורחבת של ביניים של upatinib, ACT051-3, מוצג. שיטה זו פשוטה לתפעול, זולה וידידותית לסביבה. כדי להתחיל, להכין ACT051-2 על ידי המסת 50 גרם של התרכובת 2-bromo-5-tosyl-5H-pyrrolo[2, 3-b]pyrazine ב 15 מיליליטר של N, N-dimethylformamide, או DMF בבקבוק תחתית עגולה.
הוסף 65.3 גרם של diisopropylethylamine לתמיסת התגובה תחת הגנת חנקן, ומקרר את הטמפרטורה ל 0 עד 5 מעלות צלזיוס באמצעות אמבט מים קרים. הוסיפו 60.2 גרם של פארא-טולואן סולפוניל כלוריד, או TsCL, מומס ב-12 מיליליטר DMF, והעלו את הטמפרטורה ל-20 עד 30 מעלות צלזיוס דרך אמבט המים החמים. מערבבים כשעה.
מוסיפים 600 מיליליטר מים קרים לתערובת, ומערבבים עוד שעה. מסננים את המוצר תחת ואקום באמצעות משפך זכוכית עם קרש שיוף מרופד בנייר פילטר. לשטוף עם 200 מיליליטר מים מספר פעמים, ולייבש, באמצעות תנור ייבוש תרמוסטטי חשמלי כדי לקבל מוצק צהוב בהיר ACT051-2 עם תפוקה של 78%לסינתזה של ACT051-3, להמיס 176.11 גרם של ACT051-2 ב 366.31 גרם של 1, 4-דיוקסן בצלוחית בעלת שלוש יציאות עגולות תחתונות, ולהוסיף 65.75 גרם של טרט-בוטיל קרבמט, 138.21 גרם אשלגן פחמתי גרגירי, 11.57 גרם קסנטפוס ו-2.25 גרם פלדיום אצטט לתמיסה.
מחממים את התערובת ל-105 מעלות וערבוב במשך 7 שעות תחת אטמוספירת חנקן. לאחר קירור התערובת לטמפרטורת החדר, מסננים את המוצר בעזרת משפך בוכנר. לשטוף את שאריות המסנן עם 200 מיליליטר של אתיל אצטט.
השתמש במשאבת ואקום מים במחזור כדי לרכז את המוצר בלחץ מופחת ב 50 עד 60 מעלות צלזיוס, עם ערך לחץ של מינוס 0.095 מגה פסקל. שמור על המשאבה פועלת כדי לשמור על הלחץ ולקבל שמן חום כהה. לטהר את המוצר הגולמי עם כרומטוגרפיית עמודות, תוך פליטה עם אתר נפט ואתיל אצטט כדי לקבל את תרכובת המטרה כמוצק לבן עם תפוקה של 93.5% לסינתזה הפיילוטית של ACT051-2, הוסף קילוגרם אחד של 5.05 ACT051-1 טוחנת ו- 1.305 ק"ג של DIPEA טוחנת 10.1 לצלוחית בעלת ארבע יציאות בעלות תחתית עגולה.
מוסיפים 3 ליטר DMF לצלוחית, וממיסים את המוצק. מחממים את תערובת התגובה ל-35 מעלות צלזיוס. מוסיפים 1.203 ק"ג של 6.31 TsCL טוחנת לתמיסת התגובה ומערבבים במשך שעה.
מערבבים את התערובת עד להשלמת התגובה מאושרת על ידי כרומטוגרפיה בשכבה דקה, או TLC, ו- HPLC. יוצקים פנימה 8.4 ליטר מים קרים, ומערבבים עוד חצי שעה. מסננים את כל הנוזלים בעזרת משפך Buchner, ושוטפים את המוצר הגולמי ב-600 מיליליטר מים.
יבש את המוצר שהתקבל ב 70 מעלות צלזיוס לילה באמצעות תנור ציור תרמוסטטי חשמלי, ולקבל מוצר עם תפוקה של 94.9% לסינתזה בקנה מידה פיילוט של ACT051-3, להוסיף 3.31 ליטר אלכוהול טרט-עמיל ו 4.97 ליטר טולואן לקומקום התגובה, ולאחר מכן להוסיף 1.66 ק"ג של ACT051-2, 0.83 ק"ג של טרט-בוטיל קרבמט, 1.301 ק"ג אבקת אשלגן פחמתי, 0.11 ק"ג קסנטפוס ו-0.31 ק"ג DIPEA לתמיסה. לאחר פינוי חנקן שלוש פעמים, כפי שהוצג קודם לכן, להוסיף 10 גרם של פלדיום אצטט לתמיסת התגובה תחת הגנת חנקן. מחממים את תערובת התגובה ל-90 מעלות וערבוב במשך 4 שעות.
לאחר מכן, מצננים את התערובת ל 40 מעלות צלזיוס ומטה. מסננים את תמיסת התגובה בעזרת משפך בוכנר באמצעות דיאטומיט כעזר לפילטר, ושוטפים את עוגת הפילטר בטולואן. אספו וריכזו את התסנין באמצעות משאבת ואקום מים במחזור, כפי שמוצג קודם לכן.
מוסיפים 300 מיליליטר של הפטן ומערבבים במשך 20 דקות. לאחר סינון תמיסת התגובה שוב עם משפך Buchner, לשטוף את המוצר הגולמי עם 50 מיליליטר של הפטאן. יבש ולקבל את המוצר עם תשואה של 96.3%מסלול התגובה והתנאים של ACT051-3 ביניים לפני אופטימיזציה ולאחר אופטימיזציה מוצגים באיור זה.
ההשפעה של צורות שונות של TsCL על התרכובת הסינתטית ACT051-2 מוצגת כאן. התוצאות מראות כי TsCL מוצק תורם יותר לייצור תעשייתי. ההשפעה של הוספת TsCL בטמפרטורות שונות על הסינתזה של ACT051-2 מוצגת כאן.
תפוקת המוצר עלתה מ-97.49% ל-98.44% כאשר TsCL נוסף מ-0 ל-5 מעלות צלזיוס ל-23 עד 35 מעלות צלזיוס. ההשפעה של צריכת מים שונה לאחר הטיפול על הסינתזה של ACT051-2 מוצגת כאן. התנאים האופטימליים הושגו בנפח מים לאחר הטיפול של 6 מיליליטר לגרם ACT051-2.
נתונים אלה מראים את ההשפעה של הוספת DIPEA לתגובה לסינתזה של ACT051-3. הכנסת DIPEA הפחיתה את כמות פלדיום אצטט פי 2.5. ההשפעה של מצבים שונים של אשלגן פחמתי וממיסים תגובה שונים על התגובה של התרכובת הסינתטית ACT051-3 מוצגים כאן.
התוצאות מראות כי על ידי שינוי מצב אשלגן פחמתי המעורב בתגובה, זמן התגובה הופחת מ -7 שעות ל -3.5 שעות. בנוסף, על ידי מעבר מאלכוהול טרט-עמיל/1, 4-דיוקסן לטרט-עמיל אלכוהול/טולואן, זמן התגובה התקצר ל-3 שעות, ואזור שיא המוצר גדל מ-84.22% ל-88.52%התוספת של DIPEA היא קריטית לסינתזה של פיילוט וייצור תעשייתי של תרכובת ACT051-3.
