מיון חד-תאי של תאי גזע מזנכימליים אימונופנוטיפיים משיניים נשירות שעברו קילוף אנושי

פרוטוקול זה מפרט שיטה חיונית לאפיון וטיהור מדויק של תאי גזע מזנכימליים אנושיים על פלטפורמה אחת, המאפשרת יישומים יעילים במורד הזרם כמו השתלת תאי גזע. הוא משמעותי במיוחד עבור מעבדות קליניות המשפרות בדיקות מולקולריות וציטוגנטיות באמצעות מיון מדויק של תא בודד של תאי גזע מהונדסים או טבעיים. השיטות הנפוצות לבידוד אוכלוסיות תאי גזע מטוהרים מתייחסות לטכניקות כגון הפרדה אימונומגנטית, שיפוע צפיפות או מיון תאים מיקרופלואידים.

טכניקה כמו מיון אינדקסים מאפשרת לקשר אותו לפרופיל RNA של תא בודד שיכול לחלץ מידע שעתוק של כל תא ממוין. האתגרים העיקריים כוללים שמירה על איכות הדגימה, אופטימיזציה של תנאי תרבית תאים, כולל צפיפות התא וכדאיות במהלך המיון ולאחריו. בנוסף, תישקל גם בחירת גדלי חרירים מתאימים למכשיר והבטחת גישה בזמן לממיינים.

פרוטוקול זה מדגים לוח צביעה מדויק לאימונופנוטיפ ולמיון אוכלוסיית התאים הרצויה. הוא מבטיח איכות דגימה מתוקננת, כדאיות תאים אופטימלית, צפיפות למיון אוכלוסיית תאים ומגדיר מיון פרמטרים ניסיוניים בתוכנת FACSDiva . שיטה זו מאפשרת בחירה פשוטה ואימונופנוטיפ של אוכלוסיית תאי גזע המבטאים סמנים ביולוגיים ספציפיים.

פלטפורמה פשוטה זו מאפשרת מיון יעיל המבוסס על אוכלוסיית היעד המסייעת ומקבלת דגימות מטוהרות ליישומים הבאים במורד הזרם.