המחברים רוצים להודות לדאגמר דירבונסקיס על התמיכה הטכנית המצוינת שלה.

הניסויים בפרוטוקול זה אושרו על ידי הוועדה הממלכתית והמוסדית לטיפול בבעלי חיים (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, Germany, TVA G21-1-080). הניסויים נערכו בהתאם להנחיות ARRIVE. לצורך מחקר זה נעשה שימוש בשישה חזירי לנדרייס גרמנים זכרים בריאים בגילאי 2-3 חודשים ובמשקל 30-35 ק"ג. ציר הזמן של הניסוי מסוכם באיור 1. הפרטים הקשורים לכל החומרים והמכשירים המשמשים בפרוטוקול זה מפורטים בטבלת החומרים.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66039/66039fig01.jpg"> איור 1: ציר הזמן של הניסוי. מדידות בריאות בסיסיות נלקחו לאחר הכנת החיה ותקופת ייצוב של 30 דקות. אנדוטוקסמיה נגרמה על ידי הזרקת LPS במשך 30 דקות ומדידות של 0 שעות נלקחו לאחר 30 דקות נוספות; לאחר מכן, נמשכו המדידות השעתיות במשך 4 שעות. קיצורים: BLH = בריא בסיסי; LPS = lipopolysaccharide. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66039/66039fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
1. הכנת בעלי חיים
<ol><li>שמור על בעלי החיים בסביבה הרגילה שלהם זמן רב ככל האפשר כדי למזער את הלחץ. יש למנוע מזון למשך 6 שעות לפני מתן חומר הרדמה, תוך מתן גישה חופשית למים.</li>
	<li>הרגיעו את בעלי החיים בזריקה תוך שרירית של אזפרון (3 מ"ג∙kg-1) ומידזולאם (0.5 מ"ג kg-1) בעודם בסביבתם הרגילה.</li>
	<li>ברגע שהסדציה נכנסת לתוקף, אשר מתרחשת בדרך כלל בתוך כ 15-20 דקות לאחר מתן התרופה, להעביר את החזירים למעבדה. הערה: חיוני לוודא כי טשטוש מתמשך נשמר לאורך כל ההעברה; בהתאם למחוקק האזורי, זה עשוי לדרוש פיקוח קבוע של וטרינר.</li>
	<li>שימו לב לשמירה על טמפרטורת הגוף הרגילה של החזירים (~ 38 מעלות צלזיוס) במהלך ההובלה. לדוגמה, שקול לכסות את בעל החיים עם שמיכה כדי למנוע היפותרמיה. הערה: חשוב להגביל את זמן ההובלה לא יעלה על משך ההרגעה, אשר בדרך כלל נע בין 30 דקות ל 60 דקות.</li>
	<li>לאחר החיטוי יש ליצור גישה תוך ורידית על ידי החדרת קטטר 22 G לווריד האוריקולרי. לפני שתמשיך עם כל תנועה נוספת של החזיר או השראת הרדמה, ודא כי הצנתר מקובע היטב כדי למנוע נקע על ידי תנועות פתאומיות.</li>
	<li>נטר ברציפות את ריווי החמצן ההיקפי באמצעות חיישן המוצמד לזנב או לאוזן.</li>
</ol>2. הרדמה ואוורור מכני
<ol><li>מתן פנטניל תוך ורידי (4 מיקרוגרם ק"ג-1) ופרופופול (3 מ"ג ק"ג-1) להשראת הרדמה.</li>
	<li>הניחו את החזיר במצב שכיבה.</li>
	<li>יש לתת אטרקוריום (0.5 מ"ג ק"ג-1) כמרפה שרירים וליזום מיד אוורור לא פולשני באמצעות מסכת אוורור לכלבים. הניחו את המסכה על החוטם והפעילו לחץ חזק עם האגודלים תוך משיכת הלסת התחתונה קדימה באמצעות האצבע האמצעית/הטבעתית. הגדר את מכונת ההנשמה לפרמטרים הבאים: מקטע חמצן השראתי (FiO2 ) = 100%, נפח גאות ושפל = 6-8 מ"ל kg-1, לחץ פקיעת קצה חיובי (PEEP) = 5 mbar, לחץ השראת שיא ≤ 20 mbar, קצב נשימה = 18-20 min-1.</li>
	<li>שמור על הרדמה על ידי ייזום עירוי מתמשך של תמיסת אלקטרוליטים מאוזנת (5 מ"ל ק"ג-1 ח-1), פנטניל (10 מיקרוגרם ק"ג-1 ח-1) ופרופופול (6 מ"ג ק"ג-1 ח-1).</li>
	<li>ביצוע אינטובציה אנדוטרכאלית באמצעות צינור אנדוטרכאלי סטנדרטי (מזהה 6-7 מ"מ), חוט מנחה ולרינגוסקופ המצויד בלהב מקינטוש (גודל 4).<ol><li>בקש מעוזר לפתוח את הפה ולהחזיק את הלשון בצד שמאל.</li>
		<li>הכנס את להב המקינטוש עד שהאפיגלוטיס גלוי. לאחר מכן, להרים את laryngoscope כלפי מעלה כדי להזיז את epiglottis הגחון לדמיין את מיתרי הקול. לעיתים, האפיגלוטיס עשוי להידבק לחיך הרך; במקרה זה, לגייס אותו על ידי החלקה עדינה הצידה עם הצינור או bougie.</li>
		<li>הכנס בזהירות את הצינור האנדוטרכאלי דרך מיתרי הקול והסר את המשרה. אם נתקלים בקושי, נסו לסובב את הצינור מבלי להפעיל כוח מוגזם. במידת הצורך, השתמש בצינור קטן יותר. ברגע שהצינור נמצא במקום, לנפח את השרוול עם 10 מ"ל של אוויר.</li>
	</ol></li>
	<li>חבר את הצינור האנדוטרכאלי למכונת ההנשמה והתחל אוורור. ודא מיקום צינור תקין על ידי זיהוי CO2 בסוף פג תוקף וביצוע auscultation דו-צדדי. השתמש בהגדרות האוורור הבאות: FiO2 = 40%, נפח גאות = 6-8 מ"ל kg-1, PEEP = 5 mbar, יחס השראה לתפוגה = 1:2, קצב נשימה = מותאם להשגת רמת CO2 בסוף הגאות של <45 מ"מ כספית, בדרך כלל 30-40 דקות-1 . הערה: אם הצינור הונח בצורה שגויה בוושט, האוויר ינפח את הקיבה ויגרום לבליטה נראית לעין. במקרים כאלה, מיד להסיר את הצינור, לנהל אוורור לא פולשני במשך 1-2 דקות, ולמקם מחדש את הצינור כראוי.</li>
	<li>הכנס צינור קיבה כדי למנוע ריפלוקס או הקאות. אם ההחדרה מתגלה כמאתגרת, השתמש בלרינגוסקופ כדי לקבל תצוגה טובה יותר של הכניסה לוושט.</li>
</ol>3. מכשור
<ol><li>הניחו קו ורידי עורקי וקו ורידי מרכזי בעורק הירך ובווריד, בהתאמה, לצורך ניטור המודינמי וטיפול בנפח תוך ורידי.</li>
	<li>השתמש בתחבושות כדי לסגת ולאבטח את הרגליים האחוריות, מתן גישה טובה יותר לכלי הירך.</li>
	<li>הכינו את כל החומרים הדרושים לפני המכשור. מלא את כל הצנתרים בתמיסת מלח והבטח גישה קלה לחוטים ולצנתרים כדי למזער את הצורך בניסיונות צנתור מרובים ואיבוד דם מיותר.</li>
	<li>החל חומר חיטוי אלכוהולי על אזור המפשעה ונגב אותו עם ספוגית סטרילית. חזור על תהליך זה פעמיים. יש למרוח שוב את חומר החיטוי ללא ניגוב ולהמתין 3 דקות. מניחים וילון סטרילי מעל אזור המפשעה.</li>
	<li>השתמש אולטרסאונד כדי לזהות את כלי הדם הירך. השתמש בטכניקת צנתור מונחית אולטרסאונד במישור של סלדינגר כדי למזער נזק לרקמות ואיבוד דם.</li>
	<li>דמיינו את עורק הירך לאורך. נקב את העורק עם מזרק מחובר המחט לשאיפה מתמשכת. אדום בהיר, דם פועם מאשר נקב עורקי. הסר את המזרק והכנס את החוט המוכן. הסר את המחט תוך השארת החוט במקומו.</li>
	<li>חזור על אותו הליך עבור וריד הירך. ניקוב ורידי מאושר על ידי זורם לאט, דם אדום כהה.</li>
	<li>אשר את המיקום הנכון של שני החוטים על ידי הדמיה של שני כלי הירך באמצעות אולטרסאונד.</li>
	<li>השתמש בטכניקה של סלדינגר כדי להחדיר תחילה את נדן החדרת העורק, ולאחר מכן את נדן החדרת הוורידים. ודא מיקום תקין באמצעות ניתוח גז דם של דגימות דם שנלקחו משני הקווים.</li>
	<li>ודא כי הדם יכול להיות שואף מכל השורות. יש לשטוף את כל הקווים בתמיסת מלח כדי למנוע היווצרות קרישי דם.</li>
	<li>קבע היטב את הקווים לעור באמצעות תפרים כירורגיים למניעת פריקה.</li>
	<li>חבר את קווי הוורידים העורקיים והמרכזיים למתמרים למדידת פרמטרים המודינמיים.</li>
	<li>הכנס צנתר תפוקת לב דופק (PiCCO) לנדן החדרת העורקים וחבר אותו למתמר הלחץ העורקי ולכבל ממשק הטמפרטורה של צג PiCCO.</li>
	<li>חברו קטטר ברבור-גנץ למתמר.<ol><li>תוך כדי מדידה רציפה של הלחץ, יש להכניס את הצנתר לנדן החדרת הווריד המרכזי. יש לנפח את הבלון לאחר כ-30 ס"מ, כאשר עקומת לחץ ורידי מרכזית נראית לעין.</li>
		<li>לאט לאט לקדם את הצנתר תוך ניטור עקומת הלחץ. כאשר הצנתר נכנס לחדר הימני, חפש עקומת דופק עם ערך סיסטולי גבוה וערך דיאסטולי נמוך. התקדמות נוספת של הצנתר תביא לערך סיסטולי עקבי ולערך דיאסטולי מוגבר, המעיד על מיקום בעורק הריאה.</li>
		<li>תקן את הצנתר במצב זה (בדרך כלל בין 50 ל 70 ס"מ). חבר את חיישן טמפרטורת ההזרקה של מערכת PiCCO ללומן הפרוקסימלי של צנתר Swan-Ganz.</li>
	</ol></li>
	<li>יש לגלח את מצחו של החזיר ולהפעיל את אלקטרודת חיישן הדבק כדי למדוד את ריווי החמצן האזורי במוח.</li>
	<li>לאחר השראת ההרדמה והמכשור, יש לאפשר לבעל החיים להתייצב למשך 30 דקות או עד שהפרמטרים ההמודינמיים מתייצבים לפני ביצוע מדידות בסיסיות וגרימת הלם אנדוטוקסמי.</li>
</ol>4. אינדוקציה להלם
הערה: בעת עבודה עם LPS, יש ללבוש תמיד כפפות, משקפי מגן, מסכה וחלוק מעבדה. הימנע ממגע ישיר עם LPS.
<ol><li>הכינו תמיסת LPS בריכוז של 100 מיקרוגרם מ"ל-1 על ידי המסת 5 מ"ג LPS ב-50 מ"ל של 0.9% NaCl.</li>
	<li>קבל מדידות המודינמיות בסיסיות מיד לפני תחילת עירוי LPS.</li>
	<li>יש לתת מנה של 150 מיקרוגרם ק"ג-1 של LPS במשך 30 דקות (שווה ערך לקצב עירוי רציף של 300 מיקרוגרם ק"ג-1∙h-1 למשך 30 דקות).</li>
	<li>לאחר 30 דקות, הפחיתו את קצב העירוי ל-15 מיקרוגרם∙kg-1∙h-1 למשך שארית הניסוי.</li>
	<li>ניטור רציף של פרמטרים המודינמיים, כולל לחץ דם עורקי וריאתי, קצב לב ופרמטרים של אוורור. עקוב אחר טמפרטורת הגוף ברציפות כדי לשמור על נורמותרמיה.</li>
</ol>5. טיפול באי יציבות המודינמית
<ol><li>כאשר לחץ הדם העורקי הממוצע יורד מתחת ל-60 מ"מ כספית, השתמש ב-PiCCO כדי למדוד את מדד הלב (CI), מדד הנפח הדיאסטולי הסופי העולמי (GEDI) ומדד מי הריאה החוץ-וסקולריים (ELWI). טפלו בלחץ הדם הנמוך בהתאם להמלצות בתרשים הזרימה באיור 2.<ol><li>בצג PiCCO, לחץ על לחצן thermodilution (TD).</li>
		<li>לחץ על הלחצן לקלט לחץ ורידי מרכזי (CVP) והזן את ערך CVP הנוכחי.</li>
		<li>לחץ על לחצן התחל .</li>
		<li>כאשר תתבקש לעשות זאת, הזריק 10 מ"ל של תמיסת מלח קרה לחיישן טמפרטורת ההזרקה המחובר לצנתר Swan-Ganz. הערה: אין להזריק שום דבר אחר ישירות לפני או במהלך מדידת PiCCO מכיוון שהדבר יפגע במדידה.</li>
	</ol></li>
	<li>לאחר קבלת מדידות עבור CI, GEDI ו-ELWI, יש לטפל באי-יציבות המודינמית בהתאם לתרשים הזרימה באיור 2. אם מומלץ לטעון נפח, יש להחדיר במהירות 200 מ"ל של תמיסת אלקטרוליטים מאוזנת. אם טיפול קטכולאמין מומלץ, להגדיל את שיעור עירוי נוראדרנלין על ידי 1 מיקרוגרם kg-1 h-1.</li>
	<li>חזור על תהליך זה בכל פעם שלחץ הדם העורקי הממוצע יורד מתחת ל -60 מ"מ כספית. במקרה של אי יציבות המודינמית חמורה, לבחור הסלמה מהירה של הטיפול.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66039/66039fig02.jpg"> איור 2: טיפול מונחה PiCCO של חוסר יציבות המודינמית. לאחר קבלת מדידות עבור CI, GEDI, ו ELWI, ליישם טיפול על פי התרשים. נתון זה נלקח מתוך מדריך למשתמשPiCCO 12. קיצורים: PiCCO = תפוקת הלב של קווי המתאר של הדופק; V+ = טעינת נפח; חתול = טיפול קטכולאמין; V- = הפחתת נפח; CI = אינדקס לב; GEDI = מדד נפח דיאסטולי סופי גלובלי; ELWI = אינדקס מי ריאה חוץ-וסקולריים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66039/66039fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
6. סוף הניסוי והמתת חסד
<ol><li>להזריק 0.5 מ"ג של פנטניל תוך ורידי. המתינו 5 דקות. להזריק 200 מ"ג של פרופופול.</li>
	<li>להרדים את החזיר עם הזרקה מהירה של 40 מ"ל של 1 M אשלגן כלורי דרך קו ורידי מרכזי.</li>
</ol>

השראת אנדוטוקסמיה תלוית מינון בחזירים באמצעות עירוי LPS

<ol>
	<li>Vincent, J. -. L., Jones, G., David, S., Olariu, E., Cadwell, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequency+and+mortality+of+septic+shock+in+Europe+and+North+America:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Frequency and mortality of septic shock in Europe and North America: a systematic review and meta-analysis.</a> Critical Care. 23 (1), 196 (2019).</li><li>Reinhart, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognizing+sepsis+as+a+Global+Health+Priority+-+A+WHO+Resolution.">Recognizing sepsis as a Global Health Priority - A WHO Resolution.</a> New England Journal of Medicine. 377 (5), 414-417 (2017).</li><li>Cecconi, M., Evans, L., Levy, M., Rhodes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis+and+septic+shock.">Sepsis and septic shock.</a> The Lancet. 392 (10141), 75-87 (2018).</li><li>Font, M. D., Thyagarajan, B., Khanna, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis+and+septic+shock+-+basics+of+diagnosis,+pathophysiology+and+clinical+decision+making.">Sepsis and septic shock - basics of diagnosis, pathophysiology and clinical decision making.</a> Medical Clinics of North America. 104 (4), 573-585 (2020).</li><li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Third+International+Consensus+definitions+for+sepsis+and+septic+shock+(Sepsis-3).">The Third International Consensus definitions for sepsis and septic shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 801 (2016).</li><li>Jerala, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+biology+of+the+LPS+recognition.">Structural biology of the LPS recognition.</a> International Journal of Medical Microbiology. 297 (5), 353-363 (2007).</li><li>Copeland, S., Warren, H. S., Lowry, S. F., Calvano, S. E., Remick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+the+host+response+to+injury+investigators+acute+inflammatory+response+to+endotoxin+in+mice+and+humans.">Inflammation and the host response to injury investigators acute inflammatory response to endotoxin in mice and humans.</a> Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 12 (1), 60-67 (2005).</li><li>Dickson, K., Lehmann, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+response+to+different+toxins+in+experimental+sepsis+models.">Inflammatory response to different toxins in experimental sepsis models.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (18), 4341 (2019).</li><li>Bassols, A., Costa, C., Eckersall, P. D., Osada, J., Sabri&#224;, J., Tibau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pig+as+an+animal+model+for+human+pathologies:+A+proteomics+perspective.">The pig as an animal model for human pathologies: A proteomics perspective.</a> PROTEOMICS - Clinical Applications. 8 (9-10), 715-731 (2014).</li><li>Meurens, F., Summerfield, A., Nauwynck, H., Saif, L., Gerdts, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pig:+a+model+for+human+infectious+diseases.">The pig: a model for human infectious diseases.</a> Trends in Microbiology. 20 (1), 50-57 (2012).</li><li>Ali, J., Cody, J., Maldonado, Y., Ramakrishna, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+spectroscopy+(NIRS)+for+cerebral+and+tissue+oximetry:+analysis+of+evolving+applications.">Near-infrared spectroscopy (NIRS) for cerebral and tissue oximetry: analysis of evolving applications.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 36, 2758-2766 (2022).</li><li>. Getinge Deutschland GmbH PiCCO Technologie Erweitertes h&#228;modynamisches Monitoring auf h&#246;chstem Niveau Available from: <a target="_blank" href="https://www.getinge.com/dam/hospital/documents/german/picco_haemodynamisches_monitoring_broschuere-de-non_us.pdf">https://www.getinge.com/dam/hospital/documents/german/picco_haemodynamisches_monitoring_broschuere-de-non_us.pdf</a> (2023)</li><li>Breslow, M. J., Miller, C. F., Parker, S. D., Walman, A. T., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+vasopressors+on+organ+blood+flow+during+endotoxin+shock+in+pigs.">Effect of vasopressors on organ blood flow during endotoxin shock in pigs.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 252 (2), H291-H300 (1987).</li><li>Fink, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+and+mesenteric+O2+metabolism+in+endotoxic+pigs:+effect+of+ibuprofen+and+meclofenamate.">Systemic and mesenteric O2 metabolism in endotoxic pigs: effect of ibuprofen and meclofenamate.</a> Journal of Applied Physiology. 67 (5), 1950-1957 (1989).</li><li>Lado-Abeal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+(LPS)-induced+septic+shock+causes+profound+changes+in+myocardial+energy+metabolites+in+pigs.">Lipopolysaccharide (LPS)-induced septic shock causes profound changes in myocardial energy metabolites in pigs.</a> Metabolomics. 14 (10), 131 (2018).</li><li>Park, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+fecal+peritonitis-induced+sepsis+in+a+porcine+model.">Characterization of fecal peritonitis-induced sepsis in a porcine model.</a> The Journal of Surgical Research. 244, 492-501 (2019).</li><li>Jarkovska, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate+variability+in+porcine+progressive+peritonitis-induced+sepsis.">Heart rate variability in porcine progressive peritonitis-induced sepsis.</a> Frontiers in Physiology. 6, 412 (2015).</li><li>Kohoutova, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vagus+nerve+stimulation+attenuates+multiple+organ+dysfunction+in+resuscitated+porcine+progressive+sepsis.">Vagus nerve stimulation attenuates multiple organ dysfunction in resuscitated porcine progressive sepsis.</a> Critical Care Medicine. 47 (6), e461-e469 (2019).</li><li>Vintrych, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+sepsis,+with+a+special+focus+on+large+animal+models+of+porcine+peritonitis+and+bacteremia.">Modeling sepsis, with a special focus on large animal models of porcine peritonitis and bacteremia.</a> Frontiers in Physiology. 13, 1094199 (2022).</li><li>Stengl, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+L-type+calcium+current+in+ventricular+myocytes+from+pigs+with+hyperdynamic+septic+shock.">Reduced L-type calcium current in ventricular myocytes from pigs with hyperdynamic septic shock.</a> Critical Care Medicine. 38 (2), 579-587 (2010).</li></ol>

מכשיר NIRS סופק ללא תנאי על ידי Medtronic PLC, ארה"ב, למטרות מחקר ניסיוני. אלכסנדר זיברט קיבל דמי הרצאה מחברת Medtronic PLC. אף אחד מהכותבים אינו מדווח על ניגודי עניינים כספיים או אחרים. כתב היד עבר הגהה ועריכה על ידי ChatGPT® (Python Software, גרסה: 24 במאי 2023).

אנו מציגים פרוטוקול לגרימת אנדוטוקסמיה ניסיונית בחזירים באמצעות עירוי LPS, במטרה לגרום באופן אמין לשינויים הנצפים בדרך כלל באלח דם והלם ספטי. יש לשקול מספר שלבים קריטיים בפרוטוקול זה. הרגעה מספקת של חזירים לפני ההובלה חיונית למניעת עלייה ברמות קטכולאמין כתוצאה מסטרס, מה שעלול לסכן את התוצ?...

אלח דם והלם ספטי מדורגים בין הגורמים המובילים לתמותה בחולים המקבלים טיפול נמרץ 1,2,3. אלח דם מתעורר כאשר זיהום מעורר תגובה חיסונית לא מווסתת וכתוצאה מכך כשל רב-איברי. הוא מאופיין בתסמינים מסכני חיים, כולל חוסר יציבות המודינמית, מצוקה נשימתית, אי ספיקת כבד וכליות, כמו גם פגיעה קוגניטיבית 4,5. הלם ספטי מייצג תת-קבוצה של אלח דם עם תסמינים חמורים במיוחד המגבירים משמעותית את התמותה. תסמינים אלה כוללים תת לחץ דם מתמשך הדורש טיפול vasopressor ורמת לקטט בסרום מעל 2 mmol ∙L-1 4,5. שיעורי התמותה בחולים עם הלם ספטי הוערכו עד 40%, אפילו עם טיפול בבית החולים 1,3,5. 
חיידקים גראם-שליליים, כגון Pseudomonas ו- Escherichia coli, גורמים לעתים קרובות לזיהומים המפעילים תגובה חיסונית לא מווסתת זו4. המנגנונים הפתופיזיולוגיים הבסיסיים מורכבים ועדיין אינם מובנים במלואם. היבט אחד המתואר היטב כולל הפעלה של קולטנים דמויי טול על תאי מערכת החיסון על ידי דפוסים מולקולריים הקשורים לפתוגנים (PAMPs), מה שמוביל לשחרור ציטוקינים כגון גורם נמק גידולי אלפא (TNFα) או אינטרלוקין 1 (IL 1)4. אחד מה-PAMPs הללו הוא ליפופוליסכריד (LPS), המהווה מרכיב של קרום התא בחיידקים גראם-שליליים6. LPS שימש במודלים של בעלי חיים כדי לגרום אנדוטוקסמיה והלם אנדוטוקסמי 7,8.
מודלים של בעלי חיים מספקים סביבה מבוקרת וסטנדרטית לפיתוח וחקירה של אסטרטגיות טיפול חדשניות. בשל האנטומיה הדומה שלו, הפיזיולוגיה האימונולוגית והפרמטרים המודינמיים הדומות, מודל החזיר מתאים במיוחד לחקר ההשפעות של הלם אנדוטוקסמי 9,10. יתר על כן, ציוד רפואי סטנדרטי המשמש בדרך כלל בחולים אנושיים יכול להיות מיושם בקלות בחזירים בשל הגודל הדומה של דרכי הנשימה וכלי הדם שלהם, להקל על מכשור וניטור המודינמי.
באמצעות פרוטוקול זה, אנו מספקים מודל ניסיוני להלם אנדוטוקסמי בחזירים על ידי עירוי LPS תוך ורידי הנגזר מ - E. coli. כדי לעקוב אחר ההשפעות מדדנו פרמטרים המודינמיים וריאתיים, כולל לחץ דם עורקי, קצב לב, רוויון חמצן היקפי, לחץ עורקי ריאתי ולחץ בדרכי הנשימה. כדי להעריך את ההשפעה של אנדוטוקסמיה על אספקת חמצן במוח, השתמשנו בספקטרומטריה תת-אדומה קרובה (NIRS). בשיטה זו ניתן להעריך את ריווי החמצן במוח באמצעות אלקטרודת דבק המיושמת על המצח11.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Atracurium Hikma 50 mg/5mL</td>
			<td>Hikma Pharma GmbH, Martinsried</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Azaperone (Stresnil) 40 mg/mL</td>
			<td>Lilly Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Discardit II Spritze 2, 5, 10, 20 mL</td>
			<td>Becton Dickinson S.A. Carretera, Mequinenza Fraga, Spain</td>
			<td>syringe</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Luer Connecta&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson Infusion Therapy, AB Helsingborg, Schweden</td>
			<td>3-way-stopcock</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curafix i.v. classics</td>
			<td>Lohmann &#38; Rauscher International GmbH &#38; Co. KG, Rengsdorf, Germany</td>
			<td>Cannula retention dressing</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Datex Ohmeda S5</td>
			<td>GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finland</td>
			<td>hemodynamic monitor</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Engstr&#246;m Carestation</td>
			<td>GE Heathcare, Madison USA</td>
			<td>ventilator</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl-Janssen 0.05 mg/mL</td>
			<td>Janssen-Cilag GmbH, Neuss</td>
			<td>fentanyl</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F&#252;hrungsstab, Durchmesser 4.3</td>
			<td>R&#252;sch</td>
			<td>endotracheal tube introducer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incetomat-line 150 cm</td>
			<td>Fresenius, Kabi Deutschland, GmbH</td>
			<td>perfusor line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intrafix Primeline</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany</td>
			<td>Infusion line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer sheath 5 Fr.</td>
			<td>Terumo Healthcare</td>
			<td>arterial introducer&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INVOS</td>
			<td>Medtronic, Dublin, Ireland</td>
			<td>near infrared spectrometry</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>JOZA Einmal Nitril Untersuchungshandschuhe&#160;</td>
			<td>JOZA, M&#252;nchen, Germany</td>
			<td>disposable gloves</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope, 45.48.50, KL 2000</td>
			<td>Medicon</td>
			<td>Laryngoscope handle</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Littmann Classic III Stethoscope</td>
			<td>3M Deutschland GmbH, Neuss, Germany</td>
			<td>stethoscope</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LPS (E. coli; Serotype O111:B4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MAC Two-Lumen Central venous access set</td>
			<td>Arrow international inc. Reading, PA, USA</td>
			<td>venous introducer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maimed Vlieskompresse</td>
			<td>Maimed GmbH, Neuenkirchen, Germany</td>
			<td>Fleece compress to fix the tongue</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masimo LNCS Adtx SpO2 sensor</td>
			<td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td>
			<td>saturation clip for the tail</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masimo LNCS TC-I SpO2 ear clip sensor</td>
			<td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td>
			<td>Saturation clip for the ear</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masimo Radical 7</td>
			<td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td>
			<td>periphereal oxygen saturation&#160;&#160;&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam 15 mg/3 mL</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midmark Canine Mask Small Plastic with Diaphragm FRSCM-0005</td>
			<td>Midmark Corp., Dayton, Ohio, USA</td>
			<td>dog ventilation mask</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monocryl surgical suture</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson, Belgium</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td>saline solution</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9 %</td>
			<td>Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octeniderm farblos</td>
			<td>Sch&#252;lke &#38; Mayr GmbH, Nordenstedt, Germany</td>
			<td>Alcoholic disinfectant</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Original Perfusor syringe 50 mL</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td>perfusor syringe</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PA-Katheter Swan Ganz 7.5 Fr 110 cm</td>
			<td>Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA</td>
			<td>Swan-Ganz catheter</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusor FM Braun</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td>syringe pump</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PiCCO catheter</td>
			<td>PULSION Medical Systems SE, Feldkirchen, DE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride 1 M</td>
			<td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol 2% 20 mg/mL (50 mL flasks)</td>
			<td>Fresenius, Kabi Deutschland, GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse-contour continous cardiac output System PiCCO2</td>
			<td>PULSION Medical Systems SE, Feldkirchen, DE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R&#252;schelit Super Safety Clear &#62;ID 6/6.5 /7.0 mm</td>
			<td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia</td>
			<td>endotracheal tube</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem</td>
			<td>Sonosite Bothell, WA, USA&#160;</td>
			<td>ultrasound&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Macintosh Gr&#246;&#223;e 4</td>
			<td>Welch Allyn69604</td>
			<td>blade for laryngoscope</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterofundin</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany</td>
			<td>Balanced electrolyte solution</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vasco OP sensitive&#160;</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td>sterile gloves</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vasofix Safety 22 G-16 G</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td>venous catheter</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VBM Cuff Manometer</td>
			<td>VBM Medizintechnik GmbH, Sulz a.N., Germany&#160;</td>
			<td>cuff pressure gauge</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

lipopolysaccharide infusion as a porcine endotoxemic shock model

אלח דם והלם ספטי נתקלים לעתים קרובות בחולים המטופלים ביחידות לטיפול נמרץ והם בין גורמי המוות המובילים בחולים אלה. זה נגרם על ידי תגובה חיסונית dysregulated לזיהום. אפילו עם טיפול אופטימלי, שיעורי התמותה נשארים גבוהים, מה שהופך תובנות נוספות על הפתופיזיולוגיה ואפשרויות טיפול חדשות הכרחיות. ליפופוליסכריד (LPS) הוא מרכיב בקרום התא של חיידקים גראם-שליליים, אשר לעתים קרובות אחראים לזיהומים הגורמים לאלח דם ולהלם ספטי. 
חומרת ותמותה גבוהה של אלח דם והלם ספטי הופכים מחקרים ניסיוניים סטנדרטיים בבני אדם לבלתי אפשריים. לפיכך, מודל בעלי חיים נדרש למחקרים נוספים. החזיר מתאים במיוחד למטרה זו מכיוון שהוא דומה מאוד לבני אדם באנטומיה, פיזיולוגיה וגודל. 
פרוטוקול זה מספק מודל ניסיוני להלם אנדוטוקסמי בחזירים על ידי עירוי LPS. הצלחנו לגרום באופן אמין לשינויים שנצפו לעתים קרובות בחולי הלם ספטי, כולל חוסר יציבות המודינמית, כשל נשימתי וחמצת. זה יאפשר לחוקרים לקבל תובנה חשובה לגבי מצב רלוונטי מאוד זה ולהעריך גישות טיפוליות חדשות במסגרת ניסויית.

Sepsis and septic shock rank among the leading causes of mortality in patients receiving intensive care treatment1,2,3. Sepsis arises when an infection triggers a dysregulated immune response resulting in multiorgan failure. It is characterized by life-threatening symptoms, including hemodynamic instability, respiratory distress, hepatic and renal failure, as well as cognitive impairment4,5. Septic shock represents a subset of sepsis with particularly severe symptoms that significantly increase mortality. These symptoms include persistent hypotension requiring vasopressor therapy and a serum lactate level exceeding 2 mmol&#8729;L-1&#160;4,5. Mortality rates in patients with septic shock have been estimated as high as 40%, even with hospital treatment1,3,5.
Gram-negative bacteria, such as Pseudomonas and Escherichia coli, often cause infections triggering this dysregulated immune response4. The underlying pathophysiological mechanisms are complex and not yet fully understood. One well-described aspect involves the activation of Toll-like receptors on immune cells by pathogen-associated molecular patterns (PAMPs), leading to the release of cytokines such as tumor necrosis factor-alpha (TNF&#945;) or Interleukin 1 (IL 1)4. One of these PAMPs is lipopolysaccharide (LPS), which constitutes a component of the cell membrane in gram-negative bacteria6. LPS has been employed in animal models to induce endotoxemia and endotoxemic shock7,8.
Animal models provide a controlled and standardized setting to develop and investigate novel treatment strategies. Due to its similar anatomy, immunological physiology, and comparable hemodynamic parameters, the pig model is particularly well-suited for studying the effects of endotoxemic shock9,10. Furthermore, standard medical equipment commonly used in human patients can be readily applied in pigs due to the similar size of their airways and blood vessels, facilitating instrumentation and hemodynamic monitoring.
With this protocol, we provide an experimental model for endotoxemic shock in pigs by intravenously infusing LPS derived from E. coli. To monitor the effects, we measured hemodynamic and pulmonary parameters, including arterial blood pressure, heart rate, peripheral oxygen saturation, pulmonary arterial pressure, and airway pressure. To evaluate the influence of endotoxemia on cerebral oxygen supply, we used near-infrared spectrometry (NIRS). With this method, the cerebral oxygen saturation can be evaluated via an adhesive electrode applied to the forehead11.

מחבר זרקור: אינדוקציה של הלם אנדוטוקסמי ניסיוני בחזירים לחקר כשל המודינמי ונשימתי

עירוי ליפופוליסכריד כמודל הלם אנדוטוקסמי חזירי

With this protocol, we induce experimental endotoxemic shock in pigs. We were able to reliably cause symptoms of endotoxemia, such as hemodynamic instability and respiratory failure. Lipopolysaccharide is a toxic substance.When working with lipopolysaccharide, it is essential always to wear gloves, protective goggles, a mask, and a lab coat. This protocol provides an easy and reliable way to induce endotoxemia. Because of their similar anatomy and physiology, pigs are particularly well-suited for this kind of research as standard medical equipment may be used.Using this protocol, we will be able to study the effects of different ventilation strategies in respiratory failure and lung damage during endotoxemic shock.

במחקר זה, שישה חזירים זכרים בריאים בגילאי 2-3 חודשים ובמשקל 30-35 ק"ג הורדמו וקיבלו עירוי של ליפופוליסכריד (LPS) כדי לגרום לאנדוטוקסמיה. כדי לקבוע את המינון המתאים של LPS הנדרש כדי לגרום באופן עקבי לסימפטומים של הלם, החזירים קיבלו מנות אינדוקציה שונות של LPS שנעו בין 100 מיקרוגרם ק"ג-1 ל-200 מיקרו?...

Watch this Scientific Journal Video about Lipopolysaccharide Infusion as a Porcine Endotoxemic Shock Model at JoVE.com

אנו מספקים פרוטוקול למודל הלם אנדוטוקסמי ניסיוני בחזירים על ידי עירוי ליפופוליסכריד.

Sepsis and septic shock are frequently encountered in patients treated in intensive care units (ICUs) and are among the leading causes of death in these ...

באמצעות פרוטוקול זה, אנו גורמים להלם אנדוטוקסמי ניסיוני בחזירים. הצלחנו לגרום באופן אמין לתסמינים של אנדוטוקסמיה, כגון חוסר יציבות המודינמית וכשל נשימתי. Lipopolysaccharide הוא חומר רעיל.כאשר עובדים עם lipopolysaccharide, חיוני תמיד ללבוש כפפות, משקפי מגן, מסכה, ומעיל מעבדה. פרוטוקול זה מספק דרך קלה ואמינה לגרום לאנדוטוקסמיה. בגלל האנטומיה והפיזיולוגיה הדומות שלהם, חזירים מתאימים במיוחד לסוג זה של מחקר מכיוון שניתן להשתמש בציוד רפואי סטנדרטי.באמצעות פרוטוקול זה נוכל לחקור את ההשפעות של אסטרטגיות אוורור שונות בכשל נשימתי ובנזק לריאות במהלך הלם אנדוטוקסמי.

lipopolysaccharide-infusion-as-a-porcine-endotoxemic-shock-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Lipopolysaccharide Infusion as a Porcine Endotoxemic Shock Model

582 Views.  University Medical Center of the Johannes Gutenberg-University. באמצעות פרוטוקול זה, אנו גורמים להלם אנדוטוקסמי ניסיוני בחזירים. הצלחנו לגרום באופן אמין לתסמינים של אנדוטוקסמיה, כגון חוסר יציבות המודינמית וכשל נשימתי. Lipopolysaccharide הוא חומר רעיל.כאשר עובדים עם lipopolysaccharide, חיוני תמיד ללבוש כפפות, משקפי מגן, מסכה, ומעיל מעבדה. פרוטוקול זה ...

Video: מחבר זרקור: אינדוקציה של הלם אנדוטוקסמי ניסיוני בחזירים לחקר כשל המודינמי ונשימתי

Sepsis and septic shock are frequently encountered in patients treated in intensive care units (ICUs) and are among the leading causes of death in these patients. It is caused by a dysregulated immune response to an infection. Even with optimized treatment, mortality rates remain high, which makes further insights into the pathophysiology and new treatment options necessary. Lipopolysaccharide (LPS) is a component of the cell membrane of gram-negative bacteria, which are often responsible for infections causing sepsis and septic shock. 
The severity and high mortality of sepsis and septic shock make standardized experimental studies in humans impossible. Thus, an animal model is needed for further studies. The pig is especially well suited for this purpose as it closely resembles humans in anatomy, physiology, and size. 
This protocol provides an experimental model for endotoxemic shock in pigs by LPS infusion. We were able to reliably induce changes frequently observed in septic shock patients, including hemodynamic instability, respiratory failure, and acidosis. This will allow researchers to gain valuable insight into this highly relevant condition and evaluate new therapeutic approaches in an experimental setting.

We provide a protocol for an experimental endotoxemic shock model in pigs by infusion of lipopolysaccharide.

Instrumentation and Monitoring Techniques in Femoral Vascular Access for Hemodynamic Assessment in a Porcine Model

To begin, place the anesthetized pig supine on a working platform. Apply an alcoholic disinfectant to the inguinal area and wipe it with a sterile swab. Then apply disinfectant and wait three minutes before placing a sterile fenestrated drape over the inguinal area.Using ultrasound, identify the femoral blood vessels and visualize them longitudinally. Next, puncture the femoral vein with a syringe attached to the needle and confirm venous puncture with slow-flowing, dark red blood. Insert the wire into the vein and remove the needle while leaving the wire in place.Then puncture the artery with a syringe attached to the needle for continuous aspiration. Confirm the arterial puncture with bright red, pulsating blood. Remove the syringe from the artery and insert the prepared wire.Then remove the needle while leaving the wire in place. Using ultrasound, visualize the femoral vessels to confirm the correct positioning of both wires. Next, use Seldinger's technique to insert the arterial introducer sheath into the femoral artery, and the venous introducer sheath into the femoral vein.To confirm proper positioning, draw the blood from the arterial and central venous lines for blood gas analysis. Next, flush the lines with saline to prevent clot formation. Secure the lines to the skin using surgical sutures to prevent dislocation.Connect the arterial and central venous lines to transducers for hemodynamic measurements. Insert a pulse contour cardiac output, or PICO catheter, into the arterial introducer sheath. Connect the catheter to the arterial pressure transducer and the temperature interface cable of the PICO monitor.While continuously measuring pressure, insert the Swan-Ganz catheter into the central venous inducer sheath. Inflate the balloon once the catheter is inserted approximately 30 centimeters, and upon the appearance of a central venous pressure curve. Slowly advance the catheter into the central venous introducer sheath while monitoring the pressure curve.Once the catheter enters the right ventricle, examine for a pulse curve with a high systolic and low diastolic value. To confirm the placement of the catheter in the pulmonary artery, advance the catheter further and look for a consistent systolic and an increased diastolic value. Fix the catheter in position and connect the injectate temperature sensor of the PICO system to the proximal lumen of the Swan-Ganz catheter.

מכשור וטכניקות ניטור בגישה לכלי הדם של הירך לצורך הערכה המודינמית במודל חזירי

Shock Induction and Treatment of Hemodynamic Instability in a Porcine Model Using LPS Infusion and PiCCO Monitoring

After inserting the Swan-Ganz catheter into the pulmonary artery, allow the anesthetized pig to stabilize for 30 minutes. Then obtain the baseline hemodynamic measurements. Administer 150 micrograms per kilogram of lipopolysaccharide or LPS for 30 minutes.Monitor the hemodynamic parameters such as arterial and pulmonary arterial blood pressure, heart rate, and ventilation. Then monitor the hemodynamic parameters at an LPS infusion rate of 15 micrograms per kilogram per hour. On the PiCCO monitor, press the thermodilution button, then press the button for central venous pressure or CVP input, and enter the current CVP value before pressing the Start button.When prompted, inject 10 milliliters of cold saline solution into the injectate temperature sensor connected to the Swan-Ganz catheter. After measuring cardiac index, global end-diastolic index, and extravascular lung water index, apply hemodynamic instability treatment according to the flow chart. In case of volume loading, rapidly infuses 200 milliliters of balanced electrolyte solution.For catecholamine therapy, increase the norepinephrine infusion rate by one microgram per kilogram per hour. Mean arterial blood pressure decreased following LPS infusion, but was maintained above 60 millimeters of mercury through fluid resuscitation or norepinephrine infusion. The animals demonstrated a decrease in cardiac index and an increase in heart rate, indicating hemodynamic instability during the shock state.Lung damage was indicated by a decrease in the partial pressure of oxygen and the arterial blood inspiratory oxygen fraction ratio, and an increase in pulmonary artery pressure. Cerebral oxygenation also decreased following the induction of shock. The animals also exhibited acidosis and increasing lactate levels.