בידוד, התרחבות ונוקלאופקציה של תאי גזע עצביים מאזור תת-חדרי מורין בוגרים

המחקר שלנו מתמקד בחקר האופן שבו אוכלוסיית תאי הגזע העצביים מווסתת במוחם של יונקים בוגרים. הבנת המנגנונים המולקולריים הפנימיים והחיצוניים המווסתים תאי גזע עצביים בתוך הנישות הנוירוגניות חשובה להבנת הביולוגיה ולפיתוח יישומים טיפוליים פוטנציאליים עתידיים. כדי לחקור התנהגות תאי גזע עצביים, הן in vivo והן in vitro גישות נמצאים בשימוש נרחב.

תרביות תאי גזע עצביים במבחנה מציעות סביבות מבוקרות ואפשרות לתפעל ולנטר בקלות אוכלוסיית תאים זו. טכניקות לשימור ביטוי גנים במבחנה הן גישה רב-תכליתית לחקר מנגנונים מולקולריים השולטים בביולוגיה של התא. עם זאת, שיטה יעילה וניתנת לשחזור לביטוי יתר ולהפיל גנים מועמדים בתאי גזע עצביים עדיין מאתגרת בתחום.

שיטות טרנספקציה מסורתיות להעברת גנים הוכחו כיעילות בתאי מערכת העצבים המרכזית. יתר על כן, שיטות אלה משפיעות על יכולת הקיום והפונקציונליות של התא. לכן, חידוד של גישות חלופיות הוא חיוני כדי להשפיע על ביטוי גנים בתאי גזע עצביים.

באמצעות פרוטוקול זה, אנו מציגים מערכת נוקלאופקציה משופרת המשיגה יעילות גבוהה של העברת גנים בתרביות תאי גזע עצביים מהאזור התת-חדרי של המורין הבוגר, יחד עם שיעורי הישרדות גבוהים מ-80%