אנו בהחלט מדגימים כיצד לבצע הדמיית PET in vivo של עכבר באמצעות תבניות תואמות גוף אלה וכיצד לנווט בפלטפורמת ניתוח הנתונים המשויכת. זה מאפשר לנו לשמור על כל בעלי החיים באותו מיקום פיזי על פני נקודות זמן, ויכול להאיץ ולתקנן משמעותית את ניתוח התמונות במורד הזרם על ידי אוטומציה. הדמיה in vivo מציגה יתרונות מרובים בהשוואה לניסויים מסורתיים ללא הדמיה.
לדוגמה, הדמיה מאפשרת הערכה מערכתית והוליסטית של תפוצת התרופה וההשפעות הפרמקולוגיות על הנבדק כולו, מה שמאפשר לא רק ניטור היעילות באתר היעד, אלא גם זיהוי פעילויות בלתי צפויות מחוץ לאתר. השגת נתונים כמותיים וניתנים לשחזור היא קריטית לפיתוח תרופות. לדוגמה, מחקר התפלגות מעיים מבוסס PET מייצר כמות עצומה של מידע רב ערך על הקינטיקה של התרכובת, הצטברות רקמות וקשירת מטרה.
עם זאת, חסרים תהליכים אוטומטיים יעילים לניתוח נתונים אלה. אנו מראים כאן שתמונות ה-PET CT המתקבלות עם BCAMs אלה הן אחידות ביותר וניתנות לניתוח בקבוצות על ידי כלי הפילוח האוטומטי מבוסס הענן, מה שחוסך כמות עצומה של זמן. יתר על כן, אנו יכולים להראות שהניתוח האוטומטי הניב תוצאות משביעות רצון העולות בקנה אחד עם השיטה הידנית שלנו.
השלב הבא שלנו הוא לבצע הערכה מקיפה יותר של הביצועים של כלי אוטומטי זה. נשווה מקרוב את תוצאות ההחזר על ההשקעה שנוצרו על ידי ה-SAS לאלו שנוצרו על ידי אנליסטים אנושיים עם רמות ניסיון שונות, ונשווה את תוצאות ההדמיה in vivo לכימות אמת קרקעית ex vivo. כדי להתחיל, חבר תבנית בעלי חיים תואמת גוף, או BCAM, בגודל המתאים לקליפ המקדים כשהחלק העליון הפוך כלפי מעלה ב-90 מעלות.
הניחו עכבר מורדם על הבסיס והאריכו את גפיו. לאחר מכן הנח בעדינות תבנית תבנית הזרקת גידול BCAM בצד הגבי של העכבר. צור בזהירות סימן ייחוס עגול זמני במיקום החיתוך הרצוי באמצעות סמן.
לאחר יצירת הסימן, הסר את תבנית התבנית. השתמש בסימנים הזמניים כהפניה, הרם את העור בעזרת אצבעות או מלקחיים ליצירת אוהל. הכנס לאט את המחט והזריק תרחיף תאי גידול תת עורי במיקום הרצוי.
השליכו את המחט למיכל חד ביולוגי. ערכו בזהירות מינון יעד של פלואור 18 FDG למזרק סטרילי. הכנס את המזרק לתא הבאר של כיול המינון, והורד את המטבל כדי למדוד את המינון הרדיואקטיבי.
קח קריאה יציבה מכיול המינון. רשום את התאריך והשעה. לפני ההזרקה, רשום את משקל העכבר.
העבירו את העכבר למסנן מתאים ואתרו את וריד הזנב. לאחר מכן הזריק את המינון לעכבר המודע ורשום את זמן ההזרקה. הניחו את המזרק בצד, ונקו עודפי דם מהזנב בעזרת גזה.
לאחר מכן הסר את העכבר מהמסננת והנח אותו בחזרה בבית המתאים. כעת החזר את המזרק לתא כיול המינון, ורשום את כל הקריאות הנותרות לחישוב המינון. רשום את התאריך והשעה של קריאת הפעילות השיורית.
60 דקות לאחר מתן תוך ורידי של פלואור 18 FDG, העבירו את העכבר המורדם ל-BCAM בגודל מתאים בהתבסס על משקל גופו. הרם בעדינות את העכבר בעורף. הכנס את הזנב לחריץ הזנב ועטוף אותו מתחת ל-BCAM.
לאחר מכן הניחו את הזנב על משטח הזנב ואבטחו אותו בעזרת סרט. ודא שעמוד השדרה ישר, וסגור בעדינות את ה-BCAM. מקם את כל ארבע הגפיים על פלטפורמות כפות ה-BCAM, ואבטח עם סרט לפי הצורך.
לאחר מכן הצמד בעדינות את ה-BCAM לתוך מעבורת מיטת ההדמיה על ידי הכנסת הקצה הקדמי תחילה. לחץ כלפי מטה על גב ה-BCAM עד שלחיצה מציינת שהוא מאובטח למעבורת G8. כדי להתחיל, פתח את תוכנת הרכישה G8 PET.
הזן את פרטי המחקר לתוכנה, כולל משקל העכבר, תאריך, שעה, כמות המינון הראשונית, פרטי ההזרקה וקריאות הפעילות השיורית. לאחר מכן, הכנס את מעבורת מיטת ההדמיה עם העכבר לפתח הסורק. בחר את פרמטרי ה-PET CT המתאימים, ורכוש נתוני הדמיה.
לאחר השלמת הרכישה, הסר את המעבורת עם העכבר והכנס אותה לרציף. לחץ על הכרטיסייה האנכית BCAM כדי לשחרר אותה ממעבורת G8. משוך בעדינות כלפי מעלה והסר את ה-BCAM עם העכבר.
לחץ על שתי לשוניות השמירה כדי להפוך למעלה ולפתוח את החלק העליון של ה-BCAM. לאחר מכן הסר בעדינות את העכבר. לניתוח תמונה, היכנס אל app.invivo.
גרזן, וצור פרויקט. לאחר מכן, לחץ על הכרטיסייה האדומה העלאה בפינה השמאלית העליונה של החלון. בחר את מערכת ההדמיה והמדווח ששימשו במחקר.
לאחר מכן בחר את התיקייה עם נתוני ההדמיה. נווט אל הכרטיסייה הערות בתוך תיקיית הפרויקט. לחץ על ביאור כדי להוסיף מידע סריקה רלוונטי כולל שם הנושא, מין, גודל BCAM, משקל הנושא, שם העוקבה, נקודת הזמן וערך המינון המוזרק.
לניתוח נתונים, לחץ על סריקות כדי לנווט בין רמות הפרויקט, הקבוצה והנושא הבודד. לאחר מכן בחר נתח. בפינה השמאלית העליונה של חלון רצועת הכלים של הניתוח, תחת Project, בחר את סימן החיבור ובחר Organ Probability MAP או OPM ROI.
ניתוח רגרסיה ליניארית הראה שלמוח יש את המתאם הגבוה ביותר בין ניתוח OPM אוטומטי לשיטות ידניות, המשקף דיוק גבוה. הכליה והלב הימניים הראו מתאם בינוני בניתוח ה-OPM בהשוואה לניתוח הידני. לטחול היה המתאם הנמוך ביותר, ככל הנראה בשל אתגרים בפילוח ידני, מה שהקשה על ההבחנה בין רקמות רכות סמוכות.
