Per configurare il sistema di imaging, iniziare lasciando il laser a 532 nanometri acceso per 15 minuti per riscaldarsi. Quindi, posizionare una rampa personalizzata collegata a un palco regolabile manualmente accanto alla membrana di imaging. Collegare un supporto per denti di mouse con un tubo di respirazione collegato alla rampa e fissare una piastra riscaldante sulla superficie della rampa.
Una volta che il laser si è riscaldato, posizionare una scheda del rilevatore IR vicino all'ingresso del fascio di fibre e controllare l'allineamento del laser assicurandosi che la luce laser entri nel fascio. Inizia la preparazione degli animali tagliando i capelli della testa del topo anestetizzato con un rasoio elettrico da vicino agli occhi a dietro le orecchie. Applicare una crema depilatoria sulla parte superiore della testa.
Dopo averlo lasciato in posa per cinque minuti, pulire la crema con un batuffolo di cotone bagnato. Ripetere l'applicazione fino a quando la pelle della testa è completamente depilata. Poco prima di trasferire l'animale sulla piattaforma del sistema, utilizzare un ago calibro 27 per iniettare retroorbitalmente 100 microlitri di microbolle a concentrazione di stock.
Ora, metti una goccia della lozione protettiva per gli occhi sugli occhi. Avviare l'imaging PAUSAT riempiendo la finestra di imaging con acqua distillata sulla superficie per l'accoppiamento acustico. Quindi, fissare la testa del mouse nel supporto del dente e garantire una corretta anestesia e flusso d'aria.
Utilizzando una lampada riscaldante e una sonda rettale collegata a un regolatore di temperatura, mantenere la temperatura corporea dell'animale a 37 gradi Celsius. Aprire l'applicazione di imaging e passare all'ecografia in modalità B. Utilizzare la finestra ecografica dal vivo per regolare manualmente la testa del mouse nella posizione desiderata e l'altezza del palco di conseguenza.
Regolare il valore della frequenza di trasmissione degli ultrasuoni in modalità B a 16 megahertz. Quindi, immettere le informazioni della directory di salvataggio nell'applicazione di imaging. Quindi, selezionare la regione desiderata della scansione cerebrale utilizzando la casella mobile.
Premere il pulsante Acquisisci statico e controllare i risultati della scansione una volta completata l'acquisizione dell'immagine per garantire l'imaging della regione desiderata. Per eseguire l'angiografia acustica, tornare a Acquisizione immagini, quindi cambiare la modalità in Angiografia acustica. Quindi, immettere i parametri del protocollo di scansione desiderati, impostando la spaziatura dei fotogrammi su 0,2 millimetri e 10 fotogrammi per posizione.
Controllare i risultati della scansione sotto l'analisi delle immagini per garantire la qualità dell'immagine. Per visualizzare con la tomografia fotoacustica, aprire l'oscillatore parametrico ottico o l'applicazione OPO e impostarlo su 756 nanometri. Quindi, traslare manualmente il trasduttore ad array lineare nelle coordinate determinate in precedenza per co-registrare automaticamente i volumi wobbler e i volumi dell'array lineare.
Aprire l'applicazione laser e accendere il laser a 532 nanometri. Impostare i parametri di scansione come dimensioni del passo di 0,4 millimetri, lunghezza di scansione di 20 millimetri e media di 10 fotogrammi per posizione. Ora, apri il programma MATLAB del sistema di acquisizione dati a ultrasuoni e premi il pulsante Esegui.
Quindi, premere start nell'applicazione di scansione. Una volta completata la scansione, apri il programma di salvataggio MATLAB. Modificare il nome di salvataggio con il nome del file desiderato e premere Esegui.
Quindi modificare la lunghezza d'onda OPO a 798 nanometri e ripetere la scansione. L'angiografia acustica, o imaging AA, ha mostrato che nel cervello illeso, entrambi gli emisferi presentano una distribuzione simile dei vasi sanguigni. Risultati simili si osservano nelle immagini fotoacustiche a due diverse lunghezze d'onda.
Una notevole riduzione del segnale nella corteccia laterale destra è stata osservata nelle immagini AA di topi elettrocauterizzati. La stessa regione ha anche mostrato una ridotta ossigenazione dei tessuti che suggerisce ischemia. L'imaging PAUSAT può identificare le aree dell'ictus sulla base del modello di ictus trombotico fotografico, identificando la regione della corteccia superiore con ridotto apporto di flusso sanguigno e ridotta saturazione di ossigeno.
L'età del topo può influenzare l'imaging poiché il cranio diventa più spesso e si traduce in una diversa impedenza acustica con conseguente diminuzione della profondità dell'immagine per i topi più anziani.
