Aggiungere circa 0,75 milligrammi di lievito secco a 200 microlitri di soluzione salina bilanciata Hanks, o HBSS, contenente ioni di calcio e magnesio. Successivamente, incubare la miscela in un ThermoMixer a 100 gradi Celsius e 500 rpm per un minimo di 15 minuti. Dopo l'incubazione, trasferire cinque microlitri di sospensione di lievito in 45 microlitri di colorante blu di tripano allo 0,2%.
Contare le cellule di lievito con una camera di Neubauer. Regolare la concentrazione della sospensione iniziale a 33.000 cellule di lievito per microlitro utilizzando HBSS con calcio e magnesio. Successivamente, mescolare delicatamente e trasferire cinque microlitri dei neutrofili polimorfonucleati attivati precedentemente preparati in cinque microlitri della sospensione di cellule di lievito in una nuova provetta sterile per microcentrifuga.
Trasferire immediatamente sei microlitri di neutrofili polimorfonucleati e sospensione di lievito in tre pozzetti di un vetrino pulito, due microlitri ciascuno, e incubare il vetrino in una camera umidificata per 40 minuti. Dopo la colorazione con il panottico veloce, osservare le cellule al microscopio. Sebbene sia il peptide antimicrobico FMLP a 100 nanomolari che il peptide antimicrobico a 16 micromolari abbiano indotto un aumento dell'inghiottimento del lievito, la differenza non è stata statisticamente significativa fino alla doppia stimolazione, che ha aumentato significativamente la fagocitosi rispetto al gruppo di controllo.
