Per iniziare, indossare dispositivi di protezione individuale adeguati. Prima della procedura, pesare il ratto per determinare la dose corretta per i farmaci basati sul peso e le impostazioni del ventilatore. Dopo aver anestetizzato il ratto, posizionarlo in posizione prona.
Per confermare la profondità dell'anestesia, utilizzare una pinza per premere delicatamente il cuscinetto del piede dell'arto posteriore e verificare l'assenza di una risposta di ritiro. Ora applica un unguento a base di petrolio approvato dal veterinario sugli occhi del ratto per prevenire la secchezza. Osservare la frequenza respiratoria e valutare le risposte di astinenza come mostrato in precedenza.
Quindi, usando le tosatrici, radere l'arto posteriore del ratto. Utilizzare del nastro adesivo per posizionare l'arto con la caviglia fissata a 90 gradi di dorsiflessione, il ginocchio in estensione e l'anca in abduzione. Successivamente, inserire una coppia di aghi monopolari isolati calibro 28 per stimolare il nervo sciatico con il catodo posizionato nella regione dell'arto posteriore prossimale e l'anodo posizionato più prossimalmente all'interno del tessuto sottocutaneo, sovrapponendo l'osso sacro.
Quindi posizionare un elettrodo di terra monouso sull'arto posteriore o sulla coda controlaterale. Inserire con cautela un elettrodo ad ago per autoclave da 27 gauge e 25 millimetri, specificamente progettato per l'elettromiografia a fibra singola, nel muscolo gastrocnemio destro. Inserire l'elettrodo dell'ago per elettromiografia a fibra singola in parallelo con le fibre muscolari del gastrocnemio per catturare il potenziale d'azione della singola fibra.
Applicare la stimolazione a corrente costante al nervo sciatico destro a una frequenza di 10 hertz, utilizzando un intervallo di intensità da 0,3 a 10 milliampere e una durata dell'impulso di 0,1 millisecondi. Regola il guadagno da 200 microvolt a 1000 microvolt per divisione per migliorare la visualizzazione del potenziale. Configurare la velocità di scansione in modo che sia di 500 microsecondi per divisione.
Per classificare una risposta come SFAP, deve mostrare un tempo di salita inferiore a 500 microsecondi, un'ampiezza minima di 200 microvolt e dimostrare un comportamento totale o nullo. Calcola il jitter o la variabilità della latenza SFAP tra scariche consecutive dopo almeno 50 stimolazioni utilizzando l'equazione data. Valutare e quantificare i blocchi.
Dopo aver valutato 10 sinapsi di ciascun animale, calcola il jitter e determina i valori medi per animale. Quando si registrano potenziali che mostrano un blocco intermittente, aumentare l'intensità dello stimolo per confermare che il fallimento della SFAP non è dovuto alla stimolazione submassimale. Durante la somministrazione di rocuronio, l'EMG a fibra singola ha mostrato una maggiore variabilità della trasmissione e del blocco della giunzione neuromuscolare rispetto agli individui sani.
