Questo lavoro è sostenuto da una sovvenzione VICI (Merel Kindt) dall&#39;Organizzazione olandese per la ricerca scientifica.

Dichiarazione etica: Il nostro protocollo medico approvato soddisfa i requisiti del Comitato Etico del Dipartimento di Psicologia presso l&#39;Università di Amsterdam per testare i partecipanti umani. 1. Attacco della paura potenziato spaventare e Shock Elettrodi <ol><li> Assicurarsi che l&#39;impostazione sperimentale consiste di una stanza suono-attenuato partecipanti e una sala separata sperimentatore. </li><li> Utilizzare due computer con quattro schermi per la registrazione e monitoraggio risposte fisiologiche nonché per presentare lo script sperimentale ai partecipanti. </li><li> Fissare i collari biadesivi agli elettrodi EMG. </li><li> Pulire la pelle del partecipante sotto l&#39;occhio destro o sinistro e sulla fronte con un tampone imbevuto di alcool. Istruire i partecipanti a tenere gli occhi chiusi per evitare potenziali irritazione oculare. </li><li> Riempire il centro degli elettrodi EMG con elettrolito altamente conduttivo gel utilizzando una siringa. Non cercare di riempire gli elettrodi applicando piccole quantità di gel successivamente come questo aumenta il rischio di bolle d&#39;aria all&#39;interno del gel, che possono influenzare negativamente le registrazioni. </li><li> Fissare uno degli elettrodi EMG sotto la palpebra inferiore destra o occhio sinistro in linea con la pupilla nello sguardo in avanti. Fissare la seconda circa 1 - 2 cm lateralmente alla prima seguendo la curvatura della palpebra inferiore. Collegare un riferimento di terra sulla fronte di circa 1 cm sotto l&#39;attaccatura dei capelli. Il posizionamento ottimale degli elettrodi rispetto al muscolo può richiedere regolazioni individuali. </li><li> Applicare una goccia di gel conduttivo sugli elettrodi urto e fissarli sul polso superiore sinistro utilizzando cinghia di nylon Velcro. Assicurarsi che la cinghia non è troppo stretto. </li><li> Regolare l&#39;intensità della scossa elettrica 2-msec per ogni partecipante individualmente. Informare i partecipanti che lo shock dovrebbe essere &quot;scomodo, ma non dolorosa&quot;. </li><li> Manualely innescare le scosse. Inizia un&#39;intensità di 1 mA e continuare innescando singoli urti - aumentando gradualmente l&#39;intensità in incrementi di 2 o 3 mA - fino al partecipante indica che lo shock è &quot;scomodo ma non dolorosa&quot;. </li><li> Annotare il livello di shock finale e mantenere questo livello per tutto il resto dell&#39;esperimento. </li></ol> 2. Paura Acquisition - Day 1 Durata circa 45 min. <ol><li> Istruire i partecipanti circa la consegna di shock e l&#39;eventuale somministrazione di propranololo HCl. Ulteriore informarli che propranololo HCl è usato per trattare l&#39;ipertensione. Ottenere il consenso informato scritto. </li><li> Schermo i partecipanti per quanto riguarda la loro salute e le eventuali condizioni che controindicato indicare prendere una singola dose di 40 mg di propranololo HCl: gravidanza, disturbi convulsivi, disturbi respiratori, malattie cardiovascolari, malattie cardiovascolari in parenti di prima linea, diabete, del fegato o malattia renale, l&#39;uso corrente di un farmaco anti-depressivo, o psicosi. </li><li> Ottenere la pressione del sangue e misurazione della frequenza cardiaca con un sfigmomanometro elettronico. Chiedere ai partecipanti di rimuovere il loro braccio dalle maniche e mettere il bracciale gonfiabile saldamente sul braccio. Istruire i partecipanti di rilassarsi e sedersi con il braccio leggermente piegato allo stesso livello come il loro cuore e riposare comodamente su un tavolo o su un&#39;altra superficie piana. BP deve essere superiore a 90/60 mmHg e frequenza cardiaca superiore a 60 bpm per l&#39;inclusione nella sperimentazione. </li><li> Amministrare la State-Trait Anxiety Inventory 44 e l&#39;ansia Sensitivity Index 45 quando un partecipante è medicalmente cancellato. Gestire anche la Spider Phobic Questionario 46 quando si utilizzano le immagini di ragni come stimoli condizionati. </li><li> Posizionare i partecipanti di fronte a uno schermo di computer e collegare gli elettrodi EMG e ammortizzatori (vedi capitolo 1 &quot;Attacco della paura potenziato Startle und Shock Elettrodi &quot;). </li><li> Utilizzare due diverse procedure di apprendimento - vedere i passi 2.6.1 e 2.6.2. Informare i partecipanti sulle due immagini differenti vedranno sullo schermo del computer. Chiedere loro di monitorare il rapporto tra le immagini che stanno vedendo e quando uno shock viene ricevuto. <ol><li> L&#39;apprendimento non asintotica: Informare i partecipanti che una delle immagini sarà seguito dalla scossa elettrica nella maggior parte dei casi, mentre l&#39;altro non sarà mai seguita dallo shock. </li><li> Learning asintotica: Informare i partecipanti che delle due immagini sarà sempre seguita dalla scossa elettrica e che la foto non sarà mai seguiti dallo shock (ad esempio, su incarico di apprendimento paura). </li></ol></li><li> Informare i partecipanti sulle rumori forti saranno ascoltare attraverso le cuffie. Ordina loro di non badare ai rumori. </li><li> Istruire i partecipanti a riferire l&#39;aspettativa di una scossa elettrica during la presentazione di tutte le immagini spostando un cursore su scale di valutazione continue utilizzando un mouse e premere il pulsante sinistro del mouse entro 5 secondi dopo stimolo esordio al fine di confermare la loro aspettativa. Garantire scale sono costituite da 11 punti etichettati da &quot;certamente no scossa elettrica&quot; ​​attraverso &quot;incerta&quot; a &quot;certamente una scossa elettrica&quot;. Presentare la bilancia continuamente in basso sullo schermo del computer, al fine di supportare i partecipanti a concentrare la loro attenzione sulle immagini. Quando le immagini spariscono il cursore dovrebbe tornare automaticamente alla posizione &quot;incerta&quot;. </li><li> Dirigere i partecipanti a tenere gli occhi sullo schermo e sedersi il più fermo possibile con entrambe le braccia poste in una posizione rilassata con polsi sulla scrivania di fronte a loro. Indossare le cuffie. Dim le luci e chiudere la porta. Avviare l&#39;esperimento dall&#39;altra stanza. </li><li> Durante l&#39;acquisizione paura una delle due immagini co-termina con lashock: CS1, mentre l&#39;altro è mai seguita dallo shock: CS2. Sfruttate paura stimoli rilevanti, al fine di rafforzare l&#39;associazione paura durante l&#39;acquisizione. Per esempio le immagini di ragni: numeri IAP 1200-1201. </li><li> Presente sia la CS1 e CS2 per 8 sec. Forti rumori o spaventare sonde - 40 msec e 104 dB - sono presentati 7 secondi dopo CS insorgenza; e per il CS1, questi sono seguiti da shock elettrico a 2 msec a 500 msec dopo. </li><li> Avviare la paura reale apprendimento presentando dieci sonde trasalimento di base per ridurre trasalimento reattività iniziale: <ol><li> L&#39;apprendimento non Asymptotic: Presentare un totale di 8 prove CS1 su uno schema di rinforzo del 75%: 6 prove CS1 sono rafforzate da una scossa - la prima e la quinta prova sono non rinforzato. Ulteriori prove attuali 8 CS2 e 8 NA prove durante i-intervalli di prova dell&#39;Inter. </li><li> Learning asintotica: Presentare un totale di 3 prove CS1 su uno schema di rinforzo 100%: tutti gli studi CS1 sono reinforced da uno shock. Ulteriori prove attuali 3 CS2 e 3 rumore solo spaventare sonde (NA) durante i-intervalli di prova dell&#39;Inter. </li></ol></li><li> Controbilanciare l&#39;assegnazione delle immagini come CS1 e CS2 partecipanti in tutto. Casuale l&#39;ordine di tipo di prova all&#39;interno di blocchi di CS1 - CS2 - NA tale che nessun processo di tipo ripete più di due volte. Variare le inter-prova-intervalli - durante i quali i partecipanti vedono uno schermo nero - tra i 15 sec 20 sec e 25 sec, con una media di 20 sec. </li><li> Dopo il completamento dell&#39;esperimento staccare gli elettrodi e lasciare che i partecipanti pulire il gel. </li><li> Istruire i partecipanti di giudicare la piacevolezza dello shock dell&#39;11 punti di rating scale che vanno da meno 5 (cioè, sgradevole) a 5 (cioè, piacevole). </li><li> Esplicitamente istruire i partecipanti a ricordare ciò che avevano appreso durante l&#39;acquisizione paura al fine di aumentare la ritenzione della contingenza CS-US i seguenti giorni eper impedire loro di erroneamente in attesa di un sistema di emergenza diversa durante le prove successive. Inoltre, per facilitare i campioni salivari il giorno dopo, istruire i partecipanti a non esercitare la caffeina e alcol durante la 12 ore ed evitare cibi e bevande diverse dall&#39;acqua così come il fumo e il dente spazzolatura durante la 2 ore prima della prossima sessione . </li><li> Pulire gli elettrodi con acqua dopo l&#39;uso: sbarazzarsi di tutto il gel, senza graffiare qualsiasi parte dello strato AgCl. Dopo la pulizia non pulire l&#39;acqua, ma utilizzare un diverso set di elettrodi sul prossimo partecipante e lasciare l&#39;altro insieme ad asciugare nel corso del tempo. </li></ol> 3. Memoria riattivazione - Day 2 Durata circa 105 min. <ol><li> Assegna in modo casuale i partecipanti sia il propranololo HCl o pillola placebo condizioni con la restrizione che le condizioni sono abbinati a STAI punteggi più vicino possibile dato che tratto anxiety determina gli effetti di paura riduzione di interrompere riconsolidamento 47. Abbinare i partecipanti punteggi SPQ e quando si utilizzano le immagini di ragni come stimoli condizionati. </li><li> Ottenere la pressione del sangue e misurazione della frequenza cardiaca e campioni salivari: istruire i partecipanti solo per inserire il tampone in bocca per circa 3 minuti. Mantenere le Salivettes a meno 25 ° C dopo la rimozione. </li><li> Per il propranololo condizione di assenza di riattivazione passare al punto 4.8.1. </li><li> Posizionare i partecipanti di fronte allo schermo del computer e collegare gli elettrodi EMG e urto (vedi Sezione 1 &quot;Attacco della paura potenziato Startle e Shock Elettrodi&quot;). Segnala ai partecipanti che l&#39;intensità della scossa rimarrà lo stesso. </li><li> Informare i partecipanti che gli stessi due immagini saranno presentate sullo schermo del computer e chiedere loro di ricordare ciò che avevano imparato il giorno precedente - una delle immagini si again essere seguito dalla scossa elettrica sia più (ad esempio, l&#39;apprendimento non asintotico) o tutti (cioè di apprendimento asintotico) casi, mentre l&#39;altro non sarà mai seguita dallo shock. Istruire i partecipanti a riferire l&#39;aspettativa di una scossa elettrica durante la presentazione di tutte le immagini. Indossare le cuffie e abbassare le luci. Chiudi la porta e avviare l&#39;esperimento dall&#39;altra stanza. </li><li> Iniziare la memoria riattivazione presentando 10 sonde trasalimento di base per ridurre trasalimento reattività iniziale. Successivo presentare un singolo trial non rinforzato CS1 seguito da un singolo trial NA. </li><li> Staccare i partecipanti del set-up sperimentale e far loro pulire il gel. Loro posto dietro l&#39;altra tabella. </li><li> Amministrare &quot;doppio cieco&quot; una dose orale di pillola placebo o 40 mg di propranololo HCl. Pillole dovrebbero essere accecati da una farmacia o un collega indipendente dello studio. Inoltre un medico di guardia con la conoscenza del protocollo is ritenuto necessario dopo somministrazione del farmaco. <ol><li> Amministrare &quot;single-blind&quot; una dose orale di 40 mg di propranololo HCl per il propranololo condizione di no-riattivazione. </li></ol></li><li> Inserire un periodo di riposo di circa 90 min. Offrire le riviste partecipanti a leggere. Pulire gli elettrodi nel frattempo. </li><li> Ancora ottenere BP e le misurazioni della frequenza cardiaca, nonché campioni salivari. </li></ol> 4. Test - Day 3 Durata circa 45 min. <ol><li> Ottenere BP e misurazione della frequenza cardiaca. </li><li> Posizionare i partecipanti di fronte allo schermo del computer e collegare gli elettrodi EMG e scossa. Anche in questo caso riferire ai partecipanti che l&#39;intensità della scossa rimarrà lo stesso. </li><li> Istruire i partecipanti che gli stessi due immagini saranno presentate sullo schermo del computer. Anche istruire i partecipanti a riferire l&#39;aspettativa di una scossa elettrica durante la presentazione di tutta l&#39;immagines. Indossare le cuffie e abbassare le luci. Chiudi la porta e avviare l&#39;esperimento dall&#39;altra stanza. </li><li> Avviare l&#39;esperimento con la presentazione di 10 sonde trasalimento di base. Durante estinzione presentare circa 12 rinforzate prove CS1 e CS2 nonché 12 NA prove. Dopo l&#39;estinzione partecipanti ottengono tre non segnalato USs: reintegrazione. Anche in questo caso presentare i partecipanti con circa 4 rinforzate prove CS1 e CS2 e 4 prove NA seguenti USS non segnalato: test reintegrazione. </li><li> Staccare gli elettrodi e lasciare che i partecipanti pulire il gel. Pagare i partecipanti una piccola somma per la loro partecipazione all&#39;esperimento. Pulire gli elettrodi con acqua. </li></ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

In una serie di studi abbiamo costantemente dimostrato che, a prescindere dal genere, 40 mg di noradrenergico propranololo beta-bloccante o somministrato prima o dopo la memoria riattivazione efficacemente neutralizzato la paura condizionata rispondere (cioè difensiva risposte di allarme). Nessuno dei quattro meccanismi di ricaduta - reintegrazione, di rinnovo, di recupero spontaneo e rapido riacquisizione - sono stati osservati dopo interruzione riconsolidamento con propranololo 27-32,37-39. È interessante notare che gli effetti di paura neutralizzanti sono stati osservati solo per la risposta di trasalimento difensiva, ma non per la valutazione aspettativa minaccia né per la conduttanza cutanea. I dati per il condizionamento elettrodermica non sono riportati qui come i modelli generali per l&#39;SCR non si è discostato significativamente da i feedback aspettativa. Nella ricerca condizionamento alla paura umana, più indici di risposta condizionata (per esempio, US-aspettativa, SCR, r trasalimentoesponse, dilatazione della pupilla, l&#39;attività neurale) sono di solito ottenute per motivi di convalida incrociata 48. Tuttavia, ora vi sono prove convincenti che questi diversi livelli di risposta non necessariamente agiscono di concerto e possono anche dissociarsi da ogni altro 3,27-32,34,37,49. Si noti che la risposta di trasalimento è un riflesso difensivo automatica, che viene potenziato in risposta a un SC che è associato con un US di valenza negativa e possono generalmente essere osservato con USs di valenza neutro o positivo 49,50 (ad esempio, la stimolazione o vibrotattile reazione compito di tempo). Quindi, potenziamento del trasalimento riflesso difensivo è un indice affidabile e specifico di condizionamento avversivo 34. Al contrario, SCR condizionata può verificarsi indipendentemente dalla valenza del US 49,50. Dato che valenza affettiva degli Stati Uniti non modifica SCR, condizionata elettrodermica è una misura non specifico di eccitazione anticipatoria. Riteniamo pertanto che la SCR è meno suited come misura del comportamento nella ricerca di condizionamento avversivo umana. Se ci speculano sulla traduzione di questi risultati nella pratica clinica, diversi problemi e potenziali limitazioni sono da considerarsi. In primo luogo, ci si può chiedere se una manipolazione farmacologica del noradrenergico beta-bloccante è davvero necessario per interrompere il processo di riconsolidamento o se una procedura comportamentale volto ad interferire con riconsolidamento produrrebbe un effetto neutralizzante simile. Anche se un trattamento di una sessione di una bassa dose di propranololo è chiaramente non tossico, una procedura interamente comportamentale è sempre preferibile per un intervento farmacologico. Vi è infatti un metodo alternativo in cui la formazione di estinzione è presentato all&#39;interno della finestra di riconsolidamento 51. Diversi studi non sono riusciti però di replicare questi risultati originali di Schiller et al. 29,52-54 ma vedi 55,56. Oltre a questi risultati contrastanti, unaltro potenziale limite dell&#39;estinzione entro procedura di riattivazione è che nella pratica clinica la risposta di paura non è generalmente spenta in un trattamento di esposizione, usare una sessione. Ad esempio, l&#39;esposizione immaginario per i pazienti con PTSD si tiene tradizionalmente dieci sedute prima la paura scompare 57. Così, anche riconoscendo le evidenti svantaggi di un semplice trattamento farmacologico rispetto ad un intervento interamente comportamentale, riteniamo che la manipolazione noradrenergica della memoria riconsolidamento sembra essere più fattibile di estinzione all&#39;interno della finestra riconsolidazione. Una seconda questione riguarda le condizioni ottimali per attivare la memoria riconsolidamento. È sempre più evidente che i meccanismi che mediano l&#39;espressione comportamentale della paura sono chiaramente dissociate dai meccanismi che mediano il processo di riconsolidamento 31,32,58-62. Ad esempio, recenti studi su animali scoperti differenziale e r dissociabileeceptors nell&#39;amigdala basolaterale mediano l&#39;espressione, la destabilizzazione e la ristabilizzazione di precedenza condizionata ricordi paura 63,64. Una espressione comportamentale di memoria paura non è solo dissociato dai processi di mediazione riattivazione della memoria (cioè, l&#39;accesso a una traccia di memoria), sembra anche non essendo indispensabile per riconsolidamento a verificarsi 63. Come tale, la paura espressione durante memoria riattivazione non è informativa se la traccia di memoria entra in una fase labile. Dato che la memoria di destabilizzazione è un prerequisito per la noradrenergico beta-bloccante di interferire con il processo di ristabilizzazione, una questione importante è come possiamo dedurre successo destabilizzazione memoria nella pratica clinica. Una serie di risultati indicano che un fattore cruciale nell&#39;induzione riconsolidamento e demarcare riconsolidamento sia da recupero della memoria o il consolidamento di un 40,65 memoria romanzo è il grado di errore di previsione indotto durante memrecupero ory 31,32. Ma dato che nessun criterio oggettivo è disponibile per determinare il grado ottimale di errore di predizione nella pratica clinica, i risultati di laboratorio attuali non possono essere facilmente convertiti in protocolli di trattamento. Un&#39;altra sfida per la traduzione della letteratura neuroscientifica nella pratica clinica riguarda la validità ecologica del paradigma. Le prove per interrompere riconsolidamento è stato principalmente dimostrato negli animali e nell&#39;uomo per relativamente nuovi (un giorno di vita) e semplici ricordi di paura (cioè, shock tono; immagine shock). Non è ovvio che interrompere reconsolidation di reti memoria anziani, forti e più ampi per esempio in pazienti con PTSD è efficace come è stato dimostrato in laboratorio per cued paura condizionata. Anche per quanto riguarda la variabile dipendente non è ancora chiaro se le osservazioni della studi di laboratorio animale e umana generalizzare a pazienti con disturbi d&#39;ansia. La paura reEffetti durre sono finora dimostrati soprattutto per l&#39;espressione del comportamento di condizionamento avversivo (cioè congelamento comportamento nei roditori o difensiva riflesso di allarme negli esseri umani), con una sola eccezione, dove abbiamo dimostrato che anche i sentimenti soggettivi di disagio erano significativamente neutralizzati dal blocco noradrenergico di memoria riconsolidamento 37. Essa può essere messa in discussione se tali effetti di paura riducendo in laboratorio sono indicativi delle esperienze tipiche di paura e di comportamento di evitamento caratteristica dei pazienti con disturbi d&#39;ansia. La ricerca futura dovrebbe esaminare se i risultati attuali infatti generalizzare all&#39;annullamento comportamenti, uno dei sintomi centrali di disturbi d&#39;ansia. In sintesi, anche se la procedura di condizionamento avversivo pavloviano è un ottimo strumento per studiare i meccanismi di base di apprendimento paura e della memoria, non possiamo tradurre facilmente i risultati di laboratorio nella pratica clinica. Le intuizioni che abbiamo have state acquisendo sul ottimale, di confine e le condizioni necessarie per la memoria riconsolidamento deve essere considerato solo come un punto di partenza per lo sviluppo di trattamenti a base di riconsolidamento-. D&#39;altra parte, la vasta ricerca sulla formazione estinzione ha comportato interventi esposizione sulla estinzione-ancora, che appartengono ai trattamenti più efficaci per i disturbi d&#39;ansia e altri disturbi correlati. Dato che il blocco noradrenergico di memoria riconsolidamento adombra l&#39;effetto ansiolitico di apprendimento dell&#39;estinzione, interrompendo punti riconsolidamento a un nuovo intervento promettente per ridurre efficacemente eccessivi e irrazionali paure.

I nostri cervelli sono programmati per imparare. Gli esseri umani sono ben attrezzate con la capacità di apprendere i potenziali pericoli della vita e forse ancora più importante per imparare i predittori di pericolo. Pavloviano condizionata repulsivo è un ottimo strumento per lo studio paura associativa apprendimento non solo negli esseri umani, ma anche in una vasta gamma di organismi 1,2. Questa procedura comporta la presentazione di uno stimolo innocuo biologicamente neutro condizionata (CS, ad esempio, un tono o foto) con uno stimolo incondizionato nocivi o dannosi (US), tipicamente un lieve scossa elettrica. Se il CS diventa un predittore affidabile degli Stati Uniti, il CS suscitare risposte comportamentali condizionate specie tipiche (ad esempio, il congelamento nei ratti e potenziato startle reflex nell&#39;uomo), che sono concettualizzata come espressioni di paura (vedi 3 per i commenti critici su questo terminologia). Non solo ricerca di condizionamento aversive aggiungere ad una migliore comprensione della molecolare e cellulareprocessi di apprendimento associativo paura e la memoria 4, ma fornisce anche una base per comprendere l&#39;eziologia e il corso dei disturbi d&#39;ansia 5. Anche se porta ricordare che i disturbi d&#39;ansia non sono necessariamente il risultato di esperienze condizionata dirette come gli eventi traumatici. Essi possono anche derivare da paura esperienze di apprendimento indiretti o vicarie 6. Ma a prescindere dalla storia di apprendimento, la memoria associativa paura è alla base dei disturbi d&#39;ansia. Il condizionamento pavloviano paradigma non solo ha dimostrato la sua utilità nella comprensione dell&#39;origine dei disturbi d&#39;ansia, ma è anche un ottimo modello traslazionale per sviluppare e trattamento anticipo per i disturbi d&#39;ansia 5. In laboratorio le due procedure più ampiamente studiato per ridurre imparato paura sono (1) l&#39;estinzione e (2) interruzione di riconsolidamento. Anche se l&#39;estinzione di formazione - cioè, la ripetuta non rinforzato ri-esposizione aCS 7,8 - è un efficace studio di strategia ansiolitici, degli animali e la paura di condizionamento umano dimostrano con certezza che la risposta di paura condizionata può facilmente tornare da ri-esposizione a non segnalato USs (cioè, ripristino), un cambiamento di contesto (ad esempio, il rinnovo), o il passare del tempo (ad esempio, il recupero spontaneo) 7,9,10. Un consenso è stata la costruzione che l&#39;apprendimento di estinzione non cancella la memoria paura originale, ma riflette invece la formazione di una nuova memoria inibitorio. Di conseguenza, la memoria paura può riemergere conseguente ritorno di paura anche dopo originariamente successo estinzione paura. Le varie fonti di ricaduta sono ancora una grande sfida per la pratica clinica. Un approccio alternativo per diminuire la paura condizionata rispondere è il più recente (ri) scoperto procedura di interruzione memoria riconsolidamento da agenti farmacologici. Questa procedura è molto promettente in quanto diminuisce non solo conditiopaura ned rispondere ma sembra addirittura di cancellare la memoria associativa paura, che potrebbe finalmente risolvere il problema della ricaduta. Riconsolidamento memoria si riferisce ad un processo in due fasi con cui memorie precedentemente consolidate trasferiscono ad uno stato transitorio destabilizzato al recupero e richiedono un ristabilizzazione dipendente dal tempo a persistere 14-18. La trascrizione genica, sintesi di proteine ​​e RNA sono necessari per questo ristabilizzazione e offrono una finestra di opportunità per gli agenti amnesici di influenzare la memoria paura. Amnesia per paura imparato è stata dimostrata negli animali da farmaci (ad esempio, anisomycin) rivolte alla sintesi proteica necessaria 14,19,20 o il rilascio di neurotrasmettitori 21,22. La sintesi proteica può essere disturbato dalla noradrenergico propranololo beta-bloccante, che dovrebbe inibire la noradrenalina stimolata CREB fosforilazione 23-25. La paura ridurre gli effetti di propranololo sono stati dimostrati inanimali ed esseri umani 26-32. In una serie di discriminanti studi paura condizionata, abbiamo costantemente dimostrato che propranololo (40 mg) somministrato prima o dopo la memoria riattivazione effettivamente ridotto la risposta di trasalimento paura condizionata e ha impedito il ritorno della paura nei partecipanti sani. Prova di principio Il progetto base utilizzato nei nostri studi paura condizionata umani interrompere riconsolidamento prevede prove su diverse fasi attraverso tre giorni consecutivi a distanza di almeno 24 ore, al fine di (1) supporto (ri) il consolidamento dei ricordi e (2) consentire la droga per lavare prima del test. Il giorno 1 - la fase di acquisizione paura, i partecipanti sani sono esposti a una serie di presentazioni di immagini. Una foto di stimolo (CS1 +) viene ripetutamente accoppiato con uno stimolo elettrico avversivo (USA), con la conseguente acquisizione di una associazione paura, mentre un altro stimolo immagine (CS2-) è mai seguita da un US. Il giorno 2 - la fase di riattivazione della memoria, riesposizione allo stimolo condizionato non rinforzato (CS1) innesca tipicamente una risposta di paura condizionata. In questa fase, si sistemicamente amministrare 40 mg propranololo HCl, un antagonista del recettore β-adrenergico che colpisce indirettamente la sintesi proteica necessaria per reconsolidation 25. In considerazione delle concentrazioni plasmatiche di picco di 33 propranololo, abbiamo somministrato una dose orale di propranololo 90 minuti prima della riattivazione della memoria paura nostri primi esperimenti. Tuttavia, per un test più ottimale riconsolidazione, l&#39;agente amnestic deve essere somministrato dopo la riattivazione di memoria. Pertanto, nei nostri ultimi esperimenti abbiamo sempre somministrato propranololo dopo la memoria riattivazione con risultati molto simili. Il giorno 3 - la fase di test, il mantenimento della memoria timore è testata 24 ore dopo l&#39;intervento (cioè, prima prova giorni di prova 3), seguita daun&#39;estinzione procedure e trigger situazionali per testare il ritorno della paura (cioè, reintegrazione, il rinnovamento, recupero spontaneo, veloce riacquisizione). Per determinare se l&#39;effetto di propranololo richiede recupero attivo della memoria paura, il farmaco deve essere somministrato a un altro gruppo, paura condizionata, senza riattivazione della memoria (cioè condizioni propranololo no-riattivazione) 27,28. Abbiamo usato il potenziamento del riflesso di trasalimento come misura per paura condizionata rispondere e in linea degli Stati Uniti rating aspettativa come indice per l&#39;apprendimento contingenza. Il potenziamento del riflesso di trasalimento è concepito come un indice specifico e affidabile di paura 34, subserved dall&#39;amigdala 35. Lo stimolo-trasalimento suscitando più comunemente usata è la &quot;probe startle&quot;, un forte rumore che viene presentato attraverso le cuffie durante uno stimolo o nell&#39;intervallo tra due presentazioni stimolo (ad esempio, gli intervalli tra le prove) <sup&gt; 36. Startle risposte forti al rumore durante il timore stimolo condizionato (CS1 +) rispetto agli stimoli di controllo (CS2-) riflette lo stato di paura del partecipante suscitato dallo stimolo temuto (CS1 +). In una serie di 10 esperimenti consecutivi in campioni indipendenti 27-32,37-39 abbiamo costantemente replicato nostro reperto originale dove interrompere riconsolidamento della memoria paura da un bloccante propranololo beta-adrenergici HCl efficacemente ridotto il riflesso di allarme condizionato e impedito il ritorno della paura 27 . Le osservazioni che l&#39;esposizione a rinforzi primari (cioè, reintegrazione), un cambiamento di contesto (ad esempio, di rinnovo) o semplice il passaggio del tempo (ad esempio, il recupero spontaneo) non ha portato al riemergere di paura condizionata rispondere come è generalmente osservata dopo l&#39;allenamento di estinzione, sostenere la superiorità di interrompere riconsolidamento su apprendimento estinzione. In aggiunta a questitecniche di recupero, l&#39;apprendimento riacquisizione non hanno evidenziato un risparmio della risposta di paura precedentemente appreso. In sintesi, questi risultati suggeriscono che interrompere riconsolidamento della memoria associativa paura da propranololo effettivamente ridotto l&#39;espressione emotiva della memoria paura. Inoltre, abbiamo testato diversi confini e condizioni necessarie per interrompere il riconsolidamento: (1) La sessione riattivazione memoria sembra procedurale simile alla formazione di estinzione (cioè, l&#39;esposizione non armato), ma dovrebbe coinvolgere le prove non rinforzate meno di estinzione a causa della formazione noradrenergici beta-bloccanti (es , propranololo) può anche interferire con la formazione della memoria estinzione invece di puntare la memoria originaria paura 40,41; (2) il recupero della memoria non è sufficiente per la memoria riconsolidamento 18,31,42,43. Propranololo ha ridotto solo la paura condizionata rispondere quando c&#39;era qualcosa da imparare durante il sess recuperoion 31,32. Una discrepanza tra ciò che è già stato appreso e ciò che può essere appreso in una determinata sessione di recupero (ad esempio, errore di predizione) sembra essere necessario per indurre riconsolidamento della memoria paura associativa 32. I risultati indicano che il verificarsi di un errore di predizione è una condizione necessaria per reconsolidation e forniscono uno strumento utile per sviluppare e ottimizzare trattamenti a base riconsolidazione-per i pazienti che soffrono di disturbi d&#39;ansia.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1319">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Name of Material - Equipment</td>
			<td style="width:335px;">Company</td>
			<td style="width:267px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:487px;">Comments - Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 computers with 4 screens</td>
			<td>Dell</td>
			<td>Optiplex 9010</td>
			<td style="width:487px;">Recording and monitoring physiological responses. Presenting the experimental script.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amplifier</td>
			<td>Developed by B. Molenkamp - University of Amsterdam</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Designed around a Burr Brown INA101 amplifier and ISO103 isolation stage.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:86px;">VSSRP98&#160;</td>
			<td>Developed by B. Molenkamp - University of Amsterdam</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Physiological registration software. Record electromyography - EMG - activity using a bundled pair of electrodes wires connected to a front-end amplifier with an imput resistacne of 10 M&#937; and a bandwidth of DC-1500 Hz. Raw EMG signals are integrated in the amplifier. Integrated EMG signals are sampled at 1000 Hz and used for data analysis.</td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;">MATLAB</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Analyzing data. Peak amplitudes are determined by taking the baseline 50 ms before probe onset to peak differences within 30 - 150 ms following probe onset and are recorded in microvolt.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Presentation</td>
			<td>NeuroBehavioral Systems Inc. - USA</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Stimulus presentation.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Constant current stimulator&#160;</td>
			<td>Digitimer - UK</td>
			<td>DS7A</td>
			<td style="width:487px;">Generates electrical stimulation.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Shock electrodes</td>
			<td>Made by B. Molenkamp - University of Amsterdam</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Ag electrodes of 20 mm * 25 mm with fixed inter-electrodes mid-distance of 45 mm.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Headphones</td>
			<td>Sennheiser Electronic GmbH &#38; CO - Germany</td>
			<td>HD 25-1 II</td>
			<td style="width:487px;">Presentation of startle probse and background noises.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EMG electrodes</td>
			<td>Made by B. Molenkamp - University of Amsterdam</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Three 7 mm sintered Ag-AgCl electrodes.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Double-sided adhesive collars</td>
			<td>MedCaT - the Netherlands</td>
			<td>848125</td>
			<td style="width:487px;">13-mm x 5-mm. For attaching the EMG electrodes to the skin.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Conductive gel</td>
			<td>Signa Gel - Parker Laboratories Inc. - USA&#160;</td>
			<td>224.550.011</td>
			<td style="width:487px;">Facilitates conduction from the skin to both the EMG and shock electrodes.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alcohol swabs&#160;</td>
			<td>Sanadep 0.5 % - Microtek Medical - the Netherlands</td>
			<td>3053800</td>
			<td style="width:487px;">For cleaning the skin of the participant.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sphygmomanometer</td>
			<td>Omron Healthcare Europe B.V. - the Netherlands</td>
			<td>M4-I HEM-752-E</td>
			<td style="width:487px;">Measuring blood pressures and heart rate.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton salivettes</td>
			<td>Sarstedt - Germany</td>
			<td>511.534</td>
			<td style="width:487px;">Obtaining salivary samples.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Curved tip syringe</td>
			<td>Monoject - Covidien - USA</td>
			<td>412</td>
			<td style="width:487px;">Applies gel to EMG and shock electrodes.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Propranolol HCl - 40 mg and placebo pills&#160;</td>
			<td>Huygens Apotheek - the Netherlands</td>
			<td></td>
			<td style="width:487px;">Pills should be identical in exterior.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

disrupting reconsolidation of fear memory in humans by a noradrenergic &#946;-blocker

Il progetto base utilizzato nei nostri studi paura condizionata umani interrompere riconsolidamento prevede prove su diverse fasi attraverso tre giorni consecutivi. Il giorno 1 - la fase di acquisizione paura, i partecipanti sani sono esposti a una serie di presentazioni di immagini. Una foto di stimolo (CS1 +) viene ripetutamente accoppiato con uno stimolo elettrico avversivo (USA), con la conseguente acquisizione di una associazione paura, mentre un altro quadro di stimolo (CS2-) non è mai seguita da una statunitense. Il giorno 2 - la fase di riattivazione della memoria, i partecipanti sono nuovamente esposti allo stimolo condizionato senza gli Stati Uniti (CS1), che innesca tipicamente una risposta di paura condizionata. Dopo la riattivazione di memoria somministrando una dose orale di 40 mg di propranololo HCl, un antagonista del recettore β-adrenergico che colpisce indirettamente la sintesi proteica necessaria per ricompattamento inibendo la fosforilazione noradrenalina CREB-stimolata. Il giorno 3 - la fase di test, il participants sono più esposte agli stimoli condizionati rinforzate (CS1 e CS2-) per misurare l&#39;effetto di ridurre la paura della manipolazione. Questo test di ritenzione è seguita da una procedura di estinzione e la presentazione di trigger situazionali per testare per il ritorno della paura. Potenziamento degli occhi batter trasalimento reflex è misurata come indice per paura condizionata rispondere. La conoscenza dichiarativa dell&#39;associazione paura è misurata attraverso valutazioni on-line aspettativa Stati Uniti durante ogni presentazione CS. In contrasto con l&#39;apprendimento estinzione, interrompendo ricompattamento rivolge la memoria paura originale impedendo così il ritorno della paura. Anche se le applicazioni cliniche sono ancora nella loro infanzia, interrompendo riconsolidamento della memoria paura sembra essere una nuova tecnica promettente con la prospettiva di persistentemente smorzare l&#39;espressione della memoria paura nei pazienti che soffrono di disturbi d&#39;ansia e altri disturbi psichiatrici.

Manipolazione controllo propranololo: Contrariamente a pillola placebo, sia sistolica e diastolica e salivari alfa amilasi dovrebbe diminuire 90 min dopo l&#39;assunzione propranololo durante riattivazione della memoria, che indica che la manipolazione farmaco esercita il suo effetto fisiologico desiderato. BP e alfa amilasi salivare devono ancora ritornare ai livelli basali alla prova il giorno 3. USA valutazioni aspettativa: Con l&#39;attuale protocollo non possono aspettarsi alcun effetto del trattamento propranololo sulle valutazioni aspettativa statunitensi. Indipendentemente dal trattamento farmacologico, i differenziali degli Stati Uniti rating aspettativa dovrebbero aumentare durante l&#39;acquisizione paura e diminuire durante l&#39;estinzione di apprendimento 48 ore più tardi. Inoltre la presentazione del non segnalato USs dovrebbe tradursi in un ritorno dei rating aspettativa differenziale (Figura 1A-C). <strong&gt; prerequisito per riconsolidamento: Al fine di innescare il processo di riconsolidamento, la traccia di memoria dovrebbe in primo luogo essere destabilizzato come condizione necessaria per la fase di ristabilizzazione. Per la destabilizzazione memoria paura, l&#39;aspettativa di minaccia al momento della riattivazione (cioè intatta la speranza di CS1-US) è necessario il 31 ma non sufficiente. Perseguendo l&#39;idea che la funzione di riconsolidamento è aggiornare la traccia di memoria a un ambiente in continua evoluzione, la riattivazione della memoria dovrebbe coinvolgere anche un errore di previsione (PE: una mancata corrispondenza tra ciò che è previsto e ciò che effettivamente accade). Dato che i feedback aspettativa statunitensi rimangono inalterati dalla manipolazione propranololo, cambiamenti nelle aspettative minaccia dall&#39;acquisizione di testare (PE) può servire come indicatore indipendente di destabilizzazione memoria (vedi 32 per maggiori dettagli). Ma solo quando la riattivazione della memoria segue apprendimento asintotica, questi cambiamenti di minaccia aspettativa may osservare. In caso di apprendimento non asintotico parzialmente rinforzato, uno spostamento aspettative minaccia non è necessaria per la memoria destabilizzazione. Quindi un processo di recupero può anche innescare riconsolidamento senza un cambiamento a livello di speranza dopo l&#39;apprendimento non asintotico. Startle paura di rispondere: acquisizione paura successo il giorno 1 è dimostrato da un aumento trasalimento paura differenziale risposta (cioè, CS1 vs. CS2) dal primo all&#39;ultimo processo di acquisizione (Figura 1D-F). Higher paura startle risposta allo stimolo che è stato precedentemente accoppiato con lo shock (CS1) rispetto al rumore da sola durante la riattivazione di memoria il giorno 2 indica inoltre che la memoria della paura è ben consolidata. Durante la fase di test il giorno 3 si può aspettare intatto paura startle risposta nel gruppo placebo: sussultare rispondere al CS1 dovrebbe essere h<html> igher rispetto al CS2 all&#39;inizio del test. Formazione Estinzione riduce successivamente il trasalimento differenziale di rispondere (cioè, CS1 vs. CS2). Inoltre la presentazione del unsignaled USs dovrebbe tradursi in un ritorno di paura rispondere alla CS1 rispetto al CS2 (Figura 1D). Contrariamente a pillola placebo, la somministrazione di propranololo HCl dovrebbe portare in una eliminazione della paura trasalimento differenziale di rispondere (cioè, CS1 vs. CS2) all&#39;inizio della fase di test il giorno 3. Inoltre ci si può aspettare che la non segnalato USs non recupererà la paura trasalimento di rispondere (Figura 1E). Si noti che propranololo non dovrebbe avere alcun effetto-paura riduzione quando la pillola viene somministrato senza riattivazione memoria il giorno 2 (Figura 1F). re 1 &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 52151 / 52151fig1highres.jpg &quot;width =&quot; 700px &quot;/&gt; Figura 1. voti aspettativa US alle prove CS1 e CS2 e spaventare risposte di paura alle prove CS1, CS2 e il rumore da solo (NA) durante l&#39;acquisizione, la memoria riattivazione, l&#39;estinzione e la prova per il placebo (A, D), propranololo (B, E), e propranololo riattivazione no- (C, F) gruppi R-CS1 -.. si riferisce ad un processo di riattivazione non rinforzato <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52151/52151fig1large.jpg" target="_blank">Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a>

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Disrupting Reconsolidation of Fear Memory in Humans by a Noradrenergic &amp;#946;-Blocker

Disrupting reconsolidation is a promising approach to dampen the behavioral expression of fear memory in patients with anxiety disorders or posttraumatic stress disorder. In a series of human fear conditioning studies we showed that disrupting reconsolidation by the noradrenergic &#946;-blocker propranolol is very effective in erasing conditioned fear responding.

L&#39;interruzione Ricompattamento della Paura memoria in esseri umani da un noradrenergico β-Blocker

The basic design used in our human fear-conditioning studies on disrupting reconsolidation includes testing over different phases across three consecutive ...

disrupting-reconsolidation-fear-memory-humans-noradrenergic

Research

JoVE Journal

Behavior

Disrupting Reconsolidation of Fear Memory in Humans by a Noradrenergic &#946;-Blocker

22.7K Views.  University of Amsterdam. Disrupting reconsolidation is a promising approach to dampen the behavioral expression of fear memory in patients with anxiety disorders or posttraumatic stress disorder. In a series of human fear conditioning studies we showed that disrupting reconsolidation by the noradrenergic β-blocker propranolol is very effective in erasing conditioned fear responding. 

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Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association between environmental cues and aversive experiences. In this test, mice are placed into a conditioning chamber and are given parings of a conditioned stimulus (an auditory cue) and an aversive unconditioned stimulus (an electric footshock). After a delay time, the mice are exposed to the same conditioning chamber and a differently shaped chamber with presentation of the auditory cue. Freezing behavior during the test is measured as an index of fear memory. To analyze the behavior automatically, we have developed a video analyzing system using the ImageFZ application software program, which is available as a free download at http://www.mouse-phenotype.org/. Here, to show the details of our protocol, we demonstrate our procedure for the contextual and cued fear conditioning test in C57BL/6J mice using the ImageFZ system. In addition, we validated our protocol and the video analyzing system performance by comparing freezing time measured by the ImageFZ system or a photobeam-based computer measurement system with that scored by a human observer. As shown in our representative results, the data obtained by ImageFZ were similar to those analyzed by a human observer, indicating that the behavioral analysis using the ImageFZ system is highly reliable. The present movie article provides detailed information regarding the test procedures and will promote understanding of the experimental situation.

This article presents a protocol for a contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system to assess fear learning and memory in mice.

Contestuali e Cued paura condizionata test utilizzando un sistema di video Analizzare in topi

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

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Comportamento

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

Trace paura condizionata in topi

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

Studying Food Reward and Motivation in Humans

A key challenge in studying reward processing in humans is to go beyond subjective self-report measures and quantify different aspects of reward such as hedonics, motivation, and goal value in more objective ways. This is particularly relevant for the understanding of overeating and obesity as well as their potential treatments. In this paper are described a set of measures of food-related motivation using handgrip force as a motivational measure. These methods can be used to examine changes in food related motivation with metabolic (satiety) and pharmacological manipulations and can be used to evaluate interventions targeted at overeating and obesity. However to understand food-related decision making in the complex food environment it is essential to be able to ascertain the reward goal values that guide the decisions and behavioral choices that people make. These values are hidden but it is possible to ascertain them more objectively using metrics such as the willingness to pay and a method for this is described. Both these sets of methods provide quantitative measures of motivation and goal value that can be compared within and between individuals.

This article describes a set of methods for the measurement of food related motivation and food related goal values in humans.

Studiare ricompensa in cibo e motivazione in esseri umani

A key challenge in studying reward processing in humans is to go beyond subjective self-report measures and quantify different aspects of reward such as ...

A Cognitive Paradigm to Investigate Interference in Working Memory by Distractions and Interruptions

Goal-directed behavior is often impaired by interference from the external environment, either in the form of distraction by irrelevant information that one attempts to ignore, or by interrupting information that demands attention as part of another (secondary) task goal. Both forms of external interference have been shown to detrimentally impact the ability to maintain information in working memory (WM). Emerging evidence suggests that these different types of external interference exert different effects on behavior and may be mediated by distinct neural mechanisms. Better characterizing the distinct neuro-behavioral impact of irrelevant distractions versus attended interruptions is essential for advancing an understanding of top-down attention, resolution of external interference, and how these abilities become degraded in healthy aging and in neuropsychiatric conditions. This manuscript describes a novel cognitive paradigm developed the Gazzaley lab that has now been modified into several distinct versions used to elucidate behavioral and neural correlates of interference, by to-be-ignored distractors versus to-be-attended interruptors. Details are provided on variants of this paradigm for investigating interference in visual and auditory modalities, at multiple levels of stimulus complexity, and with experimental timing optimized for electroencephalography (EEG) or functional magnetic resonance imaging (fMRI) studies. In addition, data from younger and older adult participants obtained using this paradigm is reviewed and discussed in the context of its relationship with the broader literatures on external interference and age-related neuro-behavioral changes in resolving interference in working memory.

A novel cognitive paradigm is developed to elucidate behavioral and neural correlates of interference by to-be-ignored distractors versus interference by to-be-attended interruptors during a working memory task. In this manuscript, several variants of this paradigm are detailed, and data obtained with this paradigm in younger/older adult participants is reviewed.

Un paradigma cognitivo per Indagare interferenze nella memoria di lavoro da distrazioni e interruzioni

Goal-directed behavior is often impaired by interference from the external environment, either in the form of distraction by irrelevant information that ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris water maze Test: Ottimizzazione per ceppo di topi e Ambiente di prova

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study demonstrates a quantitative sensory testing protocol using techniques to measure tactile sensation and pain threshold for pressure and heat using portable and easily accessed equipment. These techniques and equipment are ideal for new laboratories and clinics where cost is a concern or a limiting factor. We demonstrate measurement techniques for the following: cutaneous mechanical sensitivity on the arms and legs (von-Frey filaments), radiant and contact heat sensitivity (with both threshold and qualitative assessments using the Visual Analog Scale (VAS)), and mechanical pressure sensitivity (algometer, with both threshold and the VAS). The techniques and equipment described and demonstrated here can be easily purchased, stored, and transported by most clinics and research laboratories around the world. A limitation of this approach is a lack of automation or computer control. Thus, these processes can be more labor intensive in terms of personnel training and data recording than the more sophisticated equipment. We provide a set of reliability data for the demonstrated techniques. From our description, a new laboratory should be able to set up and run these tests and to develop their own internal reliability data.

The goal of this procedure is to demonstrate a battery of quantitative techniques for sensory and pain measurement in humans. The equipment and techniques described are commonly found in pain clinics or are easy to obtain.

Un protocollo di test manuali misurare Sensation e il dolore negli esseri umani

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

A Real-world What-Where-When Memory Test

Episodic memory is a complex memory system which allows recall and mental re-experience of previous episodes from one&#39;s own life. Real-life episodic memories are about events in their spatiotemporal context and are typically visuospatial, rather than verbal. Yet often, tests of episodic memory use verbal material to be recalled (word lists, stories). The Real-World What-Where-When memory test requires participants to hide a total of 16 different objects in 16 different locations over two temporal occasions, 2 h apart. Another two hours later, they are then asked to recall which objects (What) they had hidden in which locations (Where) and on which of the two occasions (When). In addition to counting the number of correctly recalled complete what-where-when combinations, this task can also be used to test real-world spatial memory and object memory. This task is sensitive to normal cognitive aging, and correlates well with performance on other episodic memory tasks, while at the same time providing more ecological validity and being cheap and easy to run.

A Real-world What-Where-When Memory Test

The Real-World What-Where-When memory test is a novel episodic memory test, in which participants need to recall which objects have been hidden in which locations on which of two distinct occasions. It is easy to run and is sensitive to normal cognitive aging.

Un mondo reale<em&gt; Che-Dove-Quando</em&gt; Test di memoria

Episodic memory is a complex memory system which allows recall and mental re-experience of previous episodes from one&#39;s own life. Real-life episodic ...

Reducing State Anxiety Using Working Memory Maintenance

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working Memory (WM) and the threat of shock paradigms. In the Sternberg WM paradigm, subjects are required to maintain a series of letters in the WM for a brief interval and respond by identifying whether the position of a given letter in the series matches a numerical prompt. In the threat of shock paradigm, subjects are exposed to alternating blocks where they are either at risk of receiving unpredictable presentations of a mild electric shock or are safe from the shock. Anxiety is probed throughout the safe and threat blocks using the acoustic startle reflex, which is potentiated under threat (Anxiety-Potentiated Startle (APS)). By conducting the Sternberg WM paradigm during the threat of shock and probing the startle response during either the WM maintenance interval or the intertrial interval, it is possible to determine the effect of WM maintenance on APS.

This protocol demonstrates how to measure anxiety-potentiated startle during the Sternberg Working Memory paradigm.

Ridurre l&#39;ansia di Stato utilizzando la manutenzione della memoria di lavoro

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working ...

Frame-by-Frame Video Analysis of Idiosyncratic Reach-to-Grasp Movements in Humans

Prehension, the act of reaching to grasp an object, is central to the human experience. We use it to feed ourselves, groom ourselves, and manipulate objects and tools in our environment. Such behaviors are impaired by many sensorimotor disorders, yet our current understanding of their neural control is far from complete. Current technologies for investigating human reach-to-grasp movements often utilize motion tracking systems that can be expensive, require the attachment of markers or sensors to the hands, impede natural movement and sensory feedback, and provide kinematic output that can be difficult to interpret. While generally effective for studying the stereotypical reach-to-grasp movements of healthy sighted adults, many of these technologies face additional limitations when attempting to study the unpredictable and idiosyncratic reach-to-grasp movements of young infants, unsighted adults, and patients with neurological disorders. Thus, we present a novel, inexpensive, and highly reliable yet flexible protocol for quantifying the temporal and kinematic structure of idiosyncratic reach-to-grasp movements in humans. High speed video cameras capture multiple views of the reach-to-grasp movement. Frame-by-frame video analysis is then used to document the timing and magnitude of pre-defined behavioral events such as movement start, collection, maximum height, peak aperture, first contact, and final grasp. The temporal structure of the movement is reconstructed by documenting the relative frame number of each event while the kinematic structure of the hand is quantified using the ruler or measure function in photo editing software to calibrate 2 dimensional linear distances between two body parts or between a body part and the target. Frame-by-frame video analysis can provide a quantitative and comprehensive description of idiosyncratic reach-to-grasp movements and will enable researchers to expand their area of investigation to include a greater range of naturalistic prehensile behaviors, guided by a wider variety of sensory modalities, in both healthy and clinical populations.

This protocol describes how to use frame-by-frame video analysis to quantify idiosyncratic reach-to-grasp movements in humans. A comparative analysis of reaching in sighted versus unsighted healthy adults is used to demonstrate the technique, but the method can also be applied to the study of developmental and clinical populations.

Analisi Video frame-by-Frame di idiosincratici Reach da afferrare movimenti in esseri umani

Prehension, the act of reaching to grasp an object, is central to the human experience. We use it to feed ourselves, groom ourselves, and manipulate ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders such as post-traumatic stress disorder (PTSD). To understand the biological mechanisms of fear dysregulation in PTSD, it is important to start with a valid animal model of the disorder. This protocol describes the methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of PTSD, in both rats and mice. SEFL was developed to recapitulate critical aspects of PTSD, including long-term sensitization of fear learning caused by an acute stressor. SEFL uses aspects of Pavlovian fear conditioning but produces a distinct and robust sensitized fear response far greater than normal conditional fear responses. The trauma procedure involves placing a rodent in a conditioning chamber and administering 15 unsignaled shocks randomly distributed over 90 minutes (for rat experiments; for mouse experiments, 10 unsignaled shocks randomly distributed over 60 minutes are used). On day 2, rodents are placed in a novel conditioning context where they receive a single shock; then, on day 3 they are placed back in the same context as on day 2 and tested for changes in freezing levels. Rodents that previously received the trauma display enhanced levels of freezing on the test day compared to those that received no shocks on the first day. Thus, with this model, a single highly stressful experience (the trauma) produces extreme fear of the stimuli associated with the traumatic event.

Here we describe the detailed methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of post-traumatic stress disorder, in both rats and mice. The model utilizes aspects of Pavlovian fear conditioning and freezing as an index of enhanced fear in rodents.

Paura lo stress-Enhanced Learning, un robusto modello del roditore del disturbo da Stress post-traumatico

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...