Un metodo standardizzato di raccolta del respiro nei bambini potrebbe essere utilizzato per rispondere a domande chiave sullo stato delle condizioni mediche pediatriche in modo non invasivo e per confrontare i risultati tra gli studi. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente la raccolta di campioni di respiro dai bambini in modo semplice, non invasivo e riproducibile. Le implicazioni di queste tecniche si estendono alla diagnosi di una vasta gamma di stati di malattia tra cui infezioni, disturbi metabolici e cancro e per test di punto di cura per uso clinico.
L'istruzione visiva è molto utile perché ci sono così tante parti nella nostra attrezzatura per la raccolta del respiro e perché la configurazione dell'attrezzatura può essere complicata. Per assemblare l'attrezzatura del campione di respiro, attaccare un bocchino di cartone al campionatore del respiro e attaccare una breve lunghezza di tubi di grande diametro all'altra estremità del campionatore. Collegare il connettore del respiro alla valvola del sacchetto tramite il tubo.
Ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso antiorario per sbloccare la valvola in posizione aperta e spingere lo stelo della valvola del sacchetto verso il basso per aprire il raccordo di ingresso per il campionamento. Ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso orario per bloccare la valvola aperta e confermare che la valvola blu sul campionatore del respiro è aperta e parallela al connettore. Quindi scrivi l'ID paziente, la data e l'ora sull'etichetta del sacchetto polimerico.
Prima di iniziare la raccolta del respiro, utilizzare un campionatore di respiro senza borsa per dimostrare l'espirazione del respiro al paziente. Spiega che il paziente dovrebbe respirare come farebbe quando fa saltare in aria un palloncino e continuare a respirare il più comodamente possibile. Fornire al paziente il campionatore di respiro etichettato e chiedere al paziente di espirare nella borsa come nella dimostrazione.
Chiudere la valvola blu sul dispositivo del campionatore del respiro non appena il paziente ha finito di respirare e dopo aver aspettato almeno 30 secondi tra le raccolte, il paziente ha ripetuto l'espirazione fino a quando non è stato raccolto almeno un litro di respiro. Si noti sull'etichetta della borsa quanti respiri sono stati raccolti dal paziente e ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso antiorario per spingere lo stelo della valvola verso l'alto per chiudere il raccordo di ingresso. Quindi ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso orario per bloccare la valvola del sacchetto chiusa e staccare la borsa dal campionatore del respiro.
Immediatamente dopo aver raccolto il campione di respiro, attaccare un nuovo sacchetto campione a una porta di uscita della pompa. E spingere lo stelo della valvola del sacchetto verso il basso per aprire il raccordo di ingresso per il campionamento. Ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso orario per bloccare la valvola aperta e impostare la pompa a funzionare a 100 millilitri al minuto per 12 minuti.
La pompa raccoglierà 1.200 millilitri di aria ambiente. Al termine della raccolta dell'aria ambiente, ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso antiorario e spingere lo stelo della valvola verso l'alto per chiudere il raccordo di ingresso. Quindi ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso orario per bloccare la valvola del sacchetto chiusa e staccare la borsa dalla pompa.
Per trasferire il campione di respiro o aria ambiente in un tubo di desorbimento termico entro un'ora dalla raccolta, rimuovere il tubo dal frigorifero e utilizzare il tubo di tappatura del produttore per rimuovere i tappi di stoccaggio a lungo termine dal tubo assorbente. Utilizzare i tubi per fissare l'estremità scanalata del tubo alla borsa e inserire l'altra estremità del tubo di desorbimento termico in un pezzo di tubo collegato a una pompa. Impostare la pompa a 100 millilitri al minuto per 10 minuti.
Ruotare la vite del pollice zigrinata sul lato del raccordo di ingresso in senso antiorario per aprire la valvola e spingere lo stelo della valvola verso il basso per aprire il raccordo di ingresso prima di avviare la pompa. Dopo 10 minuti, la pompa si fermerà. Rimuovere il tubo assorbente di desorbimento termico, stringere i tappi su entrambe le estremità e conservare il tubo assorbente in frigorifero fino all'analisi.
In questo studio rappresentativo sui campioni di respiro e aria ambiente di 10 bambini sottoposti a valutazione presso il St.Louis Children's Hospital, sono stati trovati in media composti organici o COV significativamente più volatili nei campioni del respiro rispetto ai campioni di controllo ambientale ambientale. L'aumento del numero di COV nel respiro rispetto all'aria ambiente può essere visibilmente distinto confrontando i cromatogrammi ionici totali rappresentativi in ciascun campione. Come misura di controllo della qualità della raccolta del respiro di successo, i livelli di due COV del respiro comuni sono stati confrontati con i controlli dell'aria ambiente.
Isoprene, uno dei COV più abbondanti nel respiro è stato misurato in una concentrazione dieci volte maggiore nei campioni di respiro pediatrico rispetto ai controlli dell'aria ambiente. Mentre la beta-pinena, che si trova tipicamente in sotto-parti per miliardo di livelli, ha mostrato una triplice abbondanza di respiro superiore rispetto all'aria confermando il successo della raccolta del respiro. È importante trasferire il campione di respiro ai tubi assorbenti entro un'ora dalla raccolta del respiro e notare l'orientamento del tubo durante il trasferimento.
Seguendo questa procedura, gli investigatori potrebbero voler perseguire studi su modelli animali per rispondere a domande aggiuntive sul pubblico di composti volatili del respiro.
